耳聋左慈丸对老年性耳聋模型小鼠血清及耳蜗SOD、MDA、PKC的影响

发布时间：2017-04-03 00:15

  本文关键词：耳聋左慈丸对老年性耳聋模型小鼠血清及耳蜗SOD、MDA、PKC的影响，，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的:本实验以D-半乳糖诱导的老年性耳聋模型小鼠为对象,基于抗自由基损伤方面,以“肾主耳”,“从肾论治耳聋”为理论基础,观察耳聋左慈丸对小鼠血清及耳蜗SOD、MDA、PKC的影响,探讨耳聋左慈丸对老年性耳聋的治疗机制,为耳聋左慈丸的应用提供实验依据。材料与方法:将85只健康雄性清洁级昆明小鼠随机分为2组,正常对照组15只和造模组70只,造模组采用腹腔注射D-半乳糖(150mg/kg.d),正常对照组腹腔注射等剂量的生理盐水,每日1次,连续2个月。造模成功后,将小鼠随机分为4组,模型对照组、中药低剂量组、中药中剂量组、中药高剂量组,每组15只。中药治疗组灌胃不同浓度耳聋左慈丸溶液,分别是中药低剂量组(3g/kg.d)、中药中剂量组(6g/kg.d)、中药高剂量组(12g/kg.d),正常对照组和模型对照组灌胃等剂量的生理盐水,每日1次,连续14天。采用听性脑干反应(ABR)检测听力水平、耳蜗基底膜铺片观察耳蜗基底膜毛细胞的的形态学变化、比色法测定小鼠血清的SOD活性、MDA含量的变化、酶联免疫吸附(ELISA)法检测小鼠血清中PKC水平、免疫组织化学检测小鼠耳蜗组织PKC的蛋白表达,采用RT-PCR检测小鼠耳蜗组织PKC和SOD基因的表达。结果:1.小鼠一般状况:与正常对照组相比,模型组小鼠一般状况变差;与模型对照组相比,中药治疗各组,一般状况均得到明显的改善。2.小鼠听力检测(ABR):造模后与造模前相比,造模组小鼠ABR阈值升高,差异有显著的统计学意义(P0.01)。灌胃2周后,模型对照组与正常对照组相比,差异有显著性统计学意义(P0.01);三个中药治疗组与模型对照组相比,ABR阈值逐渐降低,差异有显著的统计学意义(P0.01)。3.小鼠耳蜗铺片形态学观察:与正常组相比,模型组小鼠耳蜗基底膜毛细胞破损严重,边界模糊不清,排列紊乱或融合成片;与模型组相比,中药组小鼠耳蜗基底膜毛细胞边界清晰可数,排列整齐,偶有缺失,中药浓度越高的组别,毛细胞排列越整齐,缺失的越少。4.小鼠血清学变化:与正常对照组相比,模型对照组小鼠血清SOD活性降低、血清MDA含量增高(P0.01)、血清PKC水平升高,差异有统计学意义(P0.05)。与模型对照组相比,三个中药治疗组小鼠血清SOD活性逐渐升高,差异有统计学意义(P0.01);血清MDA含量逐渐降低,差异有统计学意义(P0.05);血清PKC水平逐渐降低,差异有统计学意义(P0.05)。5.小鼠耳蜗免疫组织化学PKC阳性表达:与正常对照组比较,模型对照组小鼠耳蜗PKC阳性率升高,差异有统计学意义(P0.01)。与模型对照组相比,中药治疗组小鼠耳蜗PKC阳性率有不同程度的降低,差异有统计学意义(P0.01)。6.小鼠耳蜗SOD、PKC基因表达:与正常对照组比较,模型对照组小鼠耳蜗PKC的基因表达显著上调,SOD的基因表达显著下调,差异有统计学意义(P0.01)。与模型对照组相比,中药治疗组小鼠耳蜗PKC的基因表达显著下调、SOD的基因表达显著上调,差异有统计学意义(P0.01)。结论:基于自由基损伤方面,耳聋左慈丸可以提高老年性耳聋模型小鼠SOD活性、降低MDA含量、降低PKC水平,达到治疗老年性耳聋的目的。
【关键词】：耳聋左慈丸 老年性耳聋 SOD、MDA PKC 自由基
【学位授予单位】：辽宁中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R285.5;R-332
【目录】：

• 摘要4-6
• 英文摘要6-9
• 英文缩略语9-10
• 前言10-13
• 材料与方法13-21
• 实验结果（附论文图片）21-29
• 讨论29-35
• 结论35-36
• 本研究创新性的自我评价36-37
• 参考文献37-41
• 附录 综述 耳聋左慈丸的研究近况41-52
• 参考文献48-52
• 在学期间科研成绩52-53
• 致谢53-54
• 个人简介54

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本文编号：283399