同型半胱氨酸对内皮细胞Bcl-2基因甲基化水平的影响

发布时间：2019-02-15 10:06

【摘要】：目的研究同型半胱氨酸对人脐静脉内皮细胞Bcl-2基因启动子区甲基化水平及其表达的影响。方法以人脐静脉内皮细胞为实验对象,用含有不同浓度同型半胱氨酸的RPMI1640培养液对其作用48 h,MTT法测定细胞增殖生长能力并确定实验药物浓度;流式细胞术测定细胞凋亡水平;荧光定量PCR测定Bcl-2 mRNA表达;甲基化特异性PCR联合巢式降落式PCR测定Bcl-2启动子区甲基化水平。结果同型半胱氨酸对人脐静脉内皮细胞的增殖能力有明显的抑制作用,OD值从0.99±0.05逐渐下降至0.28±0.03(P0.01),呈明显的剂量效应关系;与对照组相比,实验组细胞凋亡率由2.30%±0.60%上升至16.40%±0.73%(P0.01),Bcl-2 mRNA表达明显下降(P0.01),Bcl-2基因启动子区甲基化水平降低(P0.05)。结论同型半胱氨酸通过下调Bcl-2启动子区的甲基化水平导致其mRNA表达水平减少,继而诱发内皮细胞凋亡,这可能在同型半胱氨酸促动脉粥样硬化过程中起到重要作用。
[Abstract]:Aim to study the effect of homocysteine on methylation level and expression of Bcl-2 gene promoter in human umbilical vein endothelial cells (HUVEC). Methods Human umbilical vein endothelial cells (HUVECs) were treated with RPMI1640 medium containing different concentrations of homocysteine for 48 h. Apoptosis level was measured by flow cytometry, Bcl-2 mRNA expression was detected by fluorescence quantitative PCR, methylation level of Bcl-2 promoter was detected by methylation specific PCR combined with nested PCR. Results homocysteine significantly inhibited the proliferation of human umbilical vein endothelial cells, and the OD value decreased from 0.99 卤0. 05 to 0. 28 卤0. 03 (P0. 01) in a dose-dependent manner. Compared with the control group, the apoptotic rate of the experimental group increased from 2.30% 卤0.60% to 16.40% 卤0.73% (P0.01), and the expression of Bcl-2 mRNA decreased significantly (P0.01). The methylation level of promoter region of Bcl-2 gene was decreased (P0.05). Conclusion homocysteine may play an important role in promoting atherosclerosis by down-regulating the methylation level of Bcl-2 promoter resulting in the decrease of mRNA expression and then inducing endothelial cell apoptosis.
【作者单位】： 宁夏医科大学;宁夏医科大学附属总院心脏中心;
【基金】：宁夏自然科学基金(NZ11266)资助
【分类号】：R341

【参考文献】

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