【摘要】：目的:在大鼠睡眠呼吸暂停模型中评价NF-κB介导的JNK信号传导通路对慢性间歇性低氧所致认知功能障碍的作用和机制研究方法:将96只雄性SD大鼠随机分配至假试验(sham)组、慢性间歇性低氧(chronic intermittent hypoxia,CIH)组、慢性间歇性低氧+褪黑素(CIH+melatonin)组、慢性间歇性低氧+维生素E(CIH+vitamin E)组、持续性低氧(sutained hypoxia,SH)组、慢性间歇性低氧+生理盐水对照(CIH+NS)组、(CIH+Bay 11-7082)组和慢性间歇性低氧+DMSO对照(CIH+DMSO)组。各组试验大鼠分别曝露于14天常氧、慢性间歇性低氧(21%O_260秒,10%O_260秒,循环重复10小时每天)和持续性低氧(10%O_210小时每天),并相应给予褪黑素、维生素E或Bay 11-7082预处理。14天后用Morris水迷宫检查评价大鼠认知功能,免疫印迹法评价NF-κB、JNK和JNK信号通路相关信号分子c-Jun、JunD和ATF-2的激活和抑制,用realtime PCR和酶联免疫吸附法分别检测TNFα、IL-6和iNOS的表达水平。用Caspase-3活性试验和TUNEL法评价大鼠海马神经元的凋亡。结果:我们成功建立了大鼠睡眠呼吸暂停模型。在大鼠睡眠呼吸暂停模型中我们发现慢性间歇低氧使大鼠海马发生显著氧化应激反应:CIH组的大鼠海马组织中的MDA和8-ISO-PGF2α水平显著升高(P0.01),SOD和GSH水平则显著降低。持续性低氧不引起大鼠海马组织中氧化应激水平的变化。慢性间歇性低氧曝露前预先给予的褪黑素和维生素E可显著降低大鼠海马组织中的MDA和8-ISO-PGF2α水平,同时升高SOD和GSH水平(P0.05)。NF-κB抑制剂Bay 11-7082对氧化应激水平没有影响。所有大鼠经过4天的训练后识别能力均有改善,逃逸潜伏期均下降。在训练第一天和第二天,各组大鼠的逃逸潜伏期没有统计学差异,这意味着所有大鼠的运动和视觉能力是类似的。与假试验组大鼠相比慢性间歇性低氧组大鼠在训练第三天和第四天均有显著延长的逃逸潜伏期(P0.01)。慢性间歇性低氧组大鼠在目标象限停留时间显著短于对照组(P0.01)。慢性间歇性低氧曝露前预先给予的褪黑素、维生素E或Bay 11-7082在训练第三天和第四天可显著降低逃逸潜伏期且有更长的目标象限停留时间(P0.05)。假试验组和持续低氧组间没有统计学差异。免疫印迹分析发现与假试验组相比慢性间歇性低氧和持续性低氧都促进大鼠海马胞浆中P65转移至细胞核内,但是慢性间歇性低氧组P65向细胞核内的转移更明显,与持续性低氧组相比有显著性差异。这说明慢性间歇性低氧对NF-κB的激活作用更强。慢性间歇性低氧组的JNK及其下游信号分子c-Jun、ATF2和JunD的磷酸化水平也显著增高。慢性间歇性低氧曝露前预先给予褪黑素或维生素E可部分抑制P65向细胞核内的转移以及JNK及其下游信号分子c-Jun、ATF2和JunD的磷酸化水平。而慢性间歇性低氧曝露前预先给予Bay 11-7082可更加显著减少P65向核内转移,并几乎完全抑制JNK及其下游信号分子c-Jun、ATF2和JunD的磷酸化。与慢性间歇性低氧对NF-κB的激活相一致,慢性间歇性低氧可使大鼠海马中TNF-α的mRNA和蛋白以及IL-6和iNOS的mRNA表达水平显著升高(P0.01)。慢性间歇性低氧曝露前预先给予的褪黑素和维生素E可部分降低TNF-α的mRNA和蛋白以及IL-6和iNOS的mRNA表达水平(P0.05)。NF-κB的抑制剂Bay 11-7082可更显著降低TNF-α的mRNA和蛋白以及IL-6和iNOS的mRNA表达水平(P0.01),接近假试验组TNF-α的mRNA和蛋白以及IL-6和iNOS的mRNA表达水平。免疫印迹法已经证实持续性低氧也可在一定程度上促进大鼠海马胞浆中P65向核内的转移而激活NF-κB,持续性低氧也增高大鼠海马中TNF-α的mRNA和蛋白以及IL-6和iNOS的mRNA表达水平(P0.05),但这一增高水平远低于慢性间歇性低氧所致TNF-α的mRNA和蛋白以及IL-6和iNOS的mRNA表达水平的增高(P0.01)。慢性间歇性低氧可使海马组织中caspase-3活性显著升高(P0.01),而持续性低氧不使caspase-3活性升高。间歇性低氧曝露前给予褪黑素和维生素E可抑制caspase-3活性的增高(P0.05)。间歇性低氧曝露前给予NF-κB的抑制剂Bay 11-7082可显著降低大鼠海马组织中的caspase-3活性。上述结果被TUNEL试验结果进一步证实。慢性间歇性低氧组TUNEL阳性的大鼠海马神经元数量与假试验组相比显著增多(P0.01),而间歇性低氧曝露前给予褪黑素和维生素E可减少TUNEL阳性的大鼠海马神经元(P0.05)。假试验组、持续性低氧组和CIH+Bay 11-7082组间TUNEL阳性的大鼠海马神经元数量没有显著性差异。结论:1.睡眠呼吸暂停模型大鼠海马发生严重的氧化应激反应。2.氧化应激反应激活NF-κB,导致海马内炎症反应和激活的caspase3参与的海马神经元凋亡。3.海马神经元损伤是睡眠呼吸暂停模型大鼠认知功能障碍的原因。4.NF-κB在c-Jun、JunD和ATF-2等转录因子的参与下通过JNK信号传导通路调控海马神经元凋亡。5.NF-κB抑制剂有可能成为治疗睡眠呼吸暂停所致认知功能障碍的药物之一。
【学位授予单位】：中国医科大学
【学位级别】：博士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R766;R-332
【共引文献】
相关期刊论文 前9条
1 徐海涛;;唐代仕女画的绘画特点[J];作家;2015年08期
2 黄莎;;唐代仕女画的造型审美浅析[J];大舞台;2014年06期
3 杨柳;蒲泽敏;;张大千杨妃图中女性装扮研究[J];设计;2014年02期
4 杨柳;蒲泽敏;;张大千杨妃图中女性装扮研究[J];设计;2014年07期
5 张云志;路倩;;“唐风”及唐代敦煌壁画的人物风格[J];兰台世界;2013年36期
6 王继文;王秀玉;;卢作孚的“爱国”职业教育及其时代特色[J];兰台世界;2013年34期
7 王陶峰;;心境的写照:陈洪绶的仕女画[J];艺术探索;2011年02期
8 胡斌;;从壁画《山村图》谈太平天国乡村妇女风尚[J];美术学报;2009年03期
9 朱玉兰;;消费时代的大众身体[J];现代企业教育;2007年14期
相关硕士学位论文 前10条
1 夏红玉;传统仕女形象的绘画转型研究[D];湘潭大学;2018年
2 李凯;唐寅仕女图的多重意涵研究[D];安徽师范大学;2018年
3 李爽;“唐妆”与唐代仕女画关联性研究[D];淮北师范大学;2017年
4 凌晓晓;少数民族题材水墨人物画色彩应用研究[D];中央民族大学;2017年
5 陈艳秋;林风眠人物画造型研究[D];中国美术学院;2017年
6 朱圆圆;红妆黛眉—唐代仕女画面妆解读[D];青岛科技大学;2016年
7 严悦萌;中国工笔画形态构成影响因素研究[D];云南师范大学;2016年
8 马欣;南宋四幅镜像梳妆仕女画图像分析[D];华中师范大学;2016年
9 林水钰;唐寅仕女画造型与色彩的研究[D];福建师范大学;2016年
10 陈婉华;古今之变—女性题材工笔画创作比较研究[D];湖南科技大学;2015年
本文编号：
2774234
本文链接：https://www.wllwen.com/yixuelunwen/jichuyixue/2774234.html
