CBS参与CCI大鼠背根神经节NF-κB痛觉调制作用的研究

发布时间：2020-05-21 00:08

【摘要】：目的:观察胱硫醚-β-合成酶(CBS)对坐骨神经慢性缩窄性损伤(CCI)大鼠的疼痛阈值及核因子-κB(NF-κB)、蛋白激酶C(PKC)表达的影响,探讨CBS在背根神经节NF-κB痛觉调制中的作用及可能机制。方法:健康雄性SPF级SD大鼠36只(180~200g),鞘内置管成功后,采用随机数字表法分为3组(n=12):假手术组(Sham组),CCI模型组(CCI组)和CBS抑制剂AOAA组(CCI+AOAA组)。鞘内置管第3d,CCI组和CCI+AOAA组建立神经病理性疼痛模型(CCI模型);Sham组只游离坐骨神经主干而不结扎。术后第1d起连续14d对大鼠进行鞘内注射给药(每天一次,同一时间点):Sham组和CCI组鞘内注射生理盐水20μl;CCI+AOAA组鞘内注射CBS抑制剂AOAA(10μg/kg)10μl,并用生理盐水10μl进行鞘内冲洗。分别于术前1d,术后1、3、7、10、14d鞘内注射后30min时测定各组大鼠的机械缩足阈值(MWT)和热缩足潜伏期(TWL)。术后7d和14d时处死大鼠,取出脊髓L4-6的背根神经节,运用免疫荧光染色技术观察背根神经节CBS和NF-κB p65的表达情况,Western Blot技术检测各组大鼠背根神经节CBS、p-NF-κB p65、p-PKC的表达情况。结果:与Sham组相比,CCI组大鼠术后1、3、7、10和14d时机械缩足阈值和热缩足潜伏期下降(P0.05),且术后7d、14d时背根神经节CBS、p-NF-κB p65、p-PKC的表达上调(P0.05);与CCI组相比,CCI+AOAA组大鼠术后1、3、7、10和14d时机械缩足阈值和热缩足潜伏期增加(P0.05),且术后7d、14d时背根神经节CBS、p-NF-κB p65、p-PKC的表达下调(P0.05)。结论:CCI大鼠背根神经节CBS、p-NF-κB p65及p-PKC表达上调参与了神经病理性疼痛的发生发展。内源性H_2S合成酶CBS在大鼠CCI所致的神经病理性疼痛中具有重要作用,可能通过调节背根神经节PKC/NF-κB信号通路参与痛觉过敏的形成和维持。
【图文】：

大鼠,阈值,时机,侧足

CCI+AOAA 组大鼠术侧足趾并拢背屈、舔舐、悬空等神经痛表现减轻。2 机械缩足阈值变化与 Sham 组比较，CCI 组大鼠术后 1、3、7、10、14d 时机械缩足阈值降低(P<0.05 14d 时下降至最低值 13.9±3.2g；与 CCI 组比较，CCI+AOAA 组大鼠术后 1、310、14d 时机械缩足阈值升高(P<0.05)，见表 2，图 1。表 2 三组大鼠不同时点机械缩足阈值的变化(g，n=6， x ±s)别术前 1d 术后 1d 术后 3d 术后 7d 术后 10d 术后 14dham 组 33.7±1.2 33.9±2.1 33.6±2.4 33.7±2.3 33.3±1.9 35.2±1.2CI 组 33.5±1.5 19.8±1.4#18.3±1.2#17.7±2.1#18.0±2.0#13.9±3.2#CI+AOAA 组 33.5±2.7 24.2±2.6*23.8±3.2*24.6±2.2*25.9±1.8*26.2±2.1*注：与 Sham 组比较，#P＜0.05；与 CCI 组比较，*P＜0.05

热缩,大鼠,低水平

热缩足潜伏期变化与 Sham 组比较，CCI 组大鼠在术后 1、3、7、10、14d 时热缩足潜伏期降低(P<0.05)， 1d 达最低值 11.4±1.8s，术后 3、7、10、14d 时呈持续低水平(P<0.05)；与 CCI较，CCI+AOAA 组大鼠术后 1、3、7、10、14d 时热缩足潜伏期升高(P<0.05)， 3，图 2。表 3 三组大鼠不同时点热缩足潜伏期的变化(s，n=6， x ±s)别术前 1d 术后 1d 术后 3d 术后 7d 术后 10d 术后 14dam 组 24.0±2.4 23.9±2.0 24.1±1.7 25.1±2.2 24.2±1.7 24.2±1.8I 组 24.2±1.9 11.4±1.8#11.9±1.9#12.2±1.7#12.4±1.1#11.8±1.8#I+AOAA 组 24.1±1.9 15.7±1.3*18.0±2.1*18.6±1.6*19.4±1.5*19.5±1.4*注：与 Sham 组比较，#P＜0.05，与 CCI 组比较，*P＜0.05
【学位授予单位】：遵义医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：R338

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