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慢性间歇低氧对大鼠模型肾衔接蛋白p66Shc表达变化的影响及临床意义的探讨

发布时间:2020-07-05 00:56
【摘要】:目的:观察单纯CIH条件下及CB_(1R)拮抗剂利莫那班干预后CIH条件下大鼠肾组织病理改变,通过检测肾组织中衔接蛋白p66Shc的表达,探讨p66Shc和内源性大麻素系统在CIH导致肾损伤中的可能作用机制;初步探讨p66Shc与内源性大麻素系统之间有无相关性。方法:选取30只健康的成年Wistar雄性大鼠,将之随机分配为5组,分别为:正常对照组、间歇低氧IH4周组、IH6周组、IH+干预4周组、IH+干预6周组,干预组予大鼠腹腔内按1.5mg/kg/d计量注射CB_(1R)拮抗剂利莫那班。单纯低氧组及干预低氧组在实验进行到第4周时随机抽取一半大鼠处死,剩余大鼠于第6周处死,处死后留取肾脏组织,光学显微镜下观察各组大鼠肾组织形态学变化,免疫组织化学方法通过测定灰度值代表各组大鼠肾脏中衔接蛋白p66Shc的表达,采用SPSS25软件对数据进行分析。结果:1.各组大鼠肾组织HE染色形态:(1)对照组肾组织的结构正常,各结构间界限清晰,着色亦均匀;(2)IH组大鼠肾小球肿胀,系膜轻度增生,肾小管上皮细胞明显肿胀,管腔变狭窄,刷状缘减少或消失,其中6周组较4周组管腔狭窄更明显;(3)IH+干预组较单纯低氧组损伤有减轻。2.p66Shc免疫组化中的表达:(1)在各组大鼠肾组织中,肾小球及小管中均可见褐色胞浆,以肾小管表达为主,尤其是在近端肾小管;(2)对照组颜色较单纯低氧组均浅,差异有统计学意义(p0.05);(3)单纯低氧组阳性表达显著,其中6周IH组表达最强,差异有统计学意义(p0.05);(4)4、6周干预组较4、6周单纯低氧组颜色变浅,干预组p66Shc阳性表达降低,差异有统计学意义(p0.05)。结论:1.CIH可致肾损伤,且损伤程度与间歇低氧时间成正比;2.CIH肾组织尤其是近端肾小管中衔接蛋白p66Shc表达增加,提示其可能在CIH所致的肾损伤中起重要作用;3.CB_(1R)拮抗剂利莫那班干预可改善肾损伤,提示ECs参与CIH肾损伤;4.CB_(1R)拮抗剂利莫那班干预后,衔接蛋白p66Shc表达下调,提示内源性大麻素系统可能是p66Shc上游的调节系统。
【学位授予单位】:山西医科大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2019
【分类号】:R740;R56;R-332
【图文】:

蜡块,动物箱,大鼠,乙醇脱水


图 1-13 留取标本、制备蜡块、切片第 4 时分别从 B、C 动物箱中随机取一半大鼠,用 10%水合氯醛腹腔侧肾脏,第 6 周将剩余大鼠处死,见图 1-2;将标本用预冷生理盐性福尔马林浸泡 24h 固定;再经乙醇脱水、二甲苯透明后用液体石转式切片机不间断切片,每张切片厚度大概为 4um。

形态图,形态,HE染色


正常组 HE×200 倍 正常组 HE×400IH4 周组 HE×200 倍 IH6 周组 HE×200 倍IH+干预 4 周组 HE×200 倍 IH+干预 6 周组 HE×200 倍图 2-1 各组大鼠肾组织 HE 染色形态

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