云南省血吸虫病流行区一种拟钉螺及其寄生吸虫尾蚴的分子鉴定

发布时间：2020-11-13 10:37

　　 目的对云南省血吸虫病流行区的一种拟钉螺及其寄生吸虫进行分子生物学鉴定,了解其种属分类地位。方法采集云南省祥云县拟钉螺和钉螺,压碎镜检采集螺软体腹足部组织,并观察其体内尾拗寄生情况。采用逸拗法采集拟钉螺寄生的不同形态尾拗,螺体组织和尾拗样本分别提取基因组DNA,采用PCR法扩增螺体内16S核糖体RNA(16S rRNA)、细胞色素c氧化酶I (COI)、28S核糖体DNA (28S rDNA)基因及其体内寄生吸虫尾拗的NADH脱氢酶亚基l(ND1)、28S rfNA基因,对扩增产物进行测序,并通过序列比对及系统进化分析鉴定样本螺和寄生吸虫种属。结果共检测拟钉螺样本382只,发现无叉形、双叉形、燕子形等3种形态吸虫尾拗,阳性率分别为20.94%(80/382)、3.40%(13/382)、7.07%(27/382)。基于16S rRNA、COI、28S rDNA基因的分子进化分析显示,该拟钉螺与滇池德拉维螺(Delavaya dianchiensis同源性较高、聚在同一个分支。基于ND1、28S rDNA4基因的序列分析显示,无叉形尾拗吸虫属侧殖吸虫科,燕子形尾拗吸虫属孔肠科,双叉形尾拗吸虫可能为不同于中华血吸虫(Schistosoma sinensium)和勾形卵血吸虫(Schistosoma ovuncatum)的另一种血吸虫。结论初步了解了云南省血吸虫病流行区拟钉螺及其寄生吸虫种属分类,但更明确的分类关系和危害性等尚有待深入研究。
【部分图文】：

采集的拟钉螺样本剔除死螺后，有382只进行了压碎镜检观察，发现燕子形、无叉形和双叉形3种形态的吸虫尾蚴(图1)，其检出阳性率分别为7.07%(27/382）、3.40%(13/382）、20.94%(80/382）。其中2只拟钉螺体内同时发现了无叉形和燕子形尾蚴。2样本螺分子鉴定

云南省血吸虫病流行区拟钉螺和钉螺16S rRNA、COI、28S rDNA基因扩增片段长度相似，分别为500、630、740 bp左右（图2）。初步序列比对显示，该地区拟钉螺16S rRNA、COI、28S rDNA基因扩增产物序列与GenBank中滇池德拉维螺（Delavaya dianchiensis）同源性分别为94.8%、87.6%、95.7%；钉螺16S rRNA、28S rDNA基因扩增产物序列与湖北钉螺滇川亚种同源性均为100%（图3～5）。图3 云南省血吸虫病流行区拟钉螺和钉螺2828SS rDNA基因序列

图2 云南省血吸虫病流行区拟钉螺1616S rRNAS、COI、2828SrDNA基因PCR扩增产物琼脂糖凝胶电泳分析图4 云南省血吸虫病流行区拟钉螺1616S rRNAS基因扩增序列
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本文编号：2882096