CNPs对细胞毒性CD8 + T细胞的作用及其机制研究

发布时间：2021-01-04 10:30

　　背景:细胞毒性CD8⁺T细胞（Cytotoxic CD8⁺T cells,CTLs）在控制肿瘤和细胞内病原体（包括病毒和细胞内细菌）中发挥了关键作用。当遭遇抗原时,抗原特异性的CD8⁺T细胞在次级淋巴器官中被抗原提呈细胞所激活。活化的CD8⁺T细胞经过克隆增殖,会产生很多具有细胞溶解能力的效应细胞。随后,效应细胞陆续迁移到身体的各个角落,以清除感染的细胞和病原体。在清除感染细胞和病原体的过程中,CTL细胞产生了多种细胞因子和细胞杀伤效应分子。如今,癌症和慢性感染威胁着人们的健康。尽管用于肿瘤免疫治疗的过继性T细胞移植（adoptive T cell transfer,ACT）治疗取得了显着显著的进展,尤其是CAR-T细胞治疗获得了美国食品和药物管理局（FDA）的商业批准,但在治疗的过程中部分患者也出现了诸如细胞因子释放综合征（cytokine release syndrome,CRS）和神经毒性等严重的毒副作用。因此寻找一种能够有效提高CTL细胞杀伤活性的有效方法,尤其是在体外,是一个迫切需要解决的... 

【文章来源】：中国人民解放军陆军军医大学重庆市

【文章页数】：55 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

CNPs的合成和特性

陆军军医大学硕士学位论文异性识别 LCMV 病毒 GP33-41 糖蛋白表位的能力）中阴选得到 na ve CD8+T 细胞，在体外刺激活化的同时加入不同浓度的 CNPs（0, 10 μM, 100 μM, 500 μM, 和 1000 μM）共同培养。在共培养 4 天后，通过 Annexin V 和 7-AAD 染色检测存活的细胞比率。如图所示，左下角中 Annexin V 和 7-AAD 双阴性的细胞群代表的是活细胞亚群。结果显示约有 90%的 P14 细胞存活，表明 CNPs 对 P14 细胞没有细胞毒性。（图 2a，2b）为了模拟生理条件下 CNPs 的使用，在后续实验中 CNPs 使用了 10 μM，100 μM 的使用浓度。

图 3 CNPs 对 P14 细胞增殖没有影响（a）CNPs 处理 4 天后，经过 CFSE 染色的 P14 细胞分裂代表性直方图。图中数字表示细胞分裂代数。（b，c）在活化的 P14 细胞中 Ki-67+亚群的代表性点状流式细胞图和条形统计图。数据代表了 2 组独立实验（n ≥ 3）（ns：与 0μM 相比，p >0.05）3.4 CNPs 对 CD8+T 细胞增殖没有影响。在上述的实验中我们证明了 CNPs 对 P14 细胞的增殖没有影响。我们接着探究了CNPs 对 CD8+T 细胞增殖的影响。用羧基荧光素二醋酸酯（carboxyfluorescein diacetatesuccinimidyl ester，CFSE）荧光标记的 CD8+T 细胞在体外激活并和不同浓度的 CNPs共培养 4 天后检测。在不同 CNPs 培养浓度下，CD8+T 细胞显示出了相似的增殖效率（大约 4 代）。（图 4a）同样地，在活化后第 4 天，CD8+T 细胞在不同浓度下表达 Ki-67蛋白的比例相似。（图 4b，4c）综上所述，以上的数据说明了 CNPs 不仅对活化的 P14细胞增殖没有影响。对活化的 CD8+T 细胞增殖也没有影响。

【参考文献】：
期刊论文
[1]Biochemical and cellular evidence of the benefit of a combination of cerium oxide nanoparticles and selenium to diabetic rats[J]. Nazila Pourkhalili,Asieh Hosseini,Amir Nili-Ahmadabadi,Shokoufeh Hassani,Mohsen Pakzad,Maryam Baeeri,Azadeh Mohammadirad,Mohammad Abdollahi.  World Journal of Diabetes. 2011(11)



本文编号：2956614