Plk1磷酸化修饰Tara蛋白对HeLa细胞胞质分裂及增殖的影响

发布时间：2018-11-04 15:26

【摘要】：目的:探讨有丝分裂相关激酶Plk1磷酸化修饰Tara蛋白在调控HeLa细胞胞质分裂及增殖中的作用。方法:运用酵母双杂交、免疫共沉淀、体外沉降实验确定Plk1与Tara两种蛋白是否能够相互结合;采用体内外磷酸化实验明确Plk1对Tara蛋白的磷酸化修饰;采用免疫荧光实验及流式细胞术检测Tara蛋白的磷酸化对HeLa细胞胞质分裂及细胞增殖的影响。结果:Plk1与Tara在体内外均能结合;Tara蛋白在体内外均能够被Plk1磷酸化修饰;过量表达Tara蛋白的磷酸化突变体对HeLa细胞的胞质分裂有明显的抑制作用,细胞增殖明显受阻。结论:Plk1能够与Tara结合,并通过磷酸化修饰Tara蛋白阻碍细胞胞质分裂进程及抑制细胞增殖。
[Abstract]:Aim: to investigate the role of mitotic kinase Plk1 phosphorylation modified Tara protein in regulating cytoplasmic division and proliferation of HeLa cells. Methods: yeast two-hybrid, immunoprecipitation, in vitro sedimentation assay were used to determine whether Plk1 and Tara could bind to each other, and in vitro and in vivo phosphorylation experiments were used to determine the phosphorylation modification of Tara protein by Plk1. The effects of phosphorylation of Tara protein on cytokinesis and proliferation of HeLa cells were detected by immunofluorescence assay and flow cytometry. Results: Plk1 and Tara could bind in vivo and in vitro, Tara protein could be modified by Plk1 phosphorylation in vitro and in vivo, and the phosphorylated mutants which overexpressed Tara protein could inhibit the cytokinesis of HeLa cells and inhibit the proliferation of HeLa cells. Conclusion: Plk1 can bind to Tara and modify Tara protein by phosphorylation to block the process of cytokinesis and inhibit cell proliferation.
【作者单位】： 郑州大学第一附属医院血液科;浙江大学附属第一医院骨髓移植中心;
【基金】：国家自然科学基金资助项目30900640 中国博士后科学基金资助项目2012M511591
【分类号】：R329

【参考文献】

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本文编号：2310254