肌母细胞对裸鼠模型人宫颈癌P53蛋白表达的影响

发布时间：2020-09-21 21:16

　　 研究背景宫颈癌是对女性健康危害最大的恶性肿瘤之一。从流行病学统计结果来看,近几年发病率有增无减,并且有日趋年轻化的趋势。宫颈癌好发于宫颈鳞柱状上皮交界处,多为实体肿瘤,直接蔓延发展、淋巴转移是较为多见的传播方式。目前的治疗方法仍是与其他恶性肿瘤类似,以手术为主。现在也有较传统手术方式所不同的术式,可以一定程度改善患者生活质量,保留有生育要求患者的生育功能,术后辅以放、化疗。但是对于不能耐受手术或者放、化疗的患者以及治疗后复发的患者,目前没有相关治疗的方式的报道。希望能够追求探索到新的既能提高病人生活质量又能改善预后的治疗措施。肌母细胞治疗疾病是目前较为先进的一种新型治疗措施。目前已经被研究,并且已经被证实较为有效的领域有肌萎缩的治疗、心肌病的治疗、糖尿病的应用。研究报道肌母细胞可加强心脏的收缩与舒张能力;将肌母细胞移植技术应用于糖尿病的治疗研究,动物实验取得了良好效果;在恶性肿瘤方面,关于前列腺癌的治疗效果有效的研究提出,肌母细胞可以一定程度的抑制小鼠模型上前列腺癌细胞的生长以及转移。研究目的初步研究肌母细胞在宫颈癌治疗方面的可行性。建立裸鼠人宫颈癌模型,注射肌母细胞治疗后,根据一系列的指标,来初步判断肌母细胞对于宫颈癌的治疗效果。为宫颈癌的治疗探索新的方法,尽可能的提高患者生活质量,减少副作用带来的痛苦。材料与方法裸鼠注射宫颈癌细胞造模成功后,随机分45只成功模型为3组,每组15只,分别为肌母细胞组、生理盐水组和顺氯氨铂组,分别于瘤体注射肌母细胞,腹腔注射顺氯氨铂、生理盐水。随后测量肿瘤体积的大小、观察裸鼠的生长情况。观察4周后,取出瘤体,运用HE染色观察肿瘤细胞形态的变化,免疫组化及western检测肿瘤细胞中蛋白量的表达。研究结果实验前肌母细胞组、顺铂组及生理盐水组的裸鼠体重和肿瘤体积分别为(16.05±0.18)g、(36.71±0.52)mm3,(16.09±0.15)g、(36.77±0.68)mm3,(16.08±0.13)g、(36.53±0.85)mm3,实验后3组相应分别为(16.35±0.26)g、(20.14±1.88)mm3,(16.09±018)g、(55.42±3.35)mm3,(15.72±0.19)g、(94.97±4.68)mm3;HE染色显示生理盐水组可见大量典型的异型性明显的宫颈癌细胞,肌母细胞组则可以明显看出出现了大量凋亡坏死宫颈癌细胞,顺氯氨铂组可见出现部分凋亡坏死的肿瘤细胞。免疫组化结果显示:P53蛋白3组表达的阳性率为20.0%、33.3%、60.0%;Western Blod结果显示:P53蛋白3组相比,相对蛋白含量为0.321±0.054、0.379±0.067、0.534±0.064,统计学结果分析示,P值均0.05。P53蛋白的含量在3组之间具有差异。结论实验结果中肌母细胞组瘤体变小有统计学意义,HE染色提示在肌母细胞组宫颈癌细胞明显裂解、坏死,免疫组化及Western Blot均提示肌母细胞组明显使瘤体中P53蛋白的含量减少,可以推测肌母细胞能够抑制瘤体的生长,促进宫颈癌细胞的凋亡。从各个层面提示肌母细胞对宫颈癌的治疗有一定的可行性,有可能是继手术,放、化疗之后一种新的治疗措施。
【学位单位】：郑州大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2017
【中图分类】：R737.33;R-332
【部分图文】：

实验后，肌母细胞组、顺铂组和生理盐水组体重分别为( 16.35±0.26) g、( 16.09±018) g 和(15.72±0.19) g。实验后各组间裸鼠的体重比较，差异有统计学意义(F2 =32.987，P2 ＜0. 001)。LSD 检验可得 3 组彼此之间差异有统计学意义(P＜0.001)，顺铂组实验前后的体重变化比较，差异无统计学意义(t=0.207、P=0.839），肌母细胞组与生理盐水组实验前后体重变化比较，差异有统计学意义(P＜0.05) 。2 HE染色，组织切片经过染色后，可以明显观察到3组瘤体组织细胞的不同表现。在生理盐水组，细胞组织形态与恶性肿瘤细胞的形态表现基本一致，均为细胞核体积增大，异型性明显，增殖迅速，可见到大量的异型细胞存在，并可见到因增值过快而导致的瘤体中央部分细胞因缺乏血供出现的少许坏死；在顺氯氨铂组，可以见到部分异型性明显的瘤体细胞出现部分坏死，出现一定量的细胞坏死现象，如核固缩、碎裂、溶解；在肌母细胞组，可以明显观察到大部分的异型性明显的瘤体细胞坏死，组织内见大量的细胞坏死、溶解、碎裂，另外在肌母细胞组可以明显看到，大量的正常分化组织替代了坏死肿瘤组织。见图1。

53的表达

注: χ2=5.294 P=0.071(卡方检验阳性率)免疫组化法检查各组P53表达，3组P53差异有统计学意义(P<0. 05)，表明3组P53的表达有差异。4 Western Blod 各组肿瘤组织中P53的蛋白量见图3，图4。经单因素方差分析可得3组P53蛋白的含量具有显著差异(P＜0.001)，经LSD检验可得肌母细胞组肿瘤细胞中P53蛋白的含量低于顺铂组(P=0.014)，顺铂组低于生理盐水组(P＜0.001)。A生理盐水 B顺铂组 C组肌母细胞组图3 各组肿瘤组织P53的蛋白量

【参考文献】

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本文编号：2824000