新生大鼠海马神经元的分离培养及鉴定

发布时间：2020-12-19 21:02

　　目的探讨新生大鼠原代海马神经元的分离培养及鉴定方法。方法选取新生24 h内SD大鼠,处死后分离海马体,运用机械分离及胰蛋白酶消化法制备单细胞悬液,离心后以5.0×10~5/mL的密度种植于24孔板内,每3～4 d更换培养液的1 2～1 3。结果提取的原代海马神经元于24 h后贴壁,并逐渐生长为梭形;培养3 d后神经元形成突起,逐渐增多,并不断延伸;培养4 d后开始形成清晰的神经纤维网络,胞体丰满,胞体周围可见光晕,贴壁良好;培养10 d后神经元发育更加成熟,神经纤维网络更加密集。荧光显微镜下,可见微管相关蛋白在海马神经元细胞体和树突中表达,神经元细胞阳性率为95%以上。结论经改良既往实验方法,得到可培养出细胞活性高、神经元阳性率高的新生大鼠海马神经元体外培养方法。 

【文章来源】：兰州大学学报(医学版). 2020年03期

【文章页数】：4 页

【部分图文】：

采用MAP2一抗及Alexa Fluor 488标记山羊抗小鼠IgG(H+L）二抗对培养的新生大鼠海马神经元细胞（Hoechst 33342染核，100×）

提取的原代海马神经元于24 h后贴壁，并逐渐生长为梭形，培养3 d后神经元形成突起，逐渐增多，并不断延伸，4 d后开始形成清晰的神经纤维网络，神经元胞体丰满，胞体周围可见光晕，贴壁良好。培养10 d后神经元发育更加成熟，神经纤维网络更加密集，见图1。2.2 免疫荧光鉴定神经元

【参考文献】：
期刊论文
[1]阿糖胞苷对大鼠海马神经元原代培养的影响[J]. 张余,刘英富,陈旭义,涂悦,梁冰,徐忠伟,赵永青.  中国应用生理学杂志. 2016(03)
[2]胎鼠海马神经元培养方法的改进及鉴定[J]. 王越,王士博,于晓雯,杨玲,拓西平.  中华老年多器官疾病杂志. 2016 (01)
[3]胎鼠海马神经元的无血清原代培养方法与形态学观察[J]. 潘永英,赵柏松,陈茜,宋兴荣.  国际医药卫生导报. 2014 (17)



本文编号：2926570