心血管发育相关基因mpx在斑马鱼早期胚胎发育中的表达

发布时间：2020-12-15 13:24

　　目的:探讨斑马鱼体内髓样特异性过氧化物酶（mpx）在胚胎发育过程中的表达模式。方法:按Trizol法提取斑马鱼总RNA后逆转录成c DNA,再以c DNA为模板RT-PCR扩增mpx基因片段;用基因重组技术构建p CS2⁺-mpx重组质粒后将质粒酶切线性化,T3聚合酶制备mpx反义RNA探针,用全胚胎原位杂交检测mpx基因的表达。结果:成功构建了p CS2⁺-mpx重组质粒,原位杂交结果显示在24 hpf,mpx基因在斑马鱼胚胎中间细胞团表达;从24 hpf开始,mpx基因在斑马鱼胚胎卵黄囊表面、心脏和轴向脉管系统中高表达,一直持续到72 hpf;尤其是在72 hpf,mpx基因在整个胚胎头部、卵黄囊表面、尾部中弥散表达。结论:mpx基因在斑马鱼心血管系统发育的时间和部位中都有表达,mpx基因可能参与调控斑马鱼心血管系统发育。 

【文章来源】：贵州医科大学学报. 2020年05期

【文章页数】：6 页

【部分图文】：

pCS2+-mpx重组质粒HindⅢ、XhoⅠ双酶切产物的琼脂糖凝胶电泳结果

pCS2+-mpx重组质粒菌落RT-PCR产物的琼脂糖凝胶电泳结果

结果显示在18 hpf前的斑马鱼胚胎中无明显阳性信号表达，在24 hpf，斑马鱼胚胎中间细胞团有较弱的蓝紫色阳性信号表达;从24 hpf开始一直持续到72 hpf，在斑马鱼胚胎卵黄囊表面、心脏和轴向脉管系统中出现较强的的蓝紫色阳性信号表达;尤其是在72 hpf，在整个胚胎头部、卵黄囊表面、尾部中均有弥散的蓝紫色阳性信号表达(图5)。说明mpx基因在斑马鱼胚胎18 hpf以后开始表达，并且主要在心血管系统中高表达。图5 mpx基因的斑马鱼全胚胎原位杂交结果(40×)


本文编号：2918342