DUSP1在缺氧RAW264.7细胞中的表达及其对炎症免疫反应的调控作用

发布时间：2020-10-19 16:44

　　 目的探讨双特异性磷酸酶1(dual specificity phosphatase-1, DUSP1)在缺氧小鼠RAW264.7巨噬细胞中的表达情况及其在缺氧诱导的RAW264.7巨噬细胞炎症免疫反应中的调控作用。方法将RAW264.7细胞分别在缺氧(1%O_2)条件下培养不同时间(12、24和36 h),常氧组在常氧(21%O_2)条件下培养;采用RNA干扰技术干扰RAW264.7细胞中Dusp1表达并进行缺氧暴露24 h。收集各对应时间点细胞培养上清液和细胞标本,提取细胞总RNA和总蛋白。使用qRT-PCR检测Dusp1、Il1b、Il10和Tnfa的mRNA表达,采用Western blot检测DUSP1的蛋白表达,采用ELISA检测细胞培养上清液中IL-1β、IL-10和TNF-α的分泌水平。结果与常氧组(缺氧0 h)相比,缺氧暴露后RAW264.7细胞中DUSP1的mRNA和蛋白表达水平均显著升高(P0.05),蛋白表达在缺氧暴露24 h时达到峰值;缺氧暴露24 h和36 h Il1b、Il10 mRNA表达均显著升高(P0.05);缺氧暴露12 h时Tnfa mRNA表达明显降低(P0.05);缺氧暴露12、24 h和36 h RAW264.7细胞IL-1β的分泌水平明显增加(P0.05)。与干扰序列对照组相比,干扰Dusp1表达后,缺氧暴露24 h RAW264.7细胞中IL-1β的mRNA表达和分泌水平明显增加(P0.05),IL-10的分泌水平明显增加(P0.05),而TNF-α的mRNA表达和分泌水平明显降低(P0.05)。结论缺氧能够诱导RAW264.7巨噬细胞中DUSP1表达上调,DUSP1通过调节IL-1β、IL-10和TNF-α的表达和/或分泌参与调控缺氧诱导的RAW264.7巨噬细胞炎症免疫反应。
【部分图文】：

缺氧上调 RAW264.7 细胞中DUSP1的表达

缺氧对RAW264.7细胞中Il1b、Il10和Tnfa mRNA表达的影响

图2 缺氧对RAW264.7细胞中Il1b、Il10和Tnfa mRNA表达的影响2.5 DUSP1对缺氧RAW264.7细胞IL-1β、IL-10和TNF-α分泌水平的影响
【参考文献】

相关博士学位论文 前1条

1 彭华志;DUSP1在人正常及骨关节炎滑膜细胞中的表达及对骨关节炎的保护作用[D];第四军医大学;2017年

【共引文献】

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本文编号：2847459