Endophilin A2通过激活内皮细胞VEGF-VEGFR2信号和抑制p53细胞凋亡通路促进血管新生及机制

发布时间：2019-02-26 15:46

【摘要】：近年来,肿瘤的发生发展以及冠心病,脑中风,动脉粥样硬化、炎症紊乱、退行性病变等疾病严重危害了人类的健康,如何预防与治疗这些疾病是一直亟待解决的健康问题。而在这些疾病的发病与治疗机制中,血管新生发挥重要作用。由组织中既存的成熟血管的内皮细胞发生增殖和游走,逐渐分化重构形成新的小血管的过程,叫做血管新生(angiogenesis)。在正常情况下血管新生仅发生在胚胎发育期,创伤愈合期等。而病理条件下会出现异常的血管新生,过度的血管生成在肿瘤的生长过程中表现尤为明显,而不足的血管生成会引起多种心血管系统疾病的发生,冠心病,脑中风,动脉粥样硬化等。血管新生是一个多步骤的复杂过程,包括:(1)内皮细胞激活,细胞器增多,在表面出现突起;(2)内皮细胞在促血管生成因子的刺激下产生蛋白酶,降解膜基质;(3)炎性细胞产生趋化因子,诱导内皮细胞出芽、迁移;(4)促有丝分裂原刺激DNA合成及内皮细胞增殖;(5)内皮细胞分化,细胞间连接、管腔重建,外膜细胞沿新的血管内皮向外迁移、分化、贴附,形成新的小血管。因此对血管新生的研究可以为血管生成相关疾病带来新的治疗方法。对于血管新生的调控,生长因子及其受体家族公认的占有重要地位,根据生长因子及其受体的作用对研究血管生成的新型药物和创新有效的治疗手段一直是热点。VEGF是目前公认的作用最强的血管生长因子,其中VEGFA所介导的各信号级联参与血管新生各个过程,直接控制血管新生的发生发展,在一定程度上决定了血管生成的结果。而VEGF的受体中主要在血管生成发挥重要作用的是VEGFR2,VEGFR2属于受体酪氨酸激酶家族,在胞膜外大约含750个氨基酸残基,由7个与Ig G相似的结构域组成,与配体结合的部位主要在第三个Ig G结构域,一个跨膜区、一个胞内近膜区以及其位于胞内的酪氨酸激酶区,其被一个由70个氨基酸构成的激酶分开,最末端是C端。VEGFR2的活化需要在配体刺激下,单体构象发生改变形成二聚体才能发生磷酸化,VEGFR2有多个磷酸化位点,活性二聚体形成后相应磷酸化位点发生活化。文献报道VEGF与VEGFR2结合后可通过其下游PLCγ/ERK1/2、PI3K-AKT信号通路促进内皮细胞增殖和迁移。同时二者结合后,还可以激活Src激酶信号通路,增加内皮细胞的迁移和渗透性。在血管新生整个过程中VEGF可连系多重信号通路,具有最直接有效的调控作用。对于血管新生的调节不仅可以从生长因子及其受体活化、基质降解、细胞出芽、迁移过程等入手。另一方面,在血管生成过程中的主导角色内皮细胞的存活状态同样十分重要,血管生成主要依赖位于血管内层的内皮细胞接受一系列促血管生成因子信号的刺激,发生迁移、融合、形成小管等过程而形成,维持内皮细胞稳态保护其凋亡可以减弱血管受到外界环境凋亡诱导因子的破坏压力,进而保护血管的完整性,促进血管生成。促进病变组织器官血管新生是心血管系统疾病一种有效的治疗手段,因此深入探讨VEGF依赖血管生成机制和内皮细胞存活状态对血管生成类疾病具有重要意义,有利于血管生成新药的研发与临床治疗。在心血管系统,血管内皮细胞是凋亡诱导因子TNF-α作用的重要靶标,TNF-α协同蛋白质合成抑制剂放线菌酮CHX,可使原来对TNF-α细胞毒作用不敏感的细胞出现凋亡,或者使对TNF-α敏感的细胞出现更强的凋亡效应。越来越多的文献报道,p53可转导细胞外TNF-α诱导的死亡受体通路介导细胞凋亡。p53蛋白最早是以抑癌蛋白被发现,随后相继发现了p53蛋白的其他功能。其中最突出的特点是它是一种转录因子,在细胞处于应激状态时可被诱导表达,从而促进细胞进入细胞周期的停滞阶段,继而凋亡或者衰老。对于p53的活化,传统的观点认为分为三步,分别为p53的稳定化、DNA结合、转录活化。对于p53的稳定化主要是p53的翻译后修饰,如乙酰化、甲基化、泛素化及磷酸化等。近年来也有发现由Mdm2和Mdm X介导的p53从抑制到释放也是p53生理活化的关键步骤。Endophilin最初是在筛选小鼠胚胎细胞c DNA文库时发现的一类富含Src同源3结构域(Src homology3,SH3)的蛋白质。因早期研究发现该类蛋白可通过其C末端的SH3结构域与Amphiphysin,synaptojanin,dynamin等内吞蛋白的多聚脯氨酸结构域结合,参与调控突触囊泡的内吞(endocytosis),因次被命名为Endophilin。Endophilin蛋白在结构上均由三部分组成,即N-端的N-BAR结构域、C端的SH3结构域和连接这两个结构的中间可变铰链区。C段的SH3结构域则主要通过与其它蛋白的多聚脯氨酸结构域(proline-rich domains,PRD)结合发挥功能,而N-BAR结构域在Endophilin二聚化及与膜的结合,进而改变膜的曲率方面发挥重要作用;现今研究认为,Endophilin包括Endophilin A和Endophilin B两个亚类。其中Endophilin A亚家族包括Endophilin A1,Endophilin A2和Endophilin A3三个成员;Endophilin B含Endophilin B1和Endophilin B2两个成员。并且已有研究显示,Endophilin B1和Endophilin B2主要参与调控线粒体的功能和细胞的凋亡;Endophilin A1主要特异性分布在脑组织,尤其在神经突触,Endophilin A3主要在脑和睾丸组织表达;而Endophilin A2则广泛分布与各种组织。我们实验室近期的研究结果表明,在血管平滑肌细胞中Endophilin A1和Endophilin A3无表达,而Endophilin A2却高表达。并且Endophilin A2是调控Cl C-3膜转位的关键分子,在调控Cl C-3氯通道活性中发挥重要作用。同时在进一步的研究中发现,在高血压过程中,血管平滑肌Endophilin A2表达上调,下调Endophilin A2表达抑制血管平滑肌细胞增殖,促进凋亡;在内皮细胞的研究中发现,Endophilin A2是e NOS内源性稳定分子,其通过PRD结构域与e NOS结合,进而抑制E3泛素连接酶Itch诱导的e NOS降解。上调Endophilin A2可对抗高血压、高脂和高糖等诱导的e NOS表达下调,NO生成减少以及内皮依赖性舒张功能障碍。并且Endophilin A2可作为整合素β1的内源性抑制分子调控血栓形成和内皮细胞活化,上调Endophilin A2可抑制血栓的形成。尽管我们已往的工作已初步揭示了Endophilin A2是调控血管平滑肌细胞增殖和凋亡,改善内皮舒张功能障碍和调控血栓的重要因素,但其在心血管系统中血管新生的功能还远未被揭示。考虑到血管生成在心血管多种疾病形成过程中的重要作用,本课题在明确了Endophilin A家族不同亚型在心血管系统各细胞表达特征的基础上,研究了后肢缺血模型小鼠中Endophilin A2的表达变化及其对血管新生的作用,并进一步从VEGFR2受体活化和内皮细胞凋亡的角度探讨了Endophilin A2调控血管新生的分子机制。第一部分Endophilin A2促进后肢缺血模型小鼠血管新生及VEGF诱导的人脐静脉内皮细胞血管新生采用Endophilin A2基因敲除小鼠和内皮特异性转基因小鼠,分别建立小鼠后肢缺血模型,应用免疫印迹、免疫荧光、免疫组化、PCR等研究方法,探讨了Endophilin A2对于血管生成的体内作用。同时建立VEGF诱导的人脐静脉内皮细胞模型,检测人脐静脉内皮细胞的迁移能力及管腔形成能力,进一步验证Endophilin A2对于血管生成的体外作用。结果发现:1.在WT小鼠后肢缺血模型实验中,在观测时间内(1-14天),缺血侧肢(ischemic组)血流灌注随着时间延长而逐渐增加。手术后1天Endophilin A2的表达在缺血侧肢组(ischemic组)和侧肢对照组(con组)相比无明显变化。3天、7天、14天,ischemic组Endophilin A2的表达显著高于con组,分别为2.33±0.20和1.06±0.01,4.37±0.57和0.91±0.17,6.13±0.45和1.51±0.4(p0.05,n=4)。同时随着血流灌注的增加,Endophilin A2的表达逐渐增加,二者呈明显的正相关。2.进一步对后肢缺血模型小鼠21天时Endophilin A2的表达情况分析,Western blot方法显示21天时ischemic组Endophilin A2的表达为2.72±0.28与con组0.84±0.23相比显著增高(p0.01,n=8)。同时检测血管生成过程中VEGFR2的表达,Western blot方法显示ischemic组VEGFR2的表达为3.74±0.94与con组1.02±0.11相比显著增高(p0.05,n=4)。进一步免疫荧光方法验证,在腓肠肌的组织切片中,显微镜下观察ischemic组Endophilin A2阳性红色荧光染色高于con组。3.Endophilin A2敲除小鼠鉴定:敲除小鼠鉴定:PCR结果显示,根据第一对引物出现1157bp的为野生型(Endo+/+),出现601bp条带的为杂合子(Endo+/-)或者敲除型基因;第二对引物出现516bp条带为野生型或者杂合子,若无则为敲除型基因(Endo-/-)。同时,western blot结果显示,在主动脉组织中敲除小鼠组未见Endophilin A2表达。同时western blot结果显示Endophilin A2基因敲除并不影响脑组织中Endophilin A1和Endophilin A3的蛋白表达水平。4.取Endophilin A2 KO小鼠进行后肢缺血模型实验,激光多普勒血流仪监测手术后1天,3天,7天,14天,21天小鼠双侧下肢血流灌注情况。结果发现Endophilin A2敲除小鼠在7天,14天,21天的血流灌注值显著低于野生型小鼠(p0.05,n=6)。5.Western blot法结果显示,在进行后肢缺血手术后WT小鼠ischemic组CD31表达量高于con组,Endophilin A2 KO小鼠con组与WT小鼠con组CD31表达量无明显差异,而Endophilin A2 KO小鼠ischemic组CD31表达量显著低于WT小鼠ischemic组(p0.05,n=6)。同时免疫组化方法验证,显微镜下观察Endophilin A2 KO小鼠ischemic组CD31阳性染色显著低于WT小鼠ischemic组。同时用免疫组化方法对平滑肌标记物α-SMA的表达进行检测,在WT小鼠ischemic组α-SMA表达量高于con组,Endophilin A2 KO小鼠con组与WT小鼠con组α-SMA表达量无明显差异,Endophilin A2 KO小鼠ischemic组α-SMA阳性染色显著低于WT小鼠ischemic组。6.Western blot法检测VEGFR2水平,发现在进行后肢缺血手术后ischemic组VEGFR2表达量高于con组,Endophilin A2 KO小鼠con组与WT小鼠con组VEGFR2表达量无明显变化,而Endophilin A2 KO小鼠ischemic组VEGFR2表达量显著低于WT小鼠ischemic组(p0.05,n=6)。7.内皮特异性转基因小鼠鉴定及后肢缺血模型实验:PCR结果显示222bp大小的产物即为转基因型小鼠;Western blot结果显示,与WT组相比内皮特异性转基因小鼠主动脉内皮细胞中Endophilin A2蛋白表达明显增加。取Endophilin A2内皮特异性转基因小鼠进行后肢缺血模型实验,结果发现Endophilin A2内皮特异性转基因小鼠在7天,14天,21天的血流灌注值显著高于野生型小鼠(p0.05,n=6)。8.Western blot法结果显示,在进行后肢缺血手术后在WT小鼠ischemic组CD31表达量高于con组,Endophilin A2 Tg小鼠con组与WT小鼠con组CD31表达量无明显变化,而Endophilin A2 Tg小鼠ischemic组CD31表达量显著高于WT小鼠ischemic组(p0.05,n=6)。免疫组化方法验证,显微镜下观察Endophilin A2 Tg小鼠ischemic组CD31阳性染色显著高于WT小鼠ischemic组。显微镜下观察Endophilin A2 Tg小鼠ischemic组平滑肌标记物α-SMA阳性染色显著高于WT小鼠ischemic组。9.Western blot法检测VEGFR2表达水平发现,在WT小鼠ischemic组VEGFR2表达水平高于con组,Endophilin A2 Tg小鼠con组与WT小鼠con组VEGFR2表达量无明显变化,而Endophilin A2 Tg小鼠ischemic组VEGFR2表达量显著高于WT小鼠ischemic组(p0.05,n=6)。10.在体外细胞迁移实验中,沉默Endophilin A2的蛋白表达,在VEGF诱导的人脐静脉内皮细胞的迁移率与对照组相比显著降低(p0.01,n=6);相反,过表达Endophilin A2,内皮细胞的迁移率显著升高(p0.05,n=6)。在VEGF刺激的人脐静脉内皮细胞Tube formation实验中,沉默Endophilin A2的蛋白表达,管腔形成数目显著减少(p0.05,n=6),而过表达Endophilin A2,管腔形成数目明显增多(p0.01,n=6)。小结1.小鼠后肢缺血模型中,缺血组织中Endophilin A2蛋白表达随血流恢复而增加。2.敲除Endophilin A2抑制小鼠后肢缺血模型血流恢复速度,减少后肢血管CD31、α-SMA和VEGFR2的表达。3.内皮特异性高表达Endophilin A2增加小鼠后肢缺血模型血流恢复速度,上调后肢血管CD31、α-SMA和VEGFR2的表达。4.Endophilin A2促进VEGF诱导的人脐静脉内皮细胞的迁移和管腔形成。5.Endophilin A2是促进血管新生,改善缺血部位血流恢复的关键分子。第二部分Endophilin A2促进血管新生的VEGF信号通路分子机制研究结合前期工作基础,结合Endophilin A2小分子RNA干扰、腺病毒转染、免疫共沉淀、免疫印迹、免疫荧光、质粒构建等方法,探讨了Endophilin A2在血管生成中对VEGF/VEGFR2的信号通路的作用及对VEGFR2的活化机制。1.Western blot法显示,在人脐静脉内皮细胞沉默Endophilin A2对EGFR、Met、VEGFR2的蛋白表达均无显著性变化。同样的过表达Endophilin A2亦不影响内皮细胞中EGFR、Met、VEGFR2的表达(p0.05,n=6)。2.Western blot方法显示,在VEGF 10ng/ml 5min诱导下,沉默Endophilin A2后,VEGFR2Tyr951、Tyr1059、Tyr1175位点磷酸化水平与相应对照组相比显著降低,(p0.05,n=6),而过表达Endophilin A2后,在VEGF10ng/ml 5min刺激下,VEGFR2Tyr951、Tyr1059、Tyr1175位点磷酸化水平与相应对照组相比显著升高(p0.05,n=6)。3.Western blot的结果中我们观察到,沉默Endophilin A2的蛋白表达可以显著减少VEGF诱导的p-PI3K、p-AKT、p-Src的表达(p0.05,n=6)。相反,过表达Endophilin A2,Endophilin A2过表达组中VEGF诱导的Src、PI3K、AKT磷酸化水平与对照组相比显著升高(p0.05,n=6)。4.Western blot的结果中我们观察到,沉默Endophilin A2的蛋白表达,与对照组相比Endophilin A2干扰组中VEGF诱导的PLCγ、ERK、p38的磷酸化水平显著降低(p0.05,n=6)。相反,过表达Endophilin A2,VEGF诱导的PLCγ、ERK、p38的磷酸化水平与对照组相比显著升高(p0.05,n=6)。5.在人脐静脉内皮细胞,免疫荧光结果显示Endophilin A2与VEGFR2主要集中分布于胞浆和胞膜中,具有明显的共定位。在共转染Endophilin A2-RFP和VEGFR2-myc质粒的COS7细胞中,实验结果显示,Endophilin A2与VEGFR2同样具有明显的共定位特性,提示Endophilin A2与VEGFR2很有可能存在相互作用。6.免疫共沉淀方法显示,在人脐静脉内皮细胞中Endophilin A2和VEGFR2之间存在着相互结合。进一步在外源性转染Endophilin A2-Flag和VEGFR2-myc质粒的COS7细胞株中,证实了Endophilin A2与VEGFR2间的相互结合作用。7.Co-IP实验结果显示,当SH3结构域缺失后,Endophilin A2与VEGFR2相互作用依然存在,当PRD结构域缺失后,Endophilin A2与VEGFR2也依然存在相互作用,而当N-BAR结构域缺失后,二者相互作用消失,提示Endophilin A2是通过N-BAR结构域与VEGFR2相互结合。8.Co-IP实验结果显示,VEGFR2和Endophilin A2(1-245aa)无相互作用,而与Endophilin A2(1-200aa)和Endophilin A2(1-175aa)存在结合,说明VEGFR2和Endophilin A2的结合位置在其N-BAR结构域200-245aa。9.免疫共沉淀方法显示在VEGF 50ng/ml刺激15min下,Endophilin A2与VEGFR2的结合显著增加。Con组和加VEGF组二者的结合率分别是0.74±0.17和1.71±0.4(p0.05,n=6)。10.在VEGF 50ng/ml刺激15min下,沉默Endophilin A2发现,VEGFR2 dimer(460KDa)/VEGFR2 moner(230KDa)比值与对照组相比明显减少。过表达Endophilin A2,VEGFR2 dimer(460KDa)/VEGFR2 moner(230KDa)比值与对照组相比明显增多(p0.05,n=4)。11.内皮细胞上免疫共沉淀结果发现,VEGFR2与Src激酶在VEGF诱导的内皮细胞中存在相互结合,Endophilin A2通过SH3结构域可以和Src发生结合,采用免疫共沉淀的方法,在沉默Endophilin A2后,VEGF刺激下,VEGFR2与Src的结合与对照组相比明显减少(p0.05,n=6),同时过表达Endophilin A2后,VEGFR2与Src的相互作用与对照组相比明显增多(p0.01,n=6)。在COS7细胞中分别转染VEGFR2-myc质粒,同时分别转染Endophilin A2(FL)-Flag全长质粒和Endophilin A2-△N-BAR-Flag质粒,结果发现,转染△N-BAR-Flag质粒组VEGFR2与Src结合明显少于转染Endophilin A2(FL)-Flag全长质粒组(p0.05,n=6)。12.采用免疫共沉淀方法,发现在内皮细胞上,Endophilin A2与PLCγ存在相互结合。进行免疫共沉淀定量检测,发现在沉默Endophilin A2后,在VEGF刺激下,VEGFR2与PLCγ的结合与对照组相比明显减少(p0.05,n=6),同时过表达Endophilin A2后,VEGFR2与PLCγ的相互作用与对照组相比明显增多(p0.01,n=6)。小结1.Endophilin A2通过与VEGFR2结合,促进VEGFR2二聚体的形成,进而增加VEGFR2的自身磷酸化水平,促进VEGFR2/PI3K/AKT,VEGFR2/Src以及VEGFR2/PLCγ/MAPK信号通路活化。2.VEGF作用增强Endophilin A2与VEGFR2结合,提示VEGFR2的磷酸化水平可能是调控两者结合水平的重要因素。3.Endophilin A2通过其N-BAR结构域的200-245个氨基酸序列与VEGFR2结合,而通过SH3结构域与Src相互结合,进而促进VEGF诱导的VEGFR2/Src复合物形成,进一步促进Src信号通路转导。4.Endophilin A2与PLCγ存在相互作用,Endophilin A2通过促进VEGF诱导的VEGFR2与PLCγ复合物形成,进一步促进VEGFR2/PLCγ/MAPK信号通路转导。第三部分Endophilin A2抑制内皮细胞凋亡作用及机制建立CHX+TNF-α诱导的人脐静脉内皮细胞凋亡体外模型,应用Endophilin A2敲除小鼠和小分子RNA干扰、腺病毒转染、免疫共沉淀、免疫印迹、免疫荧光、流式细胞技术、Tunel检测细胞凋亡等方法,探讨Endophilin A2对CHX+TNF-α诱导内皮细胞凋亡的作用及机制。1.采用后肢缺血小鼠腓肠肌组织切片使用原位细胞凋亡试剂盒与Hochest共染,结果发现,Endophilin A2敲除小鼠缺血组中细胞凋亡红色荧光数量明显多于WT小鼠缺血组细胞凋亡红色荧光数量。2.流式细胞术AnnexinV APC/7AAD双染法定量检测凋亡率,CHX+TNF-αNegative组早期凋亡率为19.4±6.0,与Negative组相比,CHX+TNF-αEndophilin A2 Si RNA组早期凋亡率显著升高至34.0±6.8(p0.01,n=6)。相反,CHX+TNF-αAd-Endo A2组早期凋亡率与CHX+TNF-αAd-GFP组相比显著降低(p0.05,n=6)。3.Hochest染色显示正常细胞核呈圆形或者椭圆形,显示均匀的蓝色荧光。给予CHX+TNF-α处理,引起核固缩,染色质呈致密浓染的状态及凋亡小体形成。沉默Endophilin A2后再给予处理CHX+TNF-α8h,与对照处理组相比,凋亡形态学改变加重,核固缩及凋亡小体增加(n=6)。而过表达Endophilin A2则会缓解CHX+TNF-α处理引起的凋亡形态学改变和凋亡小体形成(n=6)。4.Western blot结果发现,沉默Endophilin A2后,在CHX+TNF-α诱导下CD31的表达明显少于对照组(p0.05,n=6),同时过表达Endophilin A2后,CD31的表达明显多于对照组(p0.01,n=6)。5.在CHX+TNF-α诱导下,沉默Endophilin A2后,western blot结果显示Caspase3总蛋白表达明显减少,而其切割体cleaved Caspase3表达量明显增多,cleaved Caspase3/Caspase3比值明显增多(p0.05,n=6)。而过表达Endophilin A2后,结果显示Caspase3总蛋白表达明显增多,而其切割体cleaved Caspase3表达量明显减少,cleaved Caspase3/Caspase3比值明显减少(p0.01,n=6)。6.在CHX+TNF-α诱导下,沉默Endophilin A2后,结果显示Caspase9总蛋白表达明显减少,而其切割体cleaved Caspase9表达量明显增多,cleaved Caspase9/caspase9比值明显增多(p0.01,n=6)。而过表达Endophilin A2后,结果显示Caspase9总蛋白表达明显增多,而其切割体cleaved Caspase9表达量明显减少,cleaved Caspase9/Caspase9比值明显减少(p0.05,n=6)。7.在CHX+TNF-α诱导下,在沉默Endophilin A2后,结果显示Bax蛋白表达明显增多(p0.05,n=6)。而Bcl-2的蛋白表达明显减少(p0.05,n=6)。8.Western blot方法显示,在CHX+TNF-α诱导下,沉默Endophilin A2后,结果显示p53蛋白表达明显增多(p0.05,n=6)。而过表达Endophilin A2后,结果显示p53蛋白表达明显增减少(p0.05,n=6)。9.采用免疫共沉淀的方法,结果发现Endophilin A2与p53存在相互作用。在外源性上,我们采用COS7细胞转染Endophilin A2-Flag全长质粒,用p53去沉淀Endophilin A2外源性标签Flag,发现Endophilin A2与p53存在外源性结合。10.Co-IP实验结果发现PRD端缺失后,Endophilin A2与p53仍存在结合,而C端SH3缺失质粒未见结合,因此Endophilin A2通过C端SH3结构与p53结合。11.Western blot结果显示,过表达EndophilinA2,p53的蛋白表达降低;预孵MG132后,Endophilin A2+MG132组p53蛋白表达与过Endophilin A2组相比显著升高(p0.05,n=4)。小结1.敲除Endophilin A2增加后肢缺血诱导的细胞凋亡。2.Endophilin A2可抑制TNF-α诱导的人脐静脉内皮细胞凋亡。3.Endophilin A2通过SH3结构域与p53结合,调控p53表达,进而调控线粒体上p53相关靶蛋白Bax和Bcl-2的表达,抑制Caspse9-Caspase3信号通路,抑制内皮细胞凋亡。4.Endophilin A2通过蛋白酶体通路降解作用调控p53的蛋白表达变化。结论1.Endophilin A2通过N-BAR结构域的200-245个氨基酸位点与VEGFR2结合,促进VEGF诱导的VEGFR2二聚体形成和受体自身磷酸化。2.Endophilin A2促进VEGFR2/Src以及VEGFR2/PLCγ复合物形成,促进VEGFR2/PI3K/AKT,VEGFR2/Src以及VEGFR2/PLCγ/MAPK信号转导。3.Endophilin A2通过蛋白酶体通路降解作用下调p53表达,稳定线粒体膜,抑制内皮细胞凋亡。4.敲除Endophilin A2抑制血管新生,而内皮细胞高表达Endophilin A2则促进血管新生。
[Abstract]:......
【学位授予单位】：中山大学
【学位级别】：博士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R363
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本文编号：2430919