DVC-PVN Nesfatin-1通路对胃牵张敏感神经元放电活动和胃运动调控研究

发布时间：2017-04-08 03:23

  本文关键词：DVC-PVN Nesfatin-1通路对胃牵张敏感神经元放电活动和胃运动调控研究，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的:Nesfatin-1作为一种抑制摄食的神经肽,具有调控胃肠运动的作用,但是nesfatin-1对胃运动调控机制还未明确。本实验拟通过观察nesfatin-1对大鼠下丘脑室旁核(PVN)胃牵张敏感神经元(GD)放电活动的影响,以及迷走神经复合体(DVC)对其调控作用,阐述DVC和PVN间nesfatin-1神经通路的构成,观察PVN nesfatin-1对胃收缩幅度及频率的影响及潜在机制。方法:①采用荧光金逆行追踪技术,观察DVC-PVN间神经通路;②结合荧光免疫组化染色,观察DVC-PVN nesfatin-1神经通路构成;③采用细胞外放电就记录,观察nesfatin-1对GD放电活动的影响;④过在体胃运动研究,观察nesfatin-1对清醒自由活动大鼠胃收缩幅度和频率的影响;⑤观察nesfatin-1对迷走神经切断术后大鼠胃收缩幅度和频率的影响。结果:①逆行追踪结合免疫荧光染色研究发现,PVN内有NUCB2/nesfatin-1/荧光金(FG)双标神经元;②PVN内共记录到187个放电神经元,其中126个为GD敏感神经元,包括71个GD-E神经元和55个GD-I神经元。PVN微量注射nesfatin-1后,GD-E神经元放电频率明显增强(P0.01),而GD-I神经元放电频率明显减弱(P0.01);③大鼠PVN内预先微量注射SHU9119,nesfatin-1对GD-E神经元放电的兴奋效应可被部分阻断(P0.05),对GD-I神经元放电的抑制效应也被部分阻断(P0.05)。电刺激DVC,在PVN记录到的71个GD-E神经元中有24个被兴奋,14个被抑制,33个无反应。55个GD-I神经元,16个被兴奋,13个被抑制,26个无反应。电刺激DVC,GD-E神经元放电频率增加(P0.05),但预先PVN内注射抗NUCB2/nesfatin-1抗体,再电刺激DVC,GD-E神经元放电频率较前明显下降(P0.01)。电刺激DVC,GD-I神经元放电频率也显著增加(P0.05),预先PVN内注射抗NUCB2/nesfatin-1抗体,再电刺激DVC,GD-I神经元放电频率显著增强(P0.01)。④体胃运动结果表明,PVN微量注射nesfatin-1,大鼠胃收缩幅度以及收缩频率明显下降,且呈明显剂量依赖关系。SHU9119可部分阻断nesfatin-1对胃运动的抑制(P0.05)。⑤迷走神经切断术可部分阻断nesfatin-1对大鼠胃运动抑制效应。结论:nesfafin-1可调控大鼠胃牵张敏感神经元放电活动和胃运动,该效应可能与黑色素信号通路有关。
【关键词】：nesfatin-1 胃牵张敏感神经元 DVC PVN 胃运动
【学位授予单位】：青岛大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R363
【目录】：

• 摘要2-3
• Abstract3-6
• 引言6-7
• 第一章 材料与方法7-15
• 1.1 实验材料7-9
• 1.1.1 实验动物7
• 1.1.2 实验仪器7-8
• 1.1.3 实验药品及配制8-9
• 1.2 实验方法9-14
• 1.2.1 逆行追踪与免疫荧光染色9-12
• 1.2.2 电生理实验12-13
• 1.2.3 胃运动实验13-14
• 1.3 统计学分析14-15
• 第二章 实验结果15-23
• 2.1 大鼠DVC-PVN Nesfatin-1 神经通路15
• 2.2 PVN内GD神经元的鉴定15-16
• 2.3 PVN nesfatin-1 对大鼠GD神经元放电频率的影响16-17
• 2.4 SHU9119对PVN nesfatin-1 反应的GD神经元放电活动的影响17-18
• 2.5 电刺激DVC对PVN内GD神经元放电频率的影响18-20
• 2.6 PVN微量注射nesfatin-1 对大鼠胃运动的影响20-21
• 2.7 双膈下迷走神经切断术后PVN微量注射nesfatin-1 对大鼠胃运动的影响21-23
• 第三章 讨论23-25
• 结论25-26
• 参考文献26-29
• 综述29-52
• 参考文献40-52
• 致谢52-53
• 攻读学位期间研究成果53-54

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本文编号：291984