表达人源化抗血管内皮生长因子单克隆抗体的重组CHO细胞传代稳定性评价

发布时间：2020-12-26 08:44

　　目的评价表达人源化抗血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）单克隆抗体（简称抗VEGF单抗）的重组CHO细胞（K11细胞）传代稳定性。方法细胞培养瓶中进行K11细胞连续传代,于培养1、4和7个月时测定K11细胞的倍增时间、单细胞抗体表达量和基因拷贝数。在传代培养过程中,分别于传代培养2、3、4、5和7个月时将K11细胞接种至全自动生物反应器中进行发酵培养,测定发酵培养产物的单抗表达量,测序单抗轻、重链基因;采用三步层析（亲和、阴/阳离子交换层析）纯化人源化抗VEGF单抗,分析人源化抗VEGF单抗的纯度、电荷异质性、一级结构和生物学活性。结果 K11细胞在细胞培养瓶中连续传代培养1、4和7个月时,对数生长期K11细胞的倍增时间分别为25、23和34 h,单细胞抗体表达量分别为15. 6、15. 0和11. 5 pg/（个·d）,单细胞基因拷贝数分别为200、219和204 copies/个。生物反应器发酵培养5批单抗,纯化后单抗表达量为1. 18～2. 06 g/L,K11细胞单抗轻、重链基因测序结果均与理论序列一致,人源化抗VE... 

【文章来源】：中国生物制品学杂志. 2020年02期

【文章页数】：5 页

【部分图文】：

各批人源化抗VEGF单抗的CEX-HPLC分析

各批人源化抗VEGF单抗的胰酶肽图图谱

各批人源化抗VEGF单抗的SEC-HPLC分析

【参考文献】：
期刊论文
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本文编号：2939390