温敏型水凝胶加载基质细胞衍生因子-1的骨髓内控释促进造血

发布时间：2020-01-26 02:04

【摘要】：目的:观察温敏型水凝胶加载基质细胞衍生因子-1(stromal cell-derived factor-1,SDF-1)的体内外释放性能及对造血组织的影响。方法:(1)体外释放:用壳聚糖/明胶/甘油磷酸钠(chitosan-gelatin-glycerol phosphate,CS/G/GP)加载经125I标记的SDF-1并通过γ探测仪测量其体外释放率。(2)体内释放:注射该缓释系统到18只SD大鼠股骨干中,在第1~6天(每天3只)收集注射侧股骨头、股骨干、周围肌肉组织及对侧股骨头,测量其释放量。(3)骨髓造血:将10只SD大鼠随机分为2组,实验组注射0.1 ml CS/G/GP加载SDF-1入5只大鼠股骨干,对照组注射0.1 ml CS/G/GP入5只SD大鼠股骨干中。在第7天处死10只大鼠收集注射侧股骨头行活检,观察造血活跃程度。结果:根据γ探测仪测量值获得该缓释系统加载SDF-1的体外及骨髓内释放曲线。实验组骨髓造血活跃程度明显高于对照组,两组间造血面积差异有统计学意义(P0.05)。结论:加载SDF-1的可注射温敏型水凝胶第2~5天在股骨头局部维持稳定浓度且活跃骨髓造血组织。
【图文】：

125I标记,释放曲线,水凝胶,加载

重庆医科大学学报2013年第38卷第7期（JournalofChongqingMedicalUniversity2013.Vol.38No.7）图2CS/G/GP水凝胶加载125I标记的SDF-1在SD-大鼠骨髓内的释放曲线Fig.2InvivoreleasecurveofCS/G/GPhydrogelcontaining125IlabeledSDF-1义。本文采用的壳聚糖/明胶/甘油磷酸钠（chitosan-gelatin-glycerolphosphate，CS/G/GP）体系具有良好的生物相容性及可降解性，在室温下呈液体，pH7.4左右当温度升至37°C左右时发生凝胶化作用，加入1%明胶可缩短其凝胶化时间并增大其储能模量[6]。本文将采用此缓释系统加载SDF-1并观察其体外、骨髓内的释放情况及其对造血组织的影响。1材料及方法1.1主要材料及仪器壳聚糖（脱乙酰度90%，北京索莱宝科技有限公司），甘油磷酸钠（美国sigma公司），明胶（北京索莱宝科技有限公司），SDF-1（美国sigma公司），PD-10脱盐柱（美国GEHea-lthcare公司），Na125I（成都中核高通同位素公司，18.2GBq/ml），GC-911γ放射免疫计数器（安徽科大创新公司），恒温水浴箱（上海跃进公司），电子pH计（上海雷磁公司），高压蒸汽灭菌箱（上海申安医疗器械厂）。1.2水凝胶的制备将2.5%的壳聚糖与1%的明胶融入0.1mol/L的乙酸溶液中经高压蒸汽灭菌（121℃，15min），，后将44.4%的甘油磷酸钠经0.2μm的过滤器过滤消毒后逐滴加入壳聚糖/明胶溶液中，并不断搅拌直至pH7.4左右，将CS/G/GP溶液放于4℃中储存备用[6]。1.3125I标记SDF-1利用传统的氯胺-T法标记[7]。首先，将5μlNa125I加入200μlSDF-1（0.1mg/ml）溶液中。然后将溶于0.5mol/L磷酸缓冲液（pH7.5）的0.2mg/ml的氯胺-T溶液100μl加入上述混合液中。室温下搅动2min，然后将100μl含0.4mg?

曲线,体外释放,125I标记,水凝胶

医学形态学图像处理系统（骨髓活检）观察造血活跃程度。1.7数据处理实验数据采用SPSS17.0统计分析，计量资料以均数±标准差表示，组间比较采用t检验。检验水准α=0.05。2结果2.1体外释放通过绘制SDF-1的体外释放曲线（图1），可见SDF-1在初期释放较快，在第3天累计释放已达到47%，而后释放逐渐缓慢，第7天时达62%。2.2骨髓内释放通过绘制SDF-1体内释放曲线（图2），可见SDF-1初期释放迅速，第2天就累计释放达53%，第6天时达80%，体内释放较体外释放更迅速，这可能因体内相关酶对水凝胶的降解所致。图1CS/G/GP水凝胶加载125I标记的SDF-1的体外释放曲线Fig.1InvitroreleasecurveofCS/G/GPhydrogelcontaining125IlabeledSDF-1累积释放百分比（%）100.0080.0060.0040.0020.000.00时间（d）12345631.5553.5764.9071.0375.6580.01时间（d）70.0060.0050.0040.0030.0020.0010.000.00累积释放百分比（%）9.6835.2247.5453.5757.4860.6062.4765.1312345678—743—

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