靶向CIP2A的siRNA对小鼠睾丸支持细胞及雄激素受体的作用及机制

发布时间：2021-01-12 02:53

　　研究背景和研究目的当前男性不育发病率逐年升高,中国人口协会2013年调查显示夫妻不孕不育中,男性不育为主因的占35%。根据向桂桥等2005年统计资料,致不育的原因与儿童时期睾丸发育异常、睾丸损伤、免疫、内分泌、感染等因素密切相关,部分与遗传有关。因此,探明儿童睾丸生殖功能损伤及修复的可能机制,可以为后续促进生殖功能恢复的研究指明方向。众所周知,睾丸组织主要由3大类细胞组成:生精、间质和支持细胞。生精细胞的主要功能为精子生发,间质细胞能生产雄激素,而支持细胞则具有多种重要作用,甚至被称为生精细胞的“保姆细胞”。因其最早由意大利Enricol Sertoli于1865年发现,Sertoli细胞由此得名。近年来研究发现,睾丸支持细胞除对生殖细胞有支持和营养作用,同时还具有构成血睾屏障,参与自身免疫豁免（免疫相关）,形成睾丸内环境,产生类固醇类物质（内分泌相关）,吞噬细胞残体等重要功能;此外,支持细胞上的雄激素受体（androgen receptor AR）也被认为与男性不育症密切相关,AR基因先天突变即可引发。鉴于睾丸支持细胞的重要性,以及希望实验研究的集中性,我们选取了睾丸支持细胞作为本次... 

【文章来源】：山东大学山东省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：105 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

图１?ＴＭ４细胞系光镜下形态??

微镜进行观察（Ｚｅｉｓｓ?８００）。??结果：??根据图２，分别测定ＣＩＰ２Ａ蛋白和其ＤＮＡ，显影良好。将两图ｍｅｒｇｅ后可见在ＴＭ４??细胞中，ＣＩＰ２Ａ基因位于细胞核内，但其合成的ＣＩＰ２Ａ蛋白主要分布于细胞胞浆??中。??图２免疫荧光ＣＩＰ２Ａ在ＴＭ４细胞中定位与分布??２．２正常小鼠ＴＭ４细胞中ＦａｓＬ蛋白的定位与分布??材料和仪器??实验材料??ＤＭＥＭ／Ｆ１２培养基?美国Ｇｉｂｃｏ公司??青链霉素?美国Ｇｉｂｃｏ公司??胎牛血清?美国Ｇｉｂｃｏ公司??马血清?美国Ｇｉｂｃｏ公司??ＤＭＳＯ?美国Ｇｉｂｃｏ公司??０．２５％的胰酶消化液?美国Ｇｉｂｃｏ

??结果：据图３，在正常ＴＭ４细胞中，ＦａｓＬ基因及其蛋白显影强度一般，Ｍｅｒｇｅ后??可见两者几乎完全重叠，提示ＦａｓＬ基因及其蛋白主要分布于细胞核中。??■Ｍｌ??图３免疫荧光ＦａｓＬ在ＴＭ４细胞中定位与分布??１２??


本文编号：2971996