不同方式注射骨髓间充质干细胞对溃疡性结肠炎模型大鼠的实验研究

发布时间：2017-04-01 23:08

  本文关键词：不同方式注射骨髓间充质干细胞对溃疡性结肠炎模型大鼠的实验研究，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的1.体外扩增并鉴定骨髓间充质干细胞;2.制备溃疡性结肠炎大鼠模型;3.对比通过心脏及鼠尾静脉两种方式注射骨髓间充质干细胞对溃疡性结肠炎大鼠模型的疗效,并分析可能的治疗机制。方法体外扩增培养雄性SD大鼠的骨髓间充质干细胞,利用流式细胞术鉴定细胞表面抗原CD34、CD44、CD45及CD90的表达,并在一定条件下诱导其向脂肪细胞系、骨细胞系分化。用5%TNBS/乙醇灌肠建立UC大鼠模型,并设定正常对照组D,观察大鼠一般情况变化。模型建立后24小时,A组大鼠通过心脏注射干细胞悬液0.5毫升(含干细胞1×106个),B组由鼠尾静脉注射干细胞悬液0.5毫升(含干细胞1×106个),C组由鼠尾静脉给予等量的生理盐水,D组不做任何处理,继续观察各组大鼠一般情况变化。移植后7天观察计算大鼠疾病活动指数(DAI)评分,并将其处死,光镜下观察结肠组织病理变化,及人性别确定区Y蛋白(Human Sex-determining region Y protein,SRY蛋白)、G-蛋白偶联受体5(Leucine-rich repeat containing G protein coupled receptor 5,LGR-5)、自杀相关因子(Factor Associated Suicide,FAS)、诱导型一氧化氮合成酶(inducible Nitric Oxide Synthase,i NOS)的表达。结果1.骨髓间充质干细胞有贴壁生长特性,呈长梭形,漩涡状生长,经流式细胞术检测,CD34阳性率为0.78%,CD44阳性率99.38%,CD45阳性率0.43%,CD90阳性率为98.78%,且一定条件下有成脂及成骨能力。2.用TNBS/乙醇灌肠后一天,发现大鼠懒动,大便为稀便,体重下降,灌肠后三天症状最为严重。3.骨髓间充质干细胞移植后,A组大鼠的DAI评分较B组的低,B组大鼠的DAI评分比C组的低,三组不全相等,差异有统计学意义(F=90.603,p0.05),但A、B组间差异无统计学意义。C组结肠病理见大量淋巴细胞、中性粒细胞浸润及巨大溃疡,A组上皮破损范围较B组小,炎症状况较轻;在干细胞注射组的大鼠体内均可见SRY蛋白,在A组的分布较B组多,差异有统计学意义(t=15.224,p0.05);LGR-5在移植组的表达较C组明显增加,且A组高于B组,三组差异有统计学意义(F=24.7,p0.05);Fas在C组的表达高于D组(t=9.494,p0.05),Fas在移植组的表达较C组降低,且A组较B组低,三组间的差异有统计学意义(F=38.6,p0.05);在干细胞注射组的i NOS的表达较C组下降,并且A组较B组的表达更低,三组间的差异有统计学意义(F=33.8,p0.05)。结论经心脏注射骨髓间充质干细胞对溃疡性结肠炎模型大鼠的疗效优于经鼠尾静脉注射;其可能有促进肠道干细胞的再生,减轻肠道细胞的凋亡,抑制免疫反应,减轻炎症、氧化应激的作用,以此改善溃疡性结肠炎模型大鼠的临床症状。
【关键词】：骨髓间充质干细胞 大鼠 移植 溃疡性结肠炎
【学位授予单位】：安徽医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R-332;R574.62
【目录】：

• 中英文缩略词表5-6
• 中文摘要6-8
• Abstract8-11
• 前言11-13
• 第一部分 骨髓间充质干细胞的分离、培养及鉴定13-26
• 材料与方法13-17
• 结果17-21
• 讨论21-22
• 结论22
• 参考文献22-26
• 第二部分 不同方式注射骨髓间充质干细胞对溃疡性结肠炎模型鼠的疗效对比26-47
• 材料与方法26-33
• 结果33-39
• 讨论39-42
• 结论42-43
• 参考文献43-47
• 附录47-48
• 致谢48-49
• 综述49-56
• 参考文献54-56

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前2条

1 宫健伟,苑述刚,阮时宝;对免疫方法制作溃疡性结肠炎动物模型的探讨[J];中国实验方剂学杂志;2005年02期

2 张涛;谢建群;;大鼠溃疡性结肠炎模型的实验研究[J];中国中西医结合消化杂志;2006年04期

  本文关键词：不同方式注射骨髓间充质干细胞对溃疡性结肠炎模型大鼠的实验研究，由笔耕文化传播整理发布。

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本文编号：281455