RelB对HIV-1 Vpr转录激活及诱导细胞G2/M期停滞功能影响的初步研究

发布时间：2021-01-13 15:48

　　Vpr是人类免疫缺陷病毒（Human Immunodeficiency Virus type 1,HIV-1）的辅助蛋白之一,在病毒复制及AIDS进程中起重要作用。为了研究Vpr完成其生物学功能的分子机制,本研究利用酵母双杂交技术,从人的cDNA文库中筛选,并经免疫共沉淀技术证实NF-κB通路中的重要蛋白RelB与Vpr存在相互作用;发现RelB蛋白能促进Vpr介导的对NF-κB报告基因的激活,也能促进Vpr对HIV-1LTR的反式激活作用。利用流式细胞技术发现RelB促进Vpr诱导细胞周期G2/M期停滞。上述结果表明,RelB辅助Vpr完成其转录激活以及调控细胞周期的功能。 

【文章来源】：病毒学报. 2013,29(01)北大核心

【文章页数】：7 页

【文章目录】：
材料与方法
    1 酵母双杂交试验
    2 质粒
    3 细胞培养, 转染及荧光素酶活性检测
    4 RelB knockdown细胞系的构建
    5 免疫共沉淀
    6 Western blot 蛋白样品经SDS-PAGE电泳后, 转印至PVDF膜 （Millipore公司） , 然后用5%脱脂奶粉封闭45
    7 流式细胞术分析细胞周期
结 果
    1 酵母双杂交筛选
    2 Vpr与RelB相互作用的确证
    3 RelB促进Vpr对NF-κB报告基因的激活
    4 Vpr对NF-κB报告基因的激活依赖于内源RelB
    5 RelB在Vpr反式激活HIV-1 LTR中的作用
    6 RelB对Vpr诱导G2/M期停滞的影响
讨 论



本文编号：2975136