IL-6与肥胖哮喘粘液高分泌的关系及机制

发布时间：2020-06-27 09:14

【摘要】：目的:建立肥胖哮喘模型,观察肥胖哮喘小鼠体内IL-6表达水平并探讨肥胖哮喘气道粘液高分泌的机制。方法:将从北京维通利华购的60只3周龄的SPF级小鼠,预饲养1周,然后分成4组:正常对照组(A组),肥胖组(B组),哮喘组(C组),肥胖哮喘组(D组),称量4组每个小鼠体重。肥胖模型组(B、D组)给予HD001(脂肪比45%)高脂饲料喂养,对照组(A、C组)给予普通饲料(脂肪比10%)喂养,4组小鼠自由饮水,每日测得小鼠体长及重量。按照经典的哮喘模型建立方法,给予哮喘模型组(C、D组)腹腔及雾化吸入卵清蛋白,对照组(A、B组)相应的给予生理盐水。末次激发后,采集实验标本。用ELISE法分别测得每组小鼠血清和肺泡灌洗液(BALF)中IL-6的表达水平。各组小鼠BALF中白细胞总数及分类计数,观察气道炎细胞浸润情况,肺组织经HE、PAS染色后,观察各组小鼠气道炎症及粘液分泌情况。免疫组织化学染色肺组织观察气道粘液分泌及粘蛋白MUC5AC的表达水平。RT-PCR测得肺组织IL-6、Munc18b及Muc5ac的mRNA水平。Western-blot法定性定量检测各组STAT3、Mun18b、Muc5ac的表达水平。结果:8周末测的各组小鼠体重,肥胖模型组小鼠体重大于正常组的20%。哮喘模型组在激发的过程中出现呼吸急促,抓鼻乱窜烦躁不安,大小便频繁等表现。对照组无异常行为改变。实验结束,无死亡小鼠出现。BALF细胞计数,肥胖哮喘组和哮喘组白细胞总数、嗜酸性粒细胞及中性粒细胞显著高于正常组和肥胖组,(P0.05),肥胖哮喘组高于哮喘组,(P0.05),肥胖组的白细胞总数及嗜酸性粒细胞计数稍高于正常组,无显著统计学意义,但中性粒细胞计数显著高于正常组,(P0.05)。肺组织HE、PAS及免疫组化染色,哮喘模型组(C、D组)气道完整性缺失,支气管上皮细胞不同程度的脱落,粘膜水肿,管壁增厚,周围炎性细胞浸润,粘液分泌增多。其中肥胖哮喘组行为表现更为明显,肥胖组出现程度很轻的改变,正常组行为表现基本无任何改变。ELISA法测的血清和BALF中IL-6水平以及肺组织IL-6mRNA表达水平各组表现一致,肥胖组和正常组相比稍微升高,无显著统计学意义,哮喘组高于肥胖和正常组,(P0.05),肥胖哮喘组显著高于哮喘组,(P0.05)。RT-PCR测得哮喘组和肥胖哮喘组Munc18b及Muc5ac得mRNA的表达水平明显高于正常组和肥胖组,(P0.05),其中肥胖哮喘组表达水平高于哮喘组。Western-blot测得各组肺组织中的STAT3、Munc18b、Muc5ac的表达水平,肥胖哮喘较其余三组均高,哮喘组、肥胖组、正常组依次递减,(P0.05)。结论:成功建立肥胖哮喘模型;肥胖哮喘组小鼠气道上皮及粘液细胞粘液分泌增多;IL-6通过STAT3-Munc18b信号通路,上调Muc5ac的表达。
【学位授予单位】：青岛大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：R562.25;R-332
【图文】：

小鼠,细胞计数,青岛大学,有义

青岛大学硕士学位论文细胞计数显著高于 A 组，差异有统计学意义(均 P<0．05)，而 C 组与 D 组细胞计数相比有所降低，但仍是高于 B 组的中性粒细胞计数，两组差异有义(均 P<0.05)。B 白细胞总数和各类细胞计数均比 A 组有略微差距，提示肥是一种不明显的炎性状态。如表 8，图 1，2 所示。表 8 各组小鼠 BALF 细胞总数及分类炎细胞所占比例（×104/ml，x ± s）组别白细胞总数细胞分类计数嗜酸性粒细胞中性粒细胞淋巴细胞单核细胞A 组 7.70±1.12 2.90±0.23 4.30±0.32 17.50±2.02 70.40±4.36B 组 9.40±1.03a3.58±1.78a7.90±0.49a16.83±1.78a72.35±3.63aC 组D 组22.83±1.63ab26.68±0.87abc18.50±4.13ab23.81±4.37abc15.38±0.39ab23.03±0.78abc22.67±2.13ab24.13±1.56abc45.93±4.25ab40.70±5.99abc：a 与 A 组比较，P<0.05,b 与 B 组比较，P<0.05,C 与 c 组比较，P<0.05

水平比较,小鼠血清

各组小鼠血清中IL-6表达水平比较

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