脐血源外泌体对年老T细胞调节作用的研究

发布时间：2020-06-23 14:13

【摘要】：老年人体内T淋巴细胞会随着年龄的增长发生数量及功能上的变化,T细胞亚型的比例及功能失调会影响机体的免疫功能,导致免疫性疾病,并可能是衰老的重要因素。因来源特殊,脐血包含了很多活性成分,对调节T细胞功能极具潜力。本论文研究了脐血浆外泌体和脐血T细胞来源的外泌体对老年人T淋巴细胞的调节作用,取得如下创新结果:1、通过将脐血浆来源外泌体(Pexo)与老年人外周血单个核细胞(PBMCs)共培养,研究Pexo对PBMCs的增殖及凋亡、相关炎症因子表达的影响,考察对PBMCs中T细胞亚群中调节性T细胞、CD4+记忆型T细胞和CD8+记忆型T细胞的调节作用。结果表明Pexo能维持老年人外周血中T细胞的活性,并能够在24h内显著下调炎症因子TNF-α、IFN-γ的表达,但对老年人PBMCs中的调节性T细胞比例和记忆型T细胞亚群比例均未产生显著影响。结果提示脐血浆外泌体能够在不影响T淋巴细胞各功能亚群比例的前提下,增强免疫细胞活性,下调炎症因子,这对于改善老年人体内低度炎症体质、减缓免疫细胞衰老有一定调节作用。2、通过将脐血来源T细胞的外泌体(Texo)与老年人PBMCs共培养,研究Texo对老年人T细胞各亚群的变化以及细胞增殖凋亡的调节作用。结果表明Texo能够促进老年人PBMCs中的T细胞增殖,并且证明增殖细胞为Treg细胞亚群。Texo能够将老年人PBMCs中的CD4+CD25-T细胞亚群转化成CD4+CD25+T细胞亚群,活化T细胞。Texo引起老年人PBMCs中T细胞TGF-β表达降低、IFN-γ表达升高。但是Texo对CD4+T细胞亚群以及CD8+T细胞亚群中的记忆型T细胞亚群比例无明显调节作用。本部分结果显示Texo可以通过提高老年人T细胞中诱导型Treg细胞比例增强老年人体内T淋巴细胞对外来抗原的抑制作用,发挥治疗相关免疫性疾病的潜力。
【学位授予单位】：东南大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R392
【图文】：

再生医学,脐带血,来源,细胞

图 1-1 脐带血来源的细胞在再生医学上的应用[12]（放大图可见附录）1.1.2.1 脐血浆应用在对脐血的研究中，应用最多的就是分离脐血里面单个核细胞，然后从中提取想要的造血干细胞、间充质干细胞，再利用间充质干细胞具有分化能力的特点诱导出不同的细胞类型，从而进行研究和应用等。然而在分离脐带血中单个核细胞的同时，脐带血的血浆其实也是一种很好的资源，近年来对脐带血血浆的研究也逐渐增多。血浆是与血细胞相互依存提供细胞生长的场所。血浆里面含有丰富的活性分子，这些分子可能来自于血细胞本身亦或胎盘及其它组织的细胞，但正是这些活性分子的存在才能对脐血里的细胞发育和功能有一个调节作用。比如，相对于成人外周血，较高水平的造血刺激因子[13]（如 G-CSF、GM-CSF[14]、TPO[15]、IL-6 等）以及低水平的 TGF-β1都有助于造血干细胞的移植[16]。脐血血浆除了含有更高浓度的生长因子和生物活性分子外，人源的脐血浆相对于 FBS 没有异源的蛋白和其它一些可能存在隐患的细胞因子的影响从而在临床上的应用更有优势，因为商品化的用于体外培养的 FBS 里面含有的蛋

示意图,体形,示意图,受体细胞

图 1-2 外泌体形成简易示意图[28]膜结构，除了表面富含其来源的脂质及蛋白质等分子能发挥所包裹的 mRNA、miRNA、siRNA 等生物信息也是外泌体生物学功能的重要原因。近期的研究也显示，外泌体内部除NA 等还含有双链 DNA[29]。而这些遗传信息都能通过外泌体变受体细胞的转录和翻译从而参与到靶细胞增殖、凋亡等各如肿瘤分泌的含有 miR-214 的外泌体，就将 miR-214 这一遗4 +T 细胞中，对受体细胞中的 PTEN 有一个下调作用，最终，从而引起宿主免疫逃逸还有肿瘤的增长[33]。应用外泌体的研究主要集中在两个方面，一是将其作为生物标志；二是将其作为药物或基因的载体。首先，将外泌体作为生细胞在不同状态下都能分泌外泌体，再加上外泌体的膜结构

【参考文献】