小鼠肾衰模型的建立和尿毒症认知障碍的行为实验研究

发布时间：2020-07-05 22:14

【摘要】：第一部分:小鼠肾衰模型的建立目的:通过制备小鼠慢性肾衰竭模型,为进一步探究肾衰竭发病机理及防治终末肾病进展奠定基础。方法:将60只6-8周龄C57BL/6雄性小鼠随机分为4组,即正常组、假手术组、模型组4w、模型组8w。模型组4w和模型组8w小鼠予以左肾动脉分支结扎联合右肾切除手术(手术时间间隔4w),假手术组:仅行皮肤和肌肉切开缝合,不进行肾脏结扎和切除。正常组:不予以处理。动态观察小鼠的一般情况,8周后测量并记录各组小鼠血压情况、检测尿白蛋白肌酐比(尿ACR),检测血液生化指标及肾脏病理学变化。结果:(1)血液生化指标:模型组小鼠相较于正常组、假手术组,4周后出现血清尿素氮增高[(19.86±3.37)mmol/l vs(8.45±0.95)mmol/l,P0.01]、血清肌酐增高[(37.91±3.11)μmol/l vs(25.19±4.98)μmol/l,P0.01]。高血磷[(3.04±0.41)mmol/l vs(2.45±0.26)mmol/l,P0.01],血红蛋白浓度下降[(114.42±20.45)g/L vs(137.10±6.77)g/L,P0.01]见表2。4周模型组与8周模型在本次研究中无明显差异。(2)尿ACR:模型组4w、8w分别较正常组、假手术组尿ACR明显升高[(151.24±76.3)mg/g、(159.99±80.90)mg/g vs(14.57±2.39)mg/g、(14.26±2.46)mg/g(p0.01)]。(3)血压:模型组4w、8w分别较正常组、假手术组收缩压和舒张压明显升高[(117.24±4.18)/(78.97±3.98)mmHg、(121.30±4.92)/(73.70±6.29)mmHg vs(96.33±4.51)/(55.71±8.84)mmHg、(96.41±5.02)/(54.31±7.32)mmHg(p0.01)]。(4)肾脏病理:肾小球硬化、肾小管萎缩、肾间质纤维化、肾小血管壁增厚、蛋白管型、红细胞管型、局部炎症反应、钙化等。结论:本研究在国内首次采用左肾动脉分支结扎+右肾切除法制备小鼠慢性肾衰竭模型,术后4周出现持续的血肌酐明显升高,伴高血压、蛋白尿、贫血、高磷血症等慢性肾衰竭特征,肾脏病理可见肾小球硬化、肾间质纤维化等终末期肾病表现,表明该模型是一稳定、良好的肾衰竭模型。第二部分:尿毒症认知障碍的行为实验研究目的:通过观察不同时期尿毒症小鼠在行为学(Morris水迷宫)实验中的表现情况,评估尿毒症小鼠学习能力和记忆能力,为进一步探究慢性肾脏病认知损害的机制奠定基础。方法:将尿毒症4w、尿毒症8w、正常组、假手术组小鼠进行行为学(Morris水迷宫)实验,实验包括隐藏平台实验和空间探索实验,分别记录逃避潜伏期和穿越平台的次数。结果:尿毒症8w小鼠较正常组、假手术组小鼠在隐藏平台实验中表现为逃避潜伏期时间延长,空间探索实验中表现为穿台次数减少,差异具有统计学意义(p0.05),而尿毒症4周小鼠则无显著性差异。结论:尿毒症8w小鼠在行为学(Morris水迷宫)实验中出现明显的学习能力和记忆能力减退,表明该模型在建模后8周是合适的行为实验节点,这为采用该模型探讨尿毒症认知障碍的相关研究提供了良好的时间参照点。
【学位授予单位】：成都医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：R692.5;R-332
【图文】：

不同种属,肾脏,动物,小鼠

图 1：不同种属的动物在肾脏研究中的应用（1980-2011）组和人类基因组高度同源，其生理功能、生化代谢和生长环境和药物的反应也基本相似；小鼠研究还具有成熟的基已拥有大量的近交品系；此外，小鼠基因组计划已基本完信息为研究基因功能及其表达调控、胚胎发育和人类疾病和技术手段。因此，选用小鼠作为模式动物，具有许多种的发病机理具有重要意义。此外，小鼠还有饲养成本低廉因其体小，颅骨薄，还适用于一些特殊的检测，如大脑皮小鼠是一个有完整基因组测序且在转基因研究中应用最多 C57BL/6 小鼠制作慢性肾衰模型者并不多见，而制备单支结扎肾衰模型的更是稀少[22-24]，在我国尚未见相关报道

区域图,肾动脉,肾脏,分支

图 2：绿色箭头所示：肾动脉分支结扎可见肾脏 2/3 区域缺血剔除及补充模过程中出现麻醉过量（1 只）、明显大出血（2 只）、误伤脊背部神（2 只）、肾动脉分支结扎部分缺血不及 2/3 区域或肾动脉完全结扎（2 只）等不符合模型标准条件均予以剔除，并随机补充符合要求的入组量。在取材过程中发现肾脏结扎部分未明显坏死（2 只），予以般生命体征的观察周后观察小鼠的生活状态，活动情况、毛发、体重等一般生命体征。动脉压周后采用小鼠智能无创血压计 BP-2010（北京软隆生物公司）测量血半身用鼠网固定并置入保温筒中，包裹住小鼠，设置保温桶温度。

血压变化,舒张压,收缩压

mmHg、（73.70±6.29）mmHg vs（55.71±8.84）mmHg、（54.31±7.32）mmHg 明显升高（p<0.01），其中收缩压模型组 8w 较4w 升高（p<0.05），模型组4w、8w 舒张压无显著差异，正常组与假手术组比较收缩压及舒张压均无显著差异。如图3

【相似文献】