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肺炎克雷伯菌夹膜多糖激活AP-1诱导人支气管上皮细胞表达β-防御素-3

发布时间:2020-10-25 07:26
   目的:观察肺炎克雷伯菌夹膜多糖(CPS)对人支气管上皮细胞表达β-防御素-3(hBD-3)的影响,并探讨其作用机制。方法:用肺炎克雷伯菌CPS刺激人支气管上皮细胞BEAS-2B。使用实时定量PCR和ELISA分别检测hBD-3 mRNA和蛋白表达的影响。测定CPS处理前后丝裂原活化蛋白激酶(MAPKs)以及c-Jun的磷酸化。采用MAPKs和NF-κB抑制剂或RNA干扰TLR4表达,观察其在介导hBD-3表达中的作用。采用染色质共沉淀技术检测核转录因子AP-1与hBD-3启动子的结合情况。结果:CPS处理细胞后,hBD-3 mRNA的表达呈剂量依赖性升高,ELISA获得类似结果。CPS能激活MAPKs,采用p38、ERK及NF-κB抑制剂SB203580、PD98059和PDTC处理细胞后,不影响hBD-3的表达,而JNK抑制剂SP600125处理后,hBD-3分泌明显降低。CPS可诱导AP-1亚基c-Jun磷酸化及能增强AP-1与hBD-3启动子的结合。结论:肺炎克雷伯菌夹膜多糖激活AP-1诱导人支气管上皮细胞表达β-防御素-3。
【部分图文】:

蛋白,浓度,肺炎,细胞


mRNA和蛋白 BEAS-2B细胞给予0.1 μg/ml、1.0 μg/ml和10 μg/ml CPS孵育24 h后,实时定量PCR结果显示,与阴性对照组相比,hBD-3 mRNA表达水平随之增高,呈一定的浓度依赖性(图1A)。此外,培养上清中hBD-3蛋白水平也具有类似的趋势(图1B)。这表明肺炎克雷伯菌能诱导BEAS-2B细胞表达hBD-3。图2 沉默TLR4对CPS诱导hBD-3表达的影响

肺炎克雷伯菌夹膜多糖激活AP-1诱导人支气管上皮细胞表达β-防御素-3


沉默TLR4对CPS诱导hBD-3表达的影响

肺炎克雷伯菌夹膜多糖激活AP-1诱导人支气管上皮细胞表达β-防御素-3


MAPKs介导CPS诱导hBD-3分泌
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