针刺干预腹泻模型家兔小肠运动作用及其机制研究

发布时间：2017-03-31 06:55

  本文关键词：针刺干预腹泻模型家兔小肠运动作用及其机制研究，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的:本课题通过复制家兔腹泻模型,以家兔小肠推进率为指标,验证针刺对腹泻的有效性,以此为切入点,比较腧穴之间的差异性与协同性;并在此基础上,通过观察家兔针刺前后小肠组织形态、小肠组织中SP、VIP表达的变化,初步探讨针刺干预腹泻模型家兔小肠运动的调节作用机制,为经脉脏腑相关理论提供实验依据。方法:选取健康新西兰长耳白家兔80只,体质量为2~2.5 kg,随机分为正常组、模型组、天枢组、大肠俞组、曲池组、上巨虚组、天枢+大肠俞组(单侧取穴)、曲池+上巨虚组(单侧取穴),每组10只。采用灌服番泻叶方法制作家兔腹泻模型,天枢组、大肠俞组、曲池组、上巨虚组取双侧穴位进行针刺,天枢+大肠俞组、曲池+上巨虚组取单侧穴位进行针刺,按60次/min的频率以手行针1min,留针20min,每10min行针1次,连续3 d。正常组正常饲养,不造模,不针刺,模型组只进行模型复制不进行针刺治疗。于末次治疗后一小时,每组按20 ml/kg灌胃量灌服半固体碳末营养糊。10min后予气体栓塞法处死家兔,再迅速开腹取小肠,从幽门处将小肠依次剥离后平铺于白纸上,测量幽门至回盲瓣处全长并记录,再测量幽门至首次出现半固体碳末营养糊处的距离并记录。以后者距离占前者距离的百分比作为小肠推进率。并取相应位置长1 cm小肠组织放入4%中性甲醛中固定,用于HE染色和免疫组化检测。结果:(1)针刺单穴对小肠推进率影响:与正常组比较,模型组家兔小肠差异有显著统计学意义(P0.01),小肠推进率增高;与模型组比较,天枢组(P0.01)、大肠俞组(P0.01)、曲池组(P0.01),差异均有显著统计学意义,除针刺上巨虚组对抑制腹泻家兔小肠推进率无明显影响外,其余各组均使小肠推进率明显降低;其中天枢组对家兔小肠推进率降低最为显著,大肠俞组次之。(2)针刺单穴及相应穴组对小肠推进率影响:与模型组比较,曲池+上巨虚组(P0.01)明显降低腹泻家兔小肠推进率;与曲池组比较,曲池+上巨虚组差异无统计学意义(P0.05)。与模型组比较,天枢+大肠俞组显著降低腹泻家兔小肠推进率;与天枢组、大肠俞组分别比较,天枢+大肠俞组差异均具有统计学意义(P0.05)。(3)小肠组织形态学变化:光镜下,正常组小肠结构完整,黏膜绒毛完整,无明显炎细胞浸润;模型组小肠结构不完整,肠壁变薄,黏膜出现不同程度的肿胀、充血,有炎细胞侵润,微绒毛萎缩、脱落,细胞间连接结构有缺损现象;治疗组小肠黏膜病理形态显著改善,黏膜仅轻度肿胀,结构清晰,绒毛基本无脱落。(4)小肠组织VIP,SP表达的变化:与正常组相比,模型组小肠组织VIP、SP免疫细胞阳性表达水平显著升高(P0.01),与模型组比较,天枢+大肠俞组小肠组织VIP、SP免疫细胞阳性表达水平显著减少(P0.01)。结论:(1)针刺可以抑制腹泻状态下家兔小肠的运动,且针刺效应的发挥与针刺腧穴的特异性密切相关,针刺可用于腹泻的治疗。(2)针刺对腹泻的治疗效果与针刺腧穴的配伍协同作用相关,通过腧穴配伍协同效应,能更好的发挥了针刺调节脏腑功能的作用。(3)针刺可以用于治疗腹泻可能与改善受损的小肠粘膜的病理损伤有关。(4)针刺治疗腹泻的作用机制可能是通过下调小肠组织中VIP、SP免疫细胞阳性表达水平来实现。
【关键词】：腹泻 针刺 小肠推进率 血管活性肠肽 P物质 协同作用
【学位授予单位】：安徽中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R245;R-332
【目录】：

• 中文摘要8-10
• ABSTRACT10-13
• 缩略词中英文对照表（Abbreviation）13-14
• 前言14-16
• 实验研究16
• 1 材料16-17
• 1.1 实验动物16
• 1.2 药品与试剂16
• 1.3 实验仪器16-17
• 2 方法17-20
• 2.1 动物选择及分组17
• 2.2 动物模型的建立17-18
• 2.2.1 番泻叶药液：17
• 2.2.2 模型复制：17
• 2.2.3 家兔腹泻模型成功的标准：17-18
• 2.3 腧穴定位及针刺方法18
• 2.3.1 腧穴定位（参照第二版《实验针灸学》，主编李忠仁，中国中医药出版社）18
• 2.3.2 针刺方法18
• 2.4 采集标本与指标观测18-20
• 2.4.1 半固体碳末营养糊的制备与使用18-19
• 2.4.2 小肠推进率的计算19
• 2.4.3 家兔小肠组织样品的制备19
• 2.4.4 家兔小肠组织HE染色19-20
• 2.4.5 组织标本观察20
• 2.4.6 VIP及SP的免疫组化检测20
• 2.5 统计学方法20
• 3 结果20-27
• 3.1 单穴组家兔小肠推进率的比较20-22
• 3.2 组穴与相应单穴之间家兔小肠推进率的比较22-24
• 3.2.1 曲池+上巨虚组（单侧）与曲池组、上巨虚组比较22-23
• 3.2.2 天枢+大肠俞组（单侧）与天枢组、大肠俞组比较23-24
• 3.4 家兔小肠HE染色结果24
• 3.5 家兔小肠免疫组化染色结果24-27
• 4 讨论27-37
• 4.1 中医学对腹泻的认识（参照第5版《中医内科学》，，主编周仲瑛，中国中医药出版社）27-29
• 4.1.1 中医学对泄泻病因的认识27-28
• 4.1.2 中医学对泄泻病机的认识28
• 4.1.3 中医诊断依据28
• 4.1.4 中医学对泄泻的鉴别诊断28-29
• 4.1.5 中医学对泄泻的治疗29
• 4.2 西医学对腹泻病的认识（参照第八版《内科学》，主编葛均波，徐永健，人民卫生出版社）29-31
• 4.2.1 腹泻的病因29-30
• 4.2.2 腹泻的发病机制30-31
• 4.2.3 腹泻的诊断与鉴别诊断31
• 4.3 针灸学对腹泻的研究31-37
• 4.3.1 针灸学对腹泻的理论认识（参照第5版《针灸学》，主编周仲瑛，中国中医药出版社）31-32
• 4.3.2 针灸治疗腹泻的临床研究32-33
• 4.3.3 针灸治疗腹泻的作用机制研究33-37
• 5 实验方法研究37-48
• 5.1 腹泻动物造模方法的研究37-40
• 5.1.1 腹泻动物模型的研究及评价标准37
• 5.1.2 腹泻动物模型的要求37
• 5.1.3 腹泻动物模型制备方法的研究37-40
• 5.1.4 动物模型制备方法的选择40
• 5.2 穴位选择依据40-42
• 5.2.1 曲池40
• 5.2.2 上巨虚40-41
• 5.2.3 天枢41
• 5.2.4 大肠俞41-42
• 5.2.5 单元、集元学说42
• 5.3 观察指标的选择依据42-45
• 5.3.1 小肠推进率42
• 5.3.2 小肠组织形态的病理改变42-43
• 5.3.3 VIP、SP43-45
• 5.4 实验结果分析45-48
• 5.4.1 针刺对小肠推进率的影响45-46
• 5.4.2 针刺对小肠组织形态学的影响46
• 5.4.3 针刺对小肠组织脑肠肽VIP、SP的影响46-48
• 6 结论48-49
• 7 问题与展望49-50
• 8 参考文献50-55
• 9 综述55-60
• 参考文献58-60
• 致谢60-61
• 个人简介61

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