MEF2A/2D参与Rho信号通路调控去极化诱导的血管平滑肌细胞分化过程

发布时间：2021-01-23 03:51

　　目的:探讨肌细胞增强因子2（MEF2）在Rho信号通路调控去极化诱导的血管平滑肌细胞分化过程中的角色。方法:原代培养小鼠门静脉血管平滑肌细胞,采用免疫荧光、Western blotting、实时荧光定量RT-PCR及siRNA技术,检测高钾去极化刺激下RhoA蛋白胞膜移位情况、LIM激酶（LIMK）和丝切蛋白2（cofilin-2）的磷酸化水平,以及MEF2四种亚型、心肌素（myocardin）以及平滑肌蛋白22α（SM22α）的mRNA表达水平。结果:高钾去极化30 s后RhoA即发生胞膜移位,而LIMK和丝切蛋白2蛋白磷酸化分别在10 min和30 min达到峰值,分别增加42.20%和32.75%（均P<0.01）。高钾刺激24 h后MEF2A和2D的mRNA表达分别增加47.63%（P<0.05）和48.15%（P<0.01）。沉默MEF2A/2D后,心肌素的表达不再对去极化敏感,但SM22α的mRNA表达不受影响。结论:MEF2A/2D通过调控心肌素参与了Rho信号通路调控去极化诱导的血管平滑肌细胞分化过程。 

【文章来源】：中国病理生理杂志. 2013,29(03)北大核心

【文章页数】：6 页

【文章目录】：
材 料 和 方 法
    1 动物与试剂
    2 方法
        2.1 门静脉血管平滑肌细胞的原代培养
        2.2 免疫组化
        2.3 Western blotting 检测蛋白质表达
        2.4 siRNA转染及实时荧光定量RT-PCR检测mRNA表达
    3 统计学处理
结 果
    1 高钾去极化刺激小鼠门静脉VSMCs激活RhoA
    2 高钾去极化刺激对LIMK和cofilin-2磷酸化的影响
    3 高钾去极化刺激小鼠门静脉VSMCs对转录因子心肌素及平滑肌标志物mRNA表达的影响
    4 高钾去极化刺激小鼠门静脉VSMCs对MEF2四种亚型mRNA表达的影响
    5 高钾去极化刺激对沉默MEF2A和MEF2D的VSMCs心肌素和SM22α mRNA表达的影响
讨 论


【参考文献】：
期刊论文
[1]人Gax基因转染对血管平滑肌细胞增殖、迁移和细胞周期的影响[J]. 郑辉,薛松,连锋,胡振雷,汪永义.  中国病理生理杂志. 2012(02)



本文编号：2994492