改变人工内淋巴液钾离子浓度对不同来源人间充质干细胞生存能力影响的体外研究
发布时间：2020-06-18 06:03
【摘要】：研究目的本研究通过将不同组织来源的人间充质干细胞在不同浓度钾离子(K+)人工内淋巴液中进行体外培养,比较不同组织来源的人间充质干细胞在人工内淋巴液中生存能力的差别,并探索最适宜间充质干细胞生存的内淋巴液K+浓度。研究方法为了比较不同来源的人间充质干细胞在人工内淋巴液中生存能力的差别,我们从人脂肪、骨髓、胎盘和脐带等4种不同组织中提取了间充质干细胞,并对其进行表型和分化能力鉴定。用MTS细胞增殖实验方法检测4种间充质干细胞在不同K+浓度(5～153.8 mM)的人工内淋巴液中增殖能力的区别。经Annexin V-FITC/PI双染法观察4种间充质干细胞在不同K+浓度的人工内淋巴液中细胞凋亡率的差别。Caspase-3活性法检测4种间充质干细胞在人工内淋巴液中的凋亡是否与caspase-3凋亡通路相关。Elisa法探索间充质干细胞在人工内淋巴的生物学行为是否与炎症因子相关。最后,透射电镜下观察间充质干细胞在不同K+浓度的人工内淋巴液体外培养后,其亚细胞超微结构的改变。研究结果脂肪、骨髓、胎盘、脐带来源的4种人间充质干细胞均可表达特征性的表面抗原,并均有成脂成骨分化能力。4种不同来源的间充质干细胞在人工内淋巴液中增殖、凋亡等生物学行为无明显差别。当改变人工内淋巴液K+浓度至相对高(55 mM～130 mM)时,间充质干细胞凋亡率较正常对照组相比无明显增高。间充质干细胞在不同浓度K+的人工内淋巴液中体外培养时,增殖能力均受抑制。间充质干细胞在相对高K+浓度(55 mM～130 mM)的人工内淋巴液中体外培养时,细胞质内可产生大量糖原颗粒。不同浓度K+人工内淋巴液组对间充质干细胞IL-2,IL-6,IL-10和TNF-α的分泌无明显影响,初步认为其生物学行为的改变与炎症反应无显著相关性。结论不同组织来源的间充质干细胞在人工内淋巴液中的生存能力无明显差别。而改变人工内淋巴液中K+至相对高浓度时,即55～130 mM,可显著提高间充质干细胞的体外生存能力;但不同浓度K+人工内淋巴液均抑制间充质干细胞的增殖。
【学位授予单位】：北京协和医学院
【学位级别】：博士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R329.2
【图文】：
中国医学科学院北京协和医学院博士研究生学位论文结果与分析逡逑常体外培养条件下ＡＭＳＣｓ，邋ＢＭＳＣｓ，邋ＰＭＳＣｓ，邋ＵＣ－ＭＳＣｓ的形态特点逡逑不同组织提取的原代人来源ＭＳＣｓ生长过程相似。ＭＳＣｓ接种后，２壁。培养３天后，细胞数量增多，并且光镜下可见到大量均一的梭形。待培养至８０％－９０％融合后进行传代。ＭＳＣｓ传代后，生长加速，长，光镜下，细胞外形呈梭形，类似成纤维细胞（图１）。逡逑
光镜下可见诱导后的细胞胞浆内有圆形脂滴形成，折光性强。油红０染色后，逡逑光镜下可见细胞内含橘红色深染脂滴，其中，ＡＭＳＣ脂滴形成最多。ＭＳＣｓ经成骨逡逑诱导后，细胞无明显形态变化。在ＡＬＰ染色可见ＭＳＣｓ胞i}呈蓝色（图２）。逡逑ＡＭＳＣ逦ＢＭＳＣ逦ＰＭＳＣ逦ＵＣ－ＭＳＣ逡逑。■■疆W逡逑Ｉ、，~栧义贤迹玻粒停樱茫螅拢停樱茫螅校停樱茫螅眨茫停樱茫蟪芍ǎ粒┖统晒牵ǎ拢┓只ㄇ榭觥＃ǎ粒哄义嫌秃欤叭旧唬拢哄澹粒蹋腥旧╁义希保插义
本文编号：2718813
【学位授予单位】：北京协和医学院
【学位级别】：博士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R329.2
【图文】：
中国医学科学院北京协和医学院博士研究生学位论文结果与分析逡逑常体外培养条件下ＡＭＳＣｓ，邋ＢＭＳＣｓ，邋ＰＭＳＣｓ，邋ＵＣ－ＭＳＣｓ的形态特点逡逑不同组织提取的原代人来源ＭＳＣｓ生长过程相似。ＭＳＣｓ接种后，２壁。培养３天后，细胞数量增多，并且光镜下可见到大量均一的梭形。待培养至８０％－９０％融合后进行传代。ＭＳＣｓ传代后，生长加速，长，光镜下，细胞外形呈梭形，类似成纤维细胞（图１）。逡逑
光镜下可见诱导后的细胞胞浆内有圆形脂滴形成，折光性强。油红０染色后，逡逑光镜下可见细胞内含橘红色深染脂滴，其中，ＡＭＳＣ脂滴形成最多。ＭＳＣｓ经成骨逡逑诱导后，细胞无明显形态变化。在ＡＬＰ染色可见ＭＳＣｓ胞i}呈蓝色（图２）。逡逑ＡＭＳＣ逦ＢＭＳＣ逦ＰＭＳＣ逦ＵＣ－ＭＳＣ逡逑。■■疆W逡逑Ｉ、，~栧义贤迹玻粒停樱茫螅拢停樱茫螅校停樱茫螅眨茫停樱茫蟪芍ǎ粒┖统晒牵ǎ拢┓只ㄇ榭觥＃ǎ粒哄义嫌秃欤叭旧唬拢哄澹粒蹋腥旧╁义希保插义
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