针刺四关穴对AD模型大鼠海马区自噬功能的影响
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【摘要】:目的通过针刺四关穴干预阿尔茨海默病模型大鼠,观察针刺干预对阿尔茨海默病模型大鼠学习记忆能力,大脑海马区自噬相关蛋白LC3-Ⅱ、p62表达的影响,以及海马区Aβ42、磷酸化tau蛋白(p S396、p T231)表达的情况,来探讨针刺四关穴对阿尔茨海默病模型大鼠大脑海马区神经元自噬的调控作用,从而为针刺四关穴治疗阿尔茨海默病提供进一步的理论支持。方法将60只2月龄SD雄性大鼠随机分为空白组、假手术组、模型组、针刺组。空白组常规喂养不做任何处置,假手术组双侧侧脑室注射柠檬酸/柠檬酸钠缓冲液,后两组双侧侧脑室注射STZ构建AD模型。针刺组取双“合谷”“太冲”穴,直刺2-3mm,每穴留针15min,间隔5min行针一次,平补平泻,捻转频率为120-150次/min,捻转角度为90°-180°,治疗6天、休息1天为一疗程,共4周。干预结束后,Morris水迷宫检测各组大鼠学习记忆能力;HE染色观察各组大鼠海马区神经元状态;免疫组化法检测Aβ42及磷酸化tau蛋白的表达;Western Blot检测大脑海马组织中自噬相关蛋白LC3-Ⅱ、p62的表达。结果1、Morris水迷宫检测结果在定位航行试验中,随着训练天数的增加,各组大鼠的逃避潜伏期日趋变短;对比每天的逃避潜伏期,模型组的逃避潜伏期与假手术组相比明显延长(P0.01),针刺组逃避潜伏期短于模型组(P0.01),假手术组与空白组之间无显著性差异(P0.05)。空间探索试验结果显示,模型组大鼠的穿越原平台所在区域的次数小于假手术组(P0.01),针刺组大鼠的穿越原平台所在区域的次数多于模型组(P0.01)。2、HE染色的观察结果空白组及假手术组的海马神经元形态正常,各层细胞排列紧密整齐,模型组海马区神经元缺失,神经元形态结构异常,而针刺组的神经元异常情况要好于模型组。3、免疫组化结果空白组与假手术组大鼠海马区Aβ42、p S396、p T231的阳性表达均无显著性差异(P0.05),模型组大鼠海马区Aβ42、p S396、p T231的阳性表达均显著多于假手术组(P0.05),针刺组的Aβ42、p S396、p T231表达均少于模型组(P0.05)。4、Western Blot的检测结果空白组与假手术组大脑海马组织中自噬相关蛋白LC3-Ⅱ、p62的表达无显著性差异(P0.05);模型组的p62相对表达量高于假手术组(P0.05),LC3-Ⅱ的相对表达量低于假手术组(P0.05);针刺组p62的相对表达量低于模型组(P0.05),LC3-Ⅱ的相对表达量高于模型组(P0.05)。结论侧脑室注射STZ方法构建AD大鼠模型,可以使大鼠的学习记忆能力减退,Aβ42及磷酸化tau蛋白(p S396、p T231)表达增高,LC3-Ⅱ表达降低,p62增多,自噬功能紊乱。针刺四关穴能改善AD模型大鼠学习记忆能力,减少异常磷酸化tau蛋白(p S396、p T231)的表达,诱导模型大鼠海马区LC3-Ⅱ的表达,降低p62,调控海马区紊乱的自噬功能,从而降低Aβ42的表达,发挥保护海马区神经元的作用。
【关键词】:阿尔茨海默病 自噬 海马 针刺 四关穴 Aβ 磷酸化tau蛋白
【学位授予单位】:辽宁医学院
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2015
【分类号】:R245;R-332
【目录】:
- 中文论著摘要4-7
- 英文论著摘要7-10
- 英文缩略语表10-11
- 前言11-17
- 实验材料与方法17-31
- 结果31-35
- 讨论35-43
- 结论43-44
- 本研究创新性的自我评价44-45
- 参考文献45-52
- 附录52-68
- 文献综述52-62
- 参考文献58-62
- 在学期间科研成绩62-63
- 致谢63-64
- 个人简介64-65
- 附图65-68
【共引文献】
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