桃花多酚对AD模型大鼠相关蛋白及学习行为的影响

发布时间：2017-04-01 11:06

本文关键词：桃花多酚对AD模型大鼠相关蛋白及学习行为的影响，，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：背景阿尔茨海默病(Alzheimer's disease, AD)是一种不可逆性的、大脑重要功能逐渐衰退性的疾病,主要表现为进行性认知障碍以及记忆力损害为主要的中枢神经系统退行性的疾病。AD属于一种常见的心境障碍,其病理生理机制相对比较复杂,并且发病机制迄今也尚未清楚。随着人口的老龄化以及社会压力增大等诸多因素的影响,AD的发病率会越来越高,严重影响人类的健康以及生活质量,AD通俗点说指的是我们现在所称的老年性痴呆,或者是早老性痴呆。到目前为止,还没有任何有效的而且能够治疗和阻断AD的方法。所以,假如患上AD,就只有等待大脑功能逐渐的衰竭,直到死亡。目的探讨桃花多酚对阿尔茨海默病大鼠记忆行为能力及相关蛋白的影响。方法取健康成年大鼠50只,自由进食,饮用1%蔗糖水3d,使动物原来的饮水习惯发生改变。大鼠经10%水合氯醛腹腔麻醉后,在前囟后3.5mm,中线向左旁开2 mm处确定注射点。40只用于造模,用微量注射器向脑组织内缓慢注射Aβ1-40 2μL(10μg),10只用于对照Sham组选择相同部位注入等量生理盐水,肌注青霉素40万u／d抗感染,连续5d。自由进食饮水,观察两天。然后进行MORRIS水迷宫测验,计算大鼠的平均逃避潜伏期值,造模阳性是指每只大鼠逃避潜伏期与平均逃避潜伏期之差值占平均逃避潜伏期的比值20%。从造模阳性的动物中随机抽取30只,随机分为模型组(Model group,MG)、PBP-L剂量组(20mg/kg)、PBP-H剂量组(80mg/kg),之后每日灌胃给药1次,连续给药28d,Sham组(Shams group,SG)和MG大鼠灌胃等量的蒸馏水。水迷宫实验检测大鼠行为改变,检测海马组织PSD-95、S100β蛋白分子免疫组织化学及免疫荧光抗体的表达水平。结果水迷宫检测表明,Model组在目标象限寻觅的时间即逃避潜伏期较Sham组明显延长,PBP-L和PBP-H干预组与Model组相比逃避潜伏期显著减少(P0.05)。Model组动物与Sham组动物相比,目标象限空间探索能力下降显著,在单位时间内跨越原来平台的次数减少,且目标象限停留时间减少,均有显著统计学差异(P0.01)；实验干预组PBP-L和PBP-H在原平台所在的象限逗留的时间比较长,并且在单位时间内跨越原平台次数较Model组显著增加(P0.01)。模型组动物与正常对照组动物相比,海马组织中总抗氧化能力及海马组织中SOD活力下降、MDA含量增加(P0.01)；而PBP-L和PBP-H实验干预组与模型组比总抗氧化能力及SOD活力显著增加、MDA含量显著下降(P0.01),免疫组化检测结果表明Sham组仅见少量的PSD-95、 S100-β免疫组化阳性细胞,细胞着色比较浅；Model组的PSD-95、S100-p蛋白表达较多,细胞着色较深,颗粒增粗,其OD值与Sham组相比差异有统计学意义(P0.01)；PBP-L和PBP-H组PSD-95、S100-β阳性细胞表达比Model组有所减少,同时,细胞着色OD值较Model组下降(P0.01)；通过荧光显微镜观察,Model组可见PSD-95蛋白及S100-β蛋白表达阳性细胞呈现聚集或散在分布,其分布在海马细胞层,而在Sham组中,绿色荧光细胞数明显少于Model组(P0.01)。PBP-L和PBP-H实验干预组阳性细胞表达亦较Model组有所减少,差异具有显著统计学意义(P0.01)。Western blot检测发现：Model组中PSD-95、S100-β蛋白表达水平较Sham组均明显升高(P0.05); PBP-L和PBP-H组中PSD-95、S100-β蛋白表达较Model组显著降低(P0.05)。通过透射电镜观察Model组海马组织可见凝聚于核周边呈新月形细胞,核膜损伤,细胞内含有大量的脂褐素细胞膜系结构,核染色质电子密度增强,胞质空泡化,胞膜破裂,细胞出现崩解,形成了典型的细胞凋亡特征,PBP-L和PBP-H实验干预组细胞病理改变较Model组明显减轻,海马CA1区异常神经元较Model组明显减少。结论(1)桃花多酚有显著的抗氧化能力,明显改善AD大鼠的学习记忆能力。(2)桃花多酚可以下调海马组织中的PSD-95、S100-β的表达,可能是其神经保护和抗AD作用的机制之一
【关键词】：桃花多酚 阿尔茨海默病 行为能力 抗氧化 PSD-95 S100-β
【学位授予单位】：新乡医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R749.16;R-332
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