周细胞对失血性休克大鼠血管通透性的保护作用

发布时间：2020-10-20 17:01

　　 目的探讨周细胞(pericyte, PC)对失血性休克(hemorrhagic shock, HS)大鼠血管渗漏的保护作用。方法采用失血性休克(血压30 mmHg,维持3 h)模型,将12～24周龄SD大鼠(雌雄各半,体质量200～220 g)分成4组(n=16):假手术组(Sham组)、失血性休克组(HS组)、乳酸林格氏液治疗组(LR组)、PC治疗组(PC组),治疗组在失血性休克大鼠血压至30 mmHg,维持3 h后开始治疗,治疗12 h后取材,观察不同处理组大鼠肺静脉上的周细胞数量、肺血管及肠系膜微血管的通透性、内皮紧密连接ZO-1和黏附连接VE-cadherin的表达变化。结果与正常对照组相比,失血性休克大鼠血管渗漏明显加重(P0.05),周细胞数量减少,内皮细胞超微结构紧密连接破坏,内皮细胞间紧密连接ZO-1和黏附连接VE-cadherin的表达明显降低(P0.05)。LR治疗12 h后能够轻微降低失血性休克大鼠的血管通透性;紧密连接开放程度轻微降低,内皮细胞间紧密连接ZO-1和黏附连接VE-cadherin的表达轻微升高。与LR组相比,PC治疗12 h后,失血性休克大鼠肺静脉上周细胞数量增加;细胞形态恢复,超微结构紧密连接开放程度显著降低;内皮细胞间紧密连接ZO-1和黏附连接VE-cadherin的表达明显著升高(P0.05),恢复至接近正常水平;血管渗漏明显改善,肠系膜微血管通透性显著降低。结论周细胞对失血性休克大鼠血管渗漏具有明显的保护作用。
【部分图文】：

提取的原代周细胞培养3～5代后,用PDGFR-β和NG-2鉴定周细胞。光镜下周细胞呈不规则三角形或多角形,胞体扁平、宽大。毛细血管周细胞的表面抗原标记物PDGFR-β和NG-2呈阳性表达(图1)。2.2 输注周细胞后对大鼠肺静脉上周细胞数量的影响

肺血管FITC-BSA渗漏结果示,与假手术组比,失血性休克组(血压30 mmHg,维持3 h)大鼠肺组织FITC-BSA平均光密度值增加近3倍(P<0.01)。乳酸林格氏液治疗12 h后,肺组织FITC-BSA平均光密度部分降低,但差异无统计学意义(P>0.05);与LR组比,PC治疗12 h后,大鼠肺组织FITC-BSA平均光密度值降低40%。提示PC可以显著改善失血性休克所致的肺血管渗漏,见图3。图3 周细胞对失血性休克大鼠肺血管通透性的影响

透射电镜观察结果示,与假手术组比,失血性休克组(血压30 mmHg,维持3 h)内皮细胞间紧密连接明显破坏。乳酸林格氏液治疗12 h后,紧密连接开放程度轻微降低。PC治疗12 h后,紧密连接开放程度显著降低(图6)。3 讨论
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