热灭活肺炎链球菌D39X疫苗黏膜免疫小鼠可抵抗不同亚型肺炎链球菌感染

发布时间：2019-11-27 06:43

【摘要】：目的研制一种安全、有效且易于生产的热灭活肺炎链球菌死菌疫苗D39X,评价其作为肺炎链球菌候选疫苗的可行性。方法通过热灭活肺炎链球菌突变菌株D39X,得到无毒的死菌疫苗,鼻腔免疫Balb/c小鼠,每周1次,连续4周。末次免疫1周后,间接ELISA检测免疫小鼠特异性抗体水平;同时检测抗体亚型及细胞因子水平,并进行不同菌株攻毒的主动保护实验。结果免疫组小鼠血清中特异性IgG和唾液中特异性IgA显著升高,IgG亚型主要为IgG1和IgG2b;免疫小鼠脾细胞特异性分泌IL-4和IL-17A;19F型肺炎链球菌在免疫小鼠中的载量显著低于对照组小鼠;灭活D39X黏膜免疫可有效延长肺炎链球菌D39、6B型和3型感染小鼠的生存时间;被动免疫也具有保护作用。结论热灭活的D39X黏膜免疫可诱导小鼠产生体液免疫和细胞免疫反应,有效抵抗不同血清型肺炎链球菌的感染,是一种有开发前景的肺炎链球菌疫苗。
【图文】：

中的细菌数量显著降低（P<0.05），说明鼻腔免疫热灭活的D39X可有效抵抗19F型肺炎链球菌在小鼠上呼吸道的定植。2.4黏膜免疫D39X可抵抗致死性肺炎链球菌感染由图5可以发现，D39鼻腔攻毒后，免疫小鼠的平均生存率和生存时间均显著延长，提示鼻腔免疫灭活D39X可有效抵抗致死性剂量D39的感染。同时，免疫灭活D39X也可抵抗在我国较流行的临床6B型和3型肺炎链球菌菌株的感染。2.5被动免疫可抵抗侵袭性肺炎链球菌感染实验结果显示，注射了免疫小鼠血清的小鼠平均存活率接近70%，对照组小鼠生存率仅为10%左右，差异有统计图1D39X电镜下特征（D36,×60000;D39X,×120000）Fig1TransmissionelectronmicrographanalysisofD39X(D36,×60000;D39X,×120000)*P＜0.05;**P＜0.01;***P＜0.001.图2黏膜免疫D39X诱导的体液免疫反应Fig2EffectsofmucosalimmunizationwithD39Xonantibodyresponsesinmice*P＜0.05;**P＜0.01;***P＜0.001.图3D39X诱导的细胞因子水平Fig3EffectsofmucosalimmunizationwithD39XoncellularimmuneresponsesinmiceBacterialloadsinnasalwashesandlunghomogenatesweredeterminedthreedayspostinfection.**P＜0.01;***P＜0.001.图4黏膜免疫D39X在定植模型中的保护作用Fig4EffectofmucosalimmunizationwithD39XinpneumococcalcolonizationmodelMicewerei.n.challengedwithS.pneumoniaestrainsD39(7×107CFU),serotype6B(CMCC31207,9×108CFU)orserotype3(CMCC31436,1.5×108CFU),respectively.*P＜0.05;**P＜0.01.图5D39X对不同血清型肺炎链球菌的主动保护Fig5ActiveprotectionbyD39XagainstlethalS.pneumoniaeinfection·397·

免疫学杂志2013年5月第29卷第5期IMMUNOLOGICALJOURNALVol.29No.5May2013IgG1和IgG2b为主，同时也有IgG2a检出，未检测出IgG3（图2）。细胞因子水平检测提示，免疫组小鼠可产生高水平的IL-4和IL-17A（P均<0.05）（图3）。免疫组和佐剂对照组的IFN-γ均显著升高，无统计学差异（数据未显示）。2.3黏膜免疫D39X可减少肺炎链球菌在小鼠体内的定植图4显示免疫组小鼠鼻腔灌洗液及肺匀浆中的细菌数量显著降低（P<0.05），说明鼻腔免疫热灭活的D39X可有效抵抗19F型肺炎链球菌在小鼠上呼吸道的定植。2.4黏膜免疫D39X可抵抗致死性肺炎链球菌感染由图5可以发现，D39鼻腔攻毒后，免疫小鼠的平均生存率和生存时间均显著延长，提示鼻腔免疫灭活D39X可有效抵抗致死性剂量D39的感染。同时，免疫灭活D39X也可抵抗在我国较流行的临床6B型和3型肺炎链球菌菌株的感染。2.5被动免疫可抵抗侵袭性肺炎链球菌感染实验结果显示，注射了免疫小鼠血清的小鼠平均存活率接近70%，对照组小鼠生存率仅为10%左右，差异有统计图1D39X电镜下特征（D36,×60000;D39X,×120000）Fig1TransmissionelectronmicrographanalysisofD39X(D36,×60000;D39X,×120000)*P＜0.05;**P＜0.01;***P＜0.001.图2黏膜免疫D39X诱导的体液免疫反应Fig2EffectsofmucosalimmunizationwithD39Xonantibodyresponsesinmice*P＜0.05;**P＜0.01;***P＜0.001.图3D39X诱导的细胞因子水平Fig3EffectsofmucosalimmunizationwithD39XoncellularimmuneresponsesinmiceBacterialloadsinnasalwashesandlunghomogenatesweredeterminedthreedayspostinfection.**P＜0.01;***P＜0.001.图4黏膜免疫D39X在定植模型中的保护作用Fig4EffectofmucosalimmunizationwithD39Xinpneumococcalcolonizationm

【参考文献】

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【二级参考文献】

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本文编号：2566503