改良固定方式以提高淋巴瘤组织的制片质量
发布时间：2020-11-19 12:51
目的通过改良两种时段接收淋巴结的固定方式,提高淋巴瘤诊断的制片质量。方法随机收集上午10时左右及下午4时左右接收的132例淋巴结标本,每例各切取2块组织,上午切取的组织随机分为2组,分别行短时间固定处理程序(上午短时间组)和延长固定时间处理程序(上午长时间组)进行固定,下午切取的组织也随机分为2组,也分别行短时间固定处理程序(下午短时间组)和延长固定时间处理程序(下午长时间组)进行固定。回顾性分析并筛选出病理诊断为弥漫大B细胞淋巴瘤的58例,其中包括上午10时左右接收的26例及下午4时左右接收的32例。脱水处理后的4组组织进行包埋后,按常规进行切片、HE染色、CD79a免疫组织化学检测、C-MYC双色分离荧光原位杂交实验(fluorescence in situ hybridization, FISH)。通过比较4组切片出现肉眼可见裂隙、皱折及破碎不全发生率、HE染色质量、免疫组织化学检测阳性率、荧光原位杂交成功率,探讨最佳的淋巴结固定方法。结果上午长时间组制片CD79a免疫组织化学检测阳性率、荧光原位杂交成功率均不如上午短时间组,切片不完整发生率及HE染色质量与上午短时间组无明显差异;下午短时间组制片切片不完整发生率高且HE染色质量、CD79a免疫组织化学检测阳性率、荧光原位杂交成功率明显不如上午短时间组;下午长时间组切片以上指标均与上午短时间组无明显差异。结论上午接收的淋巴结标本应剖开于当天进行隔夜常规脱水,下午接收的淋巴结标本必须剖开后行延长固定程序进行脱水,随后得到的淋巴结组织在切片完整性、HE染色、免疫组织化学检测及FISH检测中能更好地提高淋巴瘤诊断的制片质量。
【部分图文】：
上午长时间组（B组）及下午长时间组（D组）两组切片不完整发生率与上午短时间组（A组）的差异均无统计学意义；下午短时间组（C组）则显著高于A组（表2）。2行延长固定改良程序的淋巴结切片HE染色质量较高
C-MYC双色分离FISH检测显示，上午短时间组（A组）组织切片双色荧光杂交成功，红、绿信号明亮清晰；同A组相同消化时间，上午长时间组（B组）组织切片消化不良，杂交失败；下午短时间组（C组）组织切片双色荧光杂交红绿信号均有，但信号强度弱，清晰度相对较差；下午长时间组（D组）组织切片双色荧光杂交成功，红、绿信号明亮清晰。B、C两组FISH杂交成功率均明显低于A组，D组与A组的差异无统计学意义（表5）。讨论
恶性淋巴瘤的发病率逐年上升，对其研究也越来越引起病理学家的和临床医师的关注[5]，淋巴瘤的诊断与鉴别诊断一直以来都是病理诊断工作中的困难。随着病理技术的迅速发展，HE联合IHC及FISH在淋巴瘤的诊断已发挥着不可替代的作用。本单位以往工作中常遇到淋巴结接收后未及时进行对半切开固定，或标本固定时间不够即进行脱水处理，导致淋巴结组织中央固定不良，难以制片，影响后续的HE染色、免疫组织化学检测（IHC)以及FISH检测，影响淋巴瘤的诊断。故日常工作中，淋巴结组织处理质量的优劣至关重要。10%中性缓冲福尔马林（甲醛）因其经济，渗透性强，对组织收缩小，固定效果佳而且能同时与蛋白质和染料相结合，增强组织着色能力，被广泛用于组织的长期保存。使用10%中性福尔马林固定淋巴结，时间过短，其致密的被膜及细胞结构容易导致中间组织固定不良，造成制片时组织产生裂隙或脱片，HE染色时将出现灰染现象。实验中下午短时间组淋巴结组织（C组）固定时间不足，少于6小时，故切片出现的可见裂隙或脱片率高于上午短时间组（A组）且HE染色的质量最低，而上午长时间组（B组）、下午长时间组（D组）则与A组无明显区别。
【相似文献】
本文编号：2890033
【部分图文】：
上午长时间组（B组）及下午长时间组（D组）两组切片不完整发生率与上午短时间组（A组）的差异均无统计学意义；下午短时间组（C组）则显著高于A组（表2）。2行延长固定改良程序的淋巴结切片HE染色质量较高
C-MYC双色分离FISH检测显示，上午短时间组（A组）组织切片双色荧光杂交成功，红、绿信号明亮清晰；同A组相同消化时间，上午长时间组（B组）组织切片消化不良，杂交失败；下午短时间组（C组）组织切片双色荧光杂交红绿信号均有，但信号强度弱，清晰度相对较差；下午长时间组（D组）组织切片双色荧光杂交成功，红、绿信号明亮清晰。B、C两组FISH杂交成功率均明显低于A组，D组与A组的差异无统计学意义（表5）。讨论
恶性淋巴瘤的发病率逐年上升，对其研究也越来越引起病理学家的和临床医师的关注[5]，淋巴瘤的诊断与鉴别诊断一直以来都是病理诊断工作中的困难。随着病理技术的迅速发展，HE联合IHC及FISH在淋巴瘤的诊断已发挥着不可替代的作用。本单位以往工作中常遇到淋巴结接收后未及时进行对半切开固定，或标本固定时间不够即进行脱水处理，导致淋巴结组织中央固定不良，难以制片，影响后续的HE染色、免疫组织化学检测（IHC)以及FISH检测，影响淋巴瘤的诊断。故日常工作中，淋巴结组织处理质量的优劣至关重要。10%中性缓冲福尔马林（甲醛）因其经济，渗透性强，对组织收缩小，固定效果佳而且能同时与蛋白质和染料相结合，增强组织着色能力，被广泛用于组织的长期保存。使用10%中性福尔马林固定淋巴结，时间过短，其致密的被膜及细胞结构容易导致中间组织固定不良，造成制片时组织产生裂隙或脱片，HE染色时将出现灰染现象。实验中下午短时间组淋巴结组织（C组）固定时间不足，少于6小时，故切片出现的可见裂隙或脱片率高于上午短时间组（A组）且HE染色的质量最低，而上午长时间组（B组）、下午长时间组（D组）则与A组无明显区别。
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本文编号：2890033
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