弓形虫TgHly-Ⅲ诱导虫体从宿主细胞逸出的初步研究

发布时间：2020-08-12 16:50

【摘要】：背景:弓形虫是一种专性细胞内寄生原虫,可以感染所有的有核细胞。据调查,世界人群的弓形虫感染率约为30%,我国这一比率为5%~20%。因此,弓形虫病是一种严重危害公共健康的疾病,研究弓形虫的致病机理可以为更好的防控弓形虫病提供科学依据。弓形虫完成在宿主细胞的生活过程需要入侵、复制和逸出三个阶段。而逸出阶段是虫体破坏宿主细胞的主要阶段。我们在弓形虫基因组中发现细菌溶血素蛋白的同源物,并提出假说,弓形虫三型溶血素可以介导虫体从感染细胞中逸出。目的:探究弓形虫三型溶血素介导虫体从细胞内逸出的作用及其分子机制方法:用在线生物信息学分析软件分析弓形虫三型溶血素的进化和蛋白结构;用大肠杆菌外源表达弓形虫三型溶血素;用外源表达的弓形虫三型溶血素蛋白孵育感染弓形虫的宿主细胞,用流式细胞仪对逸出虫体进行计数;用免疫印迹的方法检测宿主细胞凋亡相关蛋白表达水平变化。结果:弓形虫三型溶血素蛋白序列与疟原虫溶血素、蜡样芽孢杆菌的三型溶血素高度保守,是一种跨膜蛋白。外源表达的弓形虫三型溶血素蛋白与预测蛋白大小一致,并且能诱导弓形虫从感染的宿主细胞逸出。此类逸出依赖虫体在宿主细胞的发育水平、虫体内钙离子、以及虫体的运动能力。同时,经过弓形虫三型溶血素蛋白孵育的宿主细胞的凋亡相关的蛋白的表达水平和磷酸化水平升高,可能介导虫体逸出。逸出的虫体在毒力和生长速度上与对照组无显著性差异。结论:弓形虫三型溶血素蛋白可以诱导虫体从宿主细胞逸出,并且依赖虫体运动能力、钙离子和宿主凋亡途径。
【学位授予单位】：安徽医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R382.5
【图文】：

TgHly-III蛋白的生物信息学分析（A，B左）和蛋白表达（B右）

TgHly-III蛋白的生物信息学分析（A，B左）和蛋白表达（B右）

图 2 TgHly-III 蛋白诱导弓形虫逸出以及与钙离子、虫体运动能力的关系检测A：检测系统；B： TgHly-III 蛋白诱导弓形虫逸出（与 TgHlyIII 0 min 组比较：*P< 0.05） C、D：TgHly-III 蛋白诱导弓形虫逸出与虫体运动能力、钙离子的关系（与 Ctrl组比较：*P< 0.05；与 TgHlyIII 组比较：#P < 0.05）。Fig 2. TgHly-III could induce egress of T. gondii fron infected HFFs and thiskind of egress depended on intraprasitic calcium availability and parasitic mobility.A: egress assay system; B: TgHly-III-induced egress of T. gondii (compared to 0 min,*P<0.05); C: the relationship of TgHly-III-induced egress with calcium and parasitemovement (compared to Ctrl, *P<0.05; compared to TgHly-III, #P<0.05).

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本文编号：2790782