二甲双胍对大鼠肺纤维化模型肺组织中AMPK、LC3-Ⅱ表达的影响

发布时间：2020-08-12 07:40

【摘要】：目的:探讨二甲双胍对大鼠肺纤维化模型肺组织中AMPK、LC3-Ⅱ表达的影响。方法:将体重180.0~200.0g的40只SD雄性大鼠,饲养于遵义医学院实验动物中心房(SPF级),自由进食及饮水1周,随机分为5组(对照组、模型组、二甲双胍组、吡非尼酮组、二甲双胍+吡非尼酮组),每组8只。对照组予以单次气管内注射0.9%生理盐水2ml/Kg,其余各组均予以单次气管内注射博来霉素5mg/Kg以建立肺纤维化模型。于造模7天后开始给予相应药物(0.9%生理盐水5ml/Kg、0.9%生理盐水5ml/Kg、二甲双胍500mg/Kg、吡非尼酮50mg/Kg、二甲双胍500mg/Kg+吡非尼酮50mg/Kg)干预21天,于第22天(大鼠已禁食不禁水24小时)处死大鼠取材。采用HE、Masson染色图像半定量评分观察大鼠肺组织炎症及纤维化改变,采用酶联免疫吸附法测定肺组织匀浆中AMPK、HYP以及TGF-β1含量,通过免疫组化法测定肺组织中LC3-Ⅱ的含量。结果:成功复制大鼠肺纤维化模型。相较于对照组,模型组肺组织中HYP、TGF-β1含量表达增加,AMPK含量表达减少,肺组织HE及Masson染色图片半定量评分增加,差异有统计学意义(P0.05),LC3-Ⅱ含量表达增加,差异无统计学意义(P0.05);相较于模型组,二甲双胍组、吡非尼酮组及吡非尼酮+二甲双胍组肺组织中HYP、TGF-β1含量降低,AMPK含量增高,肺组织HE及Masson染色图片半定量评分减低,差异有统计学意义(P0.05),二甲双胍组、吡非尼酮+二甲双胍组肺组织中LC3-Ⅱ含量表达增加,差异有统计学意义(P0.05);相较于单独用药组,联合用药组肺组织中TGF-β1、HYP含量表达减低,AMPK、LC3-Ⅱ含量增高,肺组织HE及Masson染色图片半定量评分减少,差异无统计学意义(P0.05)。结论:1、二甲双胍可减轻肺部炎症、延缓肺纤维化的进展,但二甲双胍联合吡非尼酮较单独使用二甲双胍在疗效上无明显差异。2、二甲双胍可上调大鼠肺纤维化模型肺组织中AMPK及LC3-Ⅱ的表达。
【学位授予单位】：遵义医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R563;R-332
【图文】：

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遵义医学院硕士学位论文伍义兰炎、肺纤维化程度的影响。结合二甲双胍在多系统疾病中通过 AMPK 信号通路诱导自噬均有重要的作用，本实验进行免疫组化法分析肺组织中自噬相关蛋白 LC3-II 的表达水平以及用 ELISA 检测肺组织中 AMPK 的含量，研究二甲双胍对纤维化肺组织中 AMPK、LC3-II 蛋白表达的影响作用，以期望为 IPF 的治疗找到一种新型医学干预措施。

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自噬分子调节过程简图

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注：a 为空白对照组；b 为造模组。图 4：空白组与造模组大鼠外观对照2.2 大鼠体重及存活率变化情况2.2.1 各组大鼠体重变化情况气管内注射药物后前 4 日空白对照组及造模组大鼠体重均不同程度的下第 4-7 日两组大鼠体重逐渐增加。予药物干预后，各组大鼠体重均持续增加，白对照组平均体重波动较大，二甲双胍组、吡非尼酮组平均体重波动相对较小详见图 5。

【参考文献】