两种方法构建自发转移且便于观察的裸鼠原位肝癌模型

发布时间：2020-10-16 06:44

　　 目的构建Luc-GFP标记的高转移性人肝癌细胞株,两种方法建立方便观察且自发转移的裸鼠原位肝癌模型。方法构建p CDH-CMV-Luc-EF1-GFP-Puro重组慢病毒表达载体,并转染人肝癌细胞株HCCLM3,通过细胞悬液肝左叶注射法或皮下移植瘤组织块肝内植入法构建裸鼠原位肝癌模型,利用活体成像技术和组织病理学比较两种方法肿瘤的生长和转移情况。结果构建稳定表达荧光素酶(Luc)和绿色荧光蛋白(GFP)的高转移性人肝癌细胞株HCCLM3-Luc-GFP,裸鼠活体成像和病理学结果发现,两种方法建立的原位肝癌模型成瘤率均为100%。其中细胞悬液法建模周期短,对宿主肝的损伤小,更能模拟出肝癌患者的微环境,转移率高;而肿瘤组织块法的成瘤大小和位置较易控制,但转移率较低。结论成功构建Luc-GFP标记的高转移性人肝癌细胞系HCCLM3-Luc-GFP,细胞悬液法和肿瘤组织块转接法分别建立了自发转移且便于观察的裸鼠原位肝癌模型,为连续、直观地监测肿瘤的生长转移,评价抗肝癌生长转移药物的疗效奠定了基础。
【部分图文】：

肿瘤HE染色

肿瘤实体观察

双酶切鉴定，得到2个片段(见图2),Luc基因在1.6 kb～1.8 kb之间，慢病毒重组表达载体片段在7.0 kb～10.0 kb之间，酶切结果与预期相符。测序结果目的基因Luc无突变，重组表达载体构建成功。图2 重组表达载体酶切鉴定图
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本文编号：2842916