多载体HIV中和抗体基因疫苗序贯和重复应用的研究

发布时间：2020-07-07 03:14

【摘要】：HIV感染机体后可诱导产生细胞免疫应答和体液免疫应答,细胞免疫作用于受感染细胞继而控制已发生的感染,体液免疫中的中和抗体能够防止游离的病毒发生扩散。用经典的疫苗策略诱导机体免疫系统产生针对HIV的细胞或体液免疫的方法尚不能有效抵御HIV感染。另一种途径是依靠转基因载体在机体细胞内部表达HIV中和抗体,绕过激活宿主免疫应答使之产生抗体的过程,该途径可能是一种行之有效的HIV治疗方法。将HIV中和抗体基因2G12等与穿梭质粒构成双启动子重组载体,该载体可表达抗体轻链和重链。重组质粒鉴定后包装病毒,在病毒扩增,纯化等步骤后,在细胞水平进行病毒的滴度测定和抗体表达测定;重组病毒在动物水平进行最佳免疫剂量测定;用不同的病毒载体注射小鼠,希望通过以最少的免疫次数与免疫剂量达到较高的抗体表达浓度与抗体表达持续时间。本文初步探讨了应用F2A序列的HIV中和抗体表达策略。将抗体轻重链基因通过F2A连接,与穿梭质粒构成重组载体。利用该穿梭质粒包装、扩增与纯化出重组Adv病毒,检测病毒滴度后用该病毒感染细胞表达出中和抗体2G12;用该重组Adv载体疫苗注射小鼠,经检测成功表达出HIV中和抗体2G12。本课题将携带相同或不同HIV抗体基因的多种载体注射小鼠体内,希望能够在小鼠体内持续高效地表达中和抗体,为减少或消除体内HIV病毒、治疗艾滋病奠定基础。
【学位授予单位】：北京工业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R392


本文编号：2744566