GMAP210对雄性小鼠精子发生及生育能力的作用

发布时间：2020-04-28 02:12

【摘要】：目的:探讨GMAP210在小鼠精子发生过程中的作用,分析其对男性生殖能力的影响,为早期诊断和治疗男性不育提供一定的科学依据。方法:将Gmap210~(flox/flox)雌性小鼠和stra8-iCre雄性小鼠杂交以获得条件性敲除(KO)小鼠,以Stra8-iCre;Gmap210f~(lox/+)小鼠作为对照;Western Blot检测野生型小鼠第一波精子发生过程中GMAP210蛋白的表达;将六周龄Gmap210基因条件敲除雄性小鼠和对照组雄性小鼠与野生型成年雌性小鼠交配两个月,检测其生育能力和繁殖能力;收集对照组和Gmap210基因条件敲除雄性小鼠附睾尾部的精子,光学显微镜下拍照并摄影,精子的形态、数量和精子活力;HE染色观察对照组和Gmap210基因条件敲除雄性小鼠睾丸和附睾的精子在不同阶段的形态变化;电子显微镜观察对照组和Gmap210基因条件敲除雄性小鼠睾丸和附睾中的精子的超微结构;免疫荧光观察对照组和Gmap210基因条件敲除雄性小鼠睾丸生精细胞中IFT20的定位,以及附睾精子中的顶体形态和线粒体分布。结果:GMAP210蛋白在肝脏和睾丸中大量表达,且在小鼠出生后睾丸组织内的第一波精子发生过程中,GMAP210蛋白在16天开始大量表达,第35天表达最高;Gmap210基因条件敲除雄性小鼠未见任何生长异常,并且都能活到成年;所有的对照小鼠是可育的,但50%的条件性Gmap210基因敲除小鼠不育,且可育的KO小鼠产仔数明显下降;形态学结果显示KO小鼠睾丸生精小管结构正常,但是附睾管腔内精子头部异常呈圆形,尾部排列紊乱;光学显微镜下观察KO小鼠精子尾部正常,但大部分精子的头部形状异常;电子显微镜下观察到KO小鼠附睾精子头部异常,以及轴丝缺失,虽然大部分精子尾巴正常,但一些精子尾部中段缺损;顶体信号几乎在生精细胞和精子中消失,且线粒体高度集中在精子头部,却未在尾部中段观察到特定信号;IFT20的在睾丸生精细胞中表达下降,并且在整个细胞质中都能检测到IFT20的信号。结论:GMAP210对于顶体形成,正常线粒体鞘和雄性生育力是必需的,并且雄性生精细胞中的IFT20定位依赖于正常的GMAP210表达。
【学位授予单位】：武汉科技大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：R698.2;R-332

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本文编号：2642934