粪菌移植对葡聚糖硫酸钠诱导的溃疡性结肠炎小鼠的保护作用及其机制研究
发布时间：2020-08-24 23:03
【摘要】：目的:研究粪菌移植(fecal microbiota transplantation,FMT)对葡聚糖硫酸钠(dextran sulfate sodium,DSS)诱导的溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)小鼠的作用并初步探讨其作用机制。方法:将60只C57BL/6J小鼠分为6组:A组(无菌水+生理盐水组,10只)、B组(无菌水+UC小鼠粪菌液组,10只)、C组(4%DSS溶液+生理盐水组,10只)、D组(4%DSS溶液+正常粪菌液组,10只)、E组(4%DSS溶液+思连康组,10只)、F组(4%DSS溶液+UC小鼠粪菌液组,10只)。每日观察各组小鼠一般情况,8天后实验结束,进行结肠长度、脾重及疾病活动指数(DAI)大体积分,采用HE染色进行组织学损伤积分,测定结肠组织髓过氧化物酶(MPO)活性,应用荧光定量聚合酶链反应(Real-Time PCR)检测粪便中肠球菌和乳酸杆菌丰度变化,流式细胞术检测小鼠全血Th17数量,免疫组化法检测IL-17、IL-23和RORγt在小鼠结肠组织的表达。结果:1.各组小鼠体重、结肠长度、脾重及DAI评分:与A组相比,C组小鼠体重减轻、结肠长度缩短、脾重增加,DAI评分明显增高,均具有统计学意义(P㩳0.05或P㩳0.01),D、E组上述指标与C组比较,均有显著差异(P0.05或P0.01),F组与C组比较,除DAI积分外,均有显著差异(P0.05或P0.01)。2.结肠组织学损伤及评分:B组、C组组织学损伤较A组高(P0.01),D组、E组经治疗后组织学损伤程度有所减轻,F组比C组情况更严重,同C组比较,均具有统计学意义(P0.01)。3.结肠组织髓过氧化物酶(MPO)活性:与A组相比,其B组、C组MPO均有不同程度升高(P0.01),D组、E组与C组相比,MPO水平明显下降(P0.05),但F组显著升高(P0.01)。4.小鼠粪便肠球菌、乳酸杆菌丰度变化:与A组相比,C组肠球菌丰度增高(P0.05),乳酸杆菌丰度降低(P0.01),E组处理小鼠的肠球菌丰度被抑制(P0.05),且D组、E组小鼠乳酸杆菌丰度较C组有所升高(P0.01)。5.全血Th17细胞:C组Th17细胞数量较A组明显升高,D组、E组治疗小鼠Th17细胞数量明显降低,与C组比较,具有统计学差异(P0.01),但F组Th17细胞较C组降低(P0.05)。6.结肠组织IL-23、IL-17、RORγt表达水平:C组较A组IL-17、IL-23、RORγt表达量增高(P0.01),D组、E组三个指标表达量有所下降,同C组比较具有统计学意义(P0.01),F组IL-17、IL-23、RORγt表达量较C组更高(P0.05或P0.01)。结论:FMT可缓解DSS诱导的UC小鼠炎症程度,改善其肠道菌群结构,其机制可能与调整菌群异常免疫有关,Th17细胞、IL-23/IL-17轴发挥重要作用。
【学位授予单位】：河南大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：R574.62;R-332
【图文】：
图 1 各组小鼠组织损伤情况及大体积分Fig. 1 Tissue damage and macroscopic score of mice in each group. A: Changefor body weight; B,C: Change for colon length; D: Change for spleen weight; E: Change for DAI.an±SEM (n=8). *P<0.05 vs A group, **P<0.01 vs A group, #P<0.05 vs C group, ##P<0.01 vs Cgroup.2. 各组小鼠组织学损伤及评分由图 2A 可见，正常组的小鼠结肠黏膜结构层次清晰，上皮细胞结构基本完整，腺齐排列，富含杯状细胞，固有层无明显炎性细胞浸润。B 组、C 组小鼠结肠黏膜上胞广泛缺失，腺体不完整，炎性细胞广泛浸润，呈典型炎性反应改变，组织学评分 组高(P＜0.01)，且 C 组损伤程度较 B 组更严重，差异有统计学意义（P＜0.01）
图 2 各组小鼠结肠组织 HE 染色、组织学积分ning and histopathological score. A: HE staining of mice in each group (pathological score. mean±SEM(n=8). **P<0.01 vs A group, ##P<0.01P<0.01 vs B group.鼠结肠组织 MPO 活性变化PO 活性为（0.505±0.035）U/g 蛋白，B 组、C 组分别上白、（1.451±0.129）U/g 蛋白，D 组、E 组治疗后 MPO 活
图 3 各组小鼠结肠组织 MPO 活性or each group. mean±SEM(n=8). **P<0.01 vs A grou便肠球菌、乳酸杆菌丰度变化 患者肠道菌群中变化最大的两种细菌分别是要观察了这两种菌在各组的变化。Real-ti，C 组肠球菌丰度明显升高（P＜0.05）， 组治疗对肠球菌丰度有抑制作用，但无统计低（P＜0.01），C 组比 B 组乳酸杆菌的影变乳酸杆菌丰度（P＜0.01），且 E 组效果较 乱情况有加重的趋势,但无统计学意义（P
本文编号：2802953
【学位授予单位】：河南大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：R574.62;R-332
【图文】：
图 1 各组小鼠组织损伤情况及大体积分Fig. 1 Tissue damage and macroscopic score of mice in each group. A: Changefor body weight; B,C: Change for colon length; D: Change for spleen weight; E: Change for DAI.an±SEM (n=8). *P<0.05 vs A group, **P<0.01 vs A group, #P<0.05 vs C group, ##P<0.01 vs Cgroup.2. 各组小鼠组织学损伤及评分由图 2A 可见，正常组的小鼠结肠黏膜结构层次清晰，上皮细胞结构基本完整，腺齐排列，富含杯状细胞，固有层无明显炎性细胞浸润。B 组、C 组小鼠结肠黏膜上胞广泛缺失，腺体不完整，炎性细胞广泛浸润，呈典型炎性反应改变，组织学评分 组高(P＜0.01)，且 C 组损伤程度较 B 组更严重，差异有统计学意义（P＜0.01）
图 2 各组小鼠结肠组织 HE 染色、组织学积分ning and histopathological score. A: HE staining of mice in each group (pathological score. mean±SEM(n=8). **P<0.01 vs A group, ##P<0.01P<0.01 vs B group.鼠结肠组织 MPO 活性变化PO 活性为（0.505±0.035）U/g 蛋白，B 组、C 组分别上白、（1.451±0.129）U/g 蛋白，D 组、E 组治疗后 MPO 活
图 3 各组小鼠结肠组织 MPO 活性or each group. mean±SEM(n=8). **P<0.01 vs A grou便肠球菌、乳酸杆菌丰度变化 患者肠道菌群中变化最大的两种细菌分别是要观察了这两种菌在各组的变化。Real-ti，C 组肠球菌丰度明显升高（P＜0.05）， 组治疗对肠球菌丰度有抑制作用，但无统计低（P＜0.01），C 组比 B 组乳酸杆菌的影变乳酸杆菌丰度（P＜0.01），且 E 组效果较 乱情况有加重的趋势,但无统计学意义（P
【参考文献】
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2 张晓杰;王莹;;儿童溃疡性结肠炎血清IL-1、IL-6、IL-10及TNF-α水平变化[J];中国妇幼保健;2015年20期
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5 刘江;杨关根;;细胞因子在炎症性肠病中的作用[J];浙江中西医结合杂志;2011年03期
6 杨孝来,吴勇杰,葛斌;大鼠乙酸性结肠炎模型的实验研究[J];兰州大学学报(医学版);2005年01期
本文编号：2802953
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