新型小鼠跨区供血耳瓣模型的构建

发布时间：2017-03-24 07:04

  本文关键词：新型小鼠跨区供血耳瓣模型的构建，，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的:建立一个实时活体观察血管形态学变化小鼠跨区供血耳瓣模型,并应用此模型研究有利于皮瓣成活的机制,为研究和促进皮瓣的成活提供理论指导。方法:取体重25~30g清洁级ICR小鼠60只,戊巴比妥钠麻醉后将小鼠俯卧位固定于操作台上,商业人用脱毛膏脱毛、消毒。右耳用眼科剪从尾侧向头侧剪断小鼠耳基底部尾侧2/3,保留头侧1/3,形成以耳前动静脉为蒂内含三个血管体、二个choke区的跨区供血耳瓣。左耳为对照组,仅进行脱毛处理。选择不同时间点进行:①形态学观察:将小鼠侧卧置于二维图像采集系统的动物承载台上,调节体视显微镜物镜并固定为2.5×10倍,设置步进参数,“弓”型路线渐次、局部采集图像,合成鼠耳全景图,观察皮瓣的坏死率、皮瓣内chokeⅠ、Ⅱ区血管形态学变化;②病理学观察:切取鼠耳耳瓣,10%福尔马林固定液固定,用苏木精-伊红染色,获取病理图片,观察耳瓣chokeⅠ区和chokeⅡ区的病理变化。统计分析ChokeⅠ区和ChokeⅡ区的动静脉血管数量与管径、血管充盈度;③免疫组织化学观察:利用免疫组化技术,取各时间点ChokeⅠ区和ChokeⅡ区的10根血管(不分动静脉),计算血管及血管旁50μm内阳性标志物的累积光密度(IOD)。检测ICAM-1、CD68、MCP-1三种炎症调节因子的表达及含量变化情况。结果:①ICR小鼠耳有三个恒定的血管体,从内到外依次为头侧血管体、中间血管体及尾侧血管体。术后5天,耳瓣坏死面积趋于稳定,坏死率为(15±7)%。内侧血管体与中间血管体之间的choke动静脉的管径出现快速扩增,两者都在第10天左右达最大,choke静脉管径最高峰可达原来的(3.9±0.5)倍,choke动脉管径最高峰可达原来的(3.5±0.7)倍。10天后,choke静脉管径开始减小,21天后逐渐平稳,而choke动脉管径于术后10天左右开始平稳,之后无明显减小。②动静脉血管管壁变薄,经t检验分析,实验组与对照组差异显著(P0.05);ChokeⅠ区血管数量随着术后天数的增加而呈现上升趋势,ChokeⅡ区血管数量变化不明显。ChokeⅠ区动脉和静脉血管充盈度分别在1d和3d时达到峰值;ChokeⅡ区术后即刻动静脉血管充盈度均有所下降,随后呈上升趋势,7d时与对照组均值相近。③0d时在ChokeⅠ区和ChokeⅡ区ICAM-1和CD68显著升高,而MCP-1表达水平与对照组相当。ChokeⅠ区和ChokeⅡ区MCP-1的峰值分别在3d和1d,ICAM-1的峰值分别在1d和3d,CD68的峰值分别在5d和3d。三种因子实验组与对照组比较,其差异均有统计学意义(P0.01),与血管管径变化显著相关。结论:①跨区耳瓣切取后,静脉扩张是被动扩张,而动脉扩张是主动增值;②跨区耳瓣切取后ChokeⅡ区扩张的choke血管数量及扩张度均小于ChokeⅠ区;③小鼠耳瓣模型可能成为研究血管扩张机制及遴选促皮瓣存活药物的理想动物模型;④ICAM-1、CD68、MCP-1三种炎症调控因子有助于血管扩张,过度炎症对血管的影响还有待进一步研究。
【关键词】：鼠耳 跨区皮瓣 choke血管 坏死
【学位授予单位】：福建医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R322;R622
【目录】：

• 中文摘要5-7
• 英文摘要7-9
• 前言9-12
• 材料与方法12-17
• 1 材料12-13
• 1.1 主要仪器12
• 1.2 主要试剂12-13
• 1.3 实验动物13
• 2 方法13-17
• 2.1 可编程数控二维精密图像采集系统的设计13-14
• 2.2 模型建立14
• 2.3 形态学观察14
• 2.4 病理学观察14-16
• 2.5 免疫组织化学观察16-17
• 3 统计学分析17
• 结果17-23
• 1 鼠耳的血管分布17-18
• 2 耳瓣内血管管径变化及坏死面积18-20
• 3 Choke区血管变化20-22
• 3.1 Choke 区血管测量20-21
• 3.2 血管内红细胞充盈程度21-22
• 4 免疫组织化学检测三种因子的表达情况22-23
• 讨论23-29
• 结论29
• 参考文献29-32
• 综述32-40
• 参考文献36-40
• 致谢40-41
• 攻读学位期间的研究成果41

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前5条

1 于子莹,张茹慧,刘春丽,朱镇,刘志辉;局部注射VEGF挽救大鼠背部随意型超比例皮瓣成活的最佳注射层次的实验性研究[J];口腔医学研究;2002年06期

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4 毛以华;唐茂林;;Choke vessels与穿支皮瓣的扩展[J];中国临床解剖学杂志;2010年02期

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本文编号：265228