淋巴管内皮细胞通过NIK调节B细胞淋巴结归巢及SAPHO综合征外周血γδT细胞相关研究

发布时间：2020-12-27 14:11

　　目的:淋巴细胞在中枢淋巴器官发育成熟后,经血流定居在外周淋巴器官,并在全身器官、组织以及炎症部位发挥多种生物学功能。淋巴细胞归巢是淋巴细胞迁移的一种特殊形式,不同群或亚群的淋巴细胞在移行过程中具有相对选择性,即某一特定的淋巴细胞群或亚群定向归巢到相应的组织或器官。淋巴细胞归巢过程的分子基础是淋巴细胞与各组织、器官血管内皮细胞粘附分子的相互作用。其中,B细胞归巢到淋巴结的过程需要通过高内皮小静脉在趋化因子（尤其是CXCL13）的指导下完成。然而,CXCL13并不是由高内皮小静脉直接产生,其如何介导B细胞归巢到淋巴结的分子机制目前还未阐明。NF-κB信号通路参与免疫反应、炎症反应、细胞凋亡、肿瘤发生等多种生物进程。NIK作为非经典NF-κB途径的关键分子也在维持完整的淋巴系统功能,特别是在维持完整的淋巴结和B细胞群,发挥重要作用。但对于其在淋巴管内皮细胞中的作用仍不甚明了,本研究旨在探索淋巴管内皮细胞中的NIK分子对于淋巴管功能的影响及其分子机制。方法:本研究将NIK-flox小鼠与Lyvel EGFP-hCre小鼠交配繁育出淋巴管内皮细胞条件性敲除NIK的小鼠（NIKLEC-KO,NIK... 

【文章来源】：北京协和医学院北京市 211工程院校 985工程院校

【文章页数】：147 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

图１．１小鼠ＡＴＯ基因组座位以及ＡＴｉｄＴ靶载体和条件性ＡＭＴ等位基因的示意图??在小鼠Ａ？：基因组座位，外显子２中翻译起始位点的位置用箭头表示，编码ＮＩＫ蛋白激酶结??

ｒ?故＿＾．．．Ｌｙｖｅ?？－Ｃｒｅ?ａｌｌｅｌｅ??图１．３小鼠基因型ＰＣＲ鉴定结果??使用鼠尾ＤＮＡ对ＮＩＫ－ｆｌｏｘ，?ＮＩＫ－ＷＴ，Ｌｙｖｅｌ－Ｃｒｅ和Ｌｙｖｅｌ－ＷＴ基因进行ＰＣＲ后通过琼脂糖凝??胶电泳显示的结果，鉴定得到野生型（ＷＴ，?ＭＫ＋／＋ＬｙｖｅＩ＋／＆ｅ），杂合子（Ｈｅｔ，ＮＩＫ＋／ｆｌＬｙｖｅｌ＋／＆ｅ）和??纯合的淋巴管内皮细胞特异性敲除ＮＩＫ的小鼠（ＮＩＫＬＥＣ－ＫＱ，ＮＩＫｆｌ／ｆｌＬｙｖｅｒ／＆ｅ）。??２６??

??１４?ｋｂ??？??图１．２?Ｌｙｖｅｌ?ＥＧＦＰ－ｈＣｒｅ转基因小鼠的基因敲入打靶图??通过内部核糖体进入位点（ＩＲＥＳ），使用ｐＩＲＥＳ－ＧＦＰ－ｈＣｒｅ－ＦＮＦ载体，将基因插入??ｉｊｖｅ－／基因座位的３’非翻译区（ＵＴＲ）。新霉素抗性基因（《ｅ〇）两侧各有一个方向相同的ＦＲＴ位??点（由？表示），通过与表达Ｆｌｐ重组酶（ＦＬＰ－ＦＲＴ重组酶系统）的小鼠交配在胚系去除。??Ｆｉｇ．１．２?Ｍａｐ?ｏｆ?ｔｈｅ?Ｌｙｖｅｌ?ＥＧＦＰ－ｈＣｒｅ?ｔｒａｎｓｇｅｎｉｃ?ｍｉｃｅ?ｋｎｏｃｋ－ｉｎ?ｔａｒｇｅｔｉｎｇ??Ｌｙｖｅ－１?３５?ｕｎｔｒａｎｓｌａｔｅｄ?ｒｅｇｉｏｎ?（ＵＴＲ）?ｉｓ?ＰＣＲ?ａｍｐｌｉｆｉｅｄ?ａｎｄ?ｓｕｂｃｌｏｎｅｄ?ｉｎｔｏ?ｔｈｅ?ｐＩＲＥＳ－ＧＦＰ－ｈＣｒｅ－??ＦＮＦ?ｖｅｃｔｏｒ．?Ｔｈｅ?ｎｅｏｍｙｃｉｎ?ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ?ｇｅｎｅ?（ｎｅｏ）?ｉｓ?ｆｌａｎｋｅｄ?ｂｙ?ＦＲＴ?ｓｉｔｅｓ?（?？）?ａｎｄ?ｉｓ?ｒｅｍｏｖｅｄ?ｂｙ??ｉｎｔｅｒｃｒｏｓｓｉｎｇ?ｗｉｔｈ?ｍｉｃｅ?ｅｘｐｒｅｓｓｉｎｇ?Ｆｌｐ?ｒｅｃｏｍｂｉｎａｓｅ?ｉｎ?ｔｈｅ?ｇｅｒｍｌｉｎｅ?（ＦＬＰ－ＦＲＴ?ｒｅｃｏｍｂｉｎａｓｅ?ｓｙｓｔｅｍ）．??ＷＴ?ＮＩＫＬＥＣＫＯ?Ｈｅｔ??＿＿?麵？趟??Ｌｙｖｅｌ＿ｅ：１＋／Ｃｒｅ??ｒｌｊｉｗ?＋?ＮｌｌＣｆｌｏｘ?ａ；ｌｅ！＃崳?么顯．姨?＿?ｗ，令?ａｌｌｅｌｅ??夺■?Ｌｙｖｅ１－ＷＴ??ｒ?故＿＾．．．Ｌｙｖｅ?？－Ｃｒｅ?ａｌｌｅｌｅ??图１．３小鼠基因型ＰＣＲ鉴定结果??使用鼠尾ＤＮＡ对ＮＩＫ－ｆｌｏｘ


本文编号：2941882