肠上皮细胞参与抗HIV的天然免疫机制研究
发布时间：2020-05-21 02:37
【摘要】：目前,性传播是HIV最主要的传播方式。其中男男性行为群体HIV感染率呈逐年上升趋势,该群体已成为HIV感染的高危人群。在男男同性性行为中,肠道黏膜成为HIV入侵宿主的主要门户之一。由于肠道黏膜固有层中存在着大量的激活或处于静息状态的CD4+T淋巴细胞和巨噬细胞,肠道黏膜是HIV感染和复制的主要场所。由于HIV攻击肠道内激活的CD4+T淋巴细胞和巨噬细胞造成CD4+T淋巴细胞迅速耗竭和巨噬细胞释放炎性因子,肠道黏膜受损,使微生物及其代谢产物易位(Microtranslocation)以及全身性慢性免疫激活(Systemic immune activation)。肠上皮细胞(Intestinal epithelial cells,IECs)是肠黏膜中最丰富的细胞类型。通过自身紧密连接,肠上皮细胞在肠道中发挥重要的黏膜屏障功能。更重要的是,肠上皮细胞表达多种识别病原微生物的模式识别受体,启动天然免疫应答,在肠道天然免疫抗病毒中发挥重要作用。本课题旨在研究肠上皮细胞参与抗HIV感染/复制的天然免疫机制。1.IECs表达功能性Toll样受体3(Toll-like receptor 3,TLR3),并诱导产生I型和Ⅲ型干扰素(Interferon,IFN)作为重要的抗病毒模式识别受体之一,TLR3可有效地监控病毒感染和复制。TLR3识别病毒双链RNA(double-stranded RNA,dsRNA),启动细胞内天然免疫应答。我们使用dsRNA类似物(PolyI:C),激活IECs内TLR3信号通路,研究其对IFN的诱导和调控。研究结果显示,IECs表达所有能识别病毒感染的Toll样受体(TLR3、TLR7、TLR8和TLR9)。但是,仅有TLR3激活能显著诱导IFN信号通路,产生IFN-β和IFN-λ,这种TLR3诱导的IFN诱导表达和PolyI:C使用剂量和时间相关。其分子机制是:TLR3激活后上调了干扰素调节因子3(IFN regulatory factor,IRF3)和IRF7,这两个因子促进了Ⅰ型和Ⅲ型IFN表达。2.TLR3信号通路激活可诱导IECs自身表达多种抗病毒因子,并通过外泌体释放我们的研究结果表明,IECs TLR3信号通路激活可诱导自身表达多种抗病毒因子,包括干扰素刺激基因(Interferon stimulate genes,ISGs):ISG15、ISG56、OAS-1、MxA、MxB、GBP5 和 Viperin 和限制 HIV 的微小 RNA(miRNA-17、miRNA-20、miRNA-28、miRNA-29a、miRNA-29b、miRNA-29c 和 miRNA-125b)。这些抗病毒因子包裹在IECs分泌的外泌体中,通过外泌体介导抗病毒天然免疫。3.TLR3激活的IECs培养上清(Supernant,SN)抑制HTV在巨噬细胞内的复制肠道黏膜固有层中富含巨噬细胞。由于这些细胞高表达HIV的辅助受体CCR5,它们对HIV具有高易感性。因此,我们使用巨噬细胞作为HIV体外感染细胞模型,研究IECs的抗病毒效应。实验结果显示,TLR3激活的IECs培养上清可显著地抑制HIV在巨噬细胞内的复制。对其机制研究显示,使用抗IFN-β和IFN-λ受体的中和抗体可抵消IECs SN介导的抗HIV效应;经SN处理的巨噬细胞产生多种ISGs和HIV特异性限制因子,包括 ISG15,ISG56,MxA,MxB,OAS-1,OAS-2,Tetherin,A3F,A3G 和GBP5。此外,IECs分泌含有多种抗病毒因子的外泌体可被巨噬细胞摄取,这些因子参与IECsSN介导的抗HIV效应。4.TLR3激活的IECs表达CC趋化因子(CC chemokines),抑制HIV进入巨噬细胞我们的研究结果还表明:TLR3激活的IECs高表达CCR5的天然配体CC chemokines(MIP-1α,MIP-1β 和 RANTES),CC chemokines 竞争性结合 HIV 辅助受体CCR5,降低HIV对巨噬细胞的感染性。实验结果显示,加入TLR3激活的IECs培养上清预处理巨噬细胞,可显著降低HIV进入巨噬细胞后第一轮复制产物Strong-stop DNA表达,进而说明TLR3激活的IECs表达CC chemokines,抑制HIV进入巨噬细胞。
【图文】：
３５００万人死亡。世界卫生组织（Ｗｏｒｌｄ邋Ｈｅａｌｔｈ邋Ｏｒｇａｎｉｚａｔｉｏｎ，邋ＷＨＯ）数据显示：截至逡逑２０１６年底，全球共有约３６７０万ＨＩＶ携带者，其中成人约３４５０万，１５岁以下儿童约逡逑２１０万；２０１６年新X棧龋桑指腥静±迹保福巴颍劳霾±迹保埃巴颍ㄍ迹保保Ｔ诎体义喜×餍械那蛑校侵薜厍艿降挠跋熳畲螅玻埃保赌暧校玻担叮巴颍龋桑指腥菊撸嫉饺义锨颍龋桑中路⒏腥咀苁慕种Ｄ心行孕形摺⒆⑸湮菊摺⒃诩嘤推渌忮义媳栈肪持械娜嗽薄⑿怨ぷ髡呒捌滏慰停约氨湫匀思撼晌龋桑指腥镜闹氐闳巳海厘义霞朴校矗矗サ男路⒏腥痉⑸谡庑┤巳褐小＃龋桑止惴捍嬖谟诟腥菊叩难骸⒕骸⒁蹂义系婪置谖铩⑷橹⒛约挂骸⒂猩窬⒆吹哪宰橹褐校渲幸匝骸⒕骸⒁醯婪皱义厦谖镏信ǘ茸罡摺Ｒ坏┣秩牖澹龋桑种饕セ魅颂宓模茫模矗澹粤馨拖赴偷ズ司掊义鲜上赴《窘胝庑┫赴螅烧嫌谒拗鳎模危林校岩韵ｅ义希常叮罚恚椋欤欤椋铮铄义希穑澹铮穑欤邋澹睿铮麇澹澹螅簦椋恚幔簦澹溴澹簦镥澹猓邋澹欤椋觯椋睿珏澹鳎椋簦桢澹龋桑皱义希ǎ常板澹福矗插澹渝澹恚椋欤欤椋铮睿蒎义希保福恚椋欤欤椋铮铄危卞澹希恚椋欤欤椋铮铄义希穑澹铮穑欤邋澹睿澹鳎欤澹椋睿妫澹悖簦澹溴危龋桑郑颍澹欤幔簦澹溴澹洌澹幔簦瑁箦义贤煎澹保卞澹玻埃保跺迥晷略鲥澹龋桑皱甯腥炯八劳鋈丝谑ㄒ藻澹校颍澹觯澹睿翦澹龋桑郑澹簦澹螅翦澹幔睿溴澹簦颍澹幔翦澹幔欤欤澹玻埃保叮╁义希疲椋纾澹保卞澹危酰恚猓澹蝈澹铮驽澹穑澹铮穑欤邋澹睿澹鳎欤澹椋睿妫澹悖簦澹溴澹鳎椋簦桢澹龋
本文编号：2673594
【图文】：
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