Jnk2通过调节压力诱导的线粒体自噬抑制NLRP3炎症小体的激活

发布时间：2017-04-11 18:12

  本文关键词：Jnk2通过调节压力诱导的线粒体自噬抑制NLRP3炎症小体的激活，，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：NLRP3炎症小体是一种多蛋白复合物,在临床上涉及到多种疾病,例如肥胖症,痛风,阿尔茨海默型老年痴呆和一些自发性炎症等。研究报道病理或损伤相关分子模型可以引发炎症小体的激活。一旦被激活,NLRP3炎症小体会马上活化半胱氨酸蛋白酶Caspase-1,活化的Caspase-1随即开始剪切促炎症因子IL18和IL-1??的前体形式使其成熟并开始分泌参与相应的炎症反应。NLRP3炎症小体的激活本身是一种免疫监管行为,可以修复组织损伤,但是需要注意的是它的失调会引发严重的免疫疾病。因此在临床治疗上我们需要平衡炎症小体在自主防御,组织修复和超活化所引起的炎症疾病的关系。目前临床上的主要治疗手段是通过阻断IL-1??的活化来达到治疗目的。大量研究表明NLRP3炎症小体的激活最主要的三个因素是钾离子流,溶酶体蛋白酶泄漏和活性氧ROS的积累。而活性氧ROS最主要的来源来自线粒体,最近越来越多的文章证明了线粒体与NLRP3炎症小体活化之间的关系。线粒体自噬可以通过清除积累的损伤线粒体和过多的活性氧ROS来减缓炎症小体的活化。在这篇文章中,我们发现小鼠胚胎成纤维Jnk2基因缺陷型细胞存在过多的细胞自噬活性,这种活性消耗了过多的线粒体自噬转换蛋白p62。p62是装配线粒体自噬的必要蛋白。当Jnk2基因缺陷型细胞遭遇细胞压力或外界刺激时,过少的p62会导致其无法通过诱导线粒体自噬来清理损伤的线粒体,从而积累过多的损伤线粒体以及线粒体损伤积累产生的ROS,引发炎症小体的激活。在内毒素LPS诱导的败血病休克小鼠模型中,腹腔注射LPS会导致Jnk2基因缺陷型小鼠诱发过多的NLRP3炎症小体活性,分泌大量促炎症因子IL18和IL-1?从而导致其存活时间显著缩短。总的来说,我们的研究阐述了Jnk2可以通过对线粒体的质量控制来抑制炎症小体超活化的调控机制。在临床上,该调控机制可以为减轻NLRP3炎症小体活化引起的自身性炎症疾病提供潜在的药物靶点。
【关键词】：Jnk2 线粒体自噬 p62 NLRP3炎症小体
【学位授予单位】：浙江理工大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R364.5
【目录】：

• 摘要4-5
• Abstract5-8
• 1、研究背景8-15
• 1.1 NLRP3炎症小体8-9
• 1.2 线粒体自噬9-10
• 1.3 转换蛋白p6210-12
• 1.4 c-Jun蛋白氮末端激酶Jnk12-14
• 1.5 研究目的与意义14-15
• 2、实验材料与方法15-28
• 2.1 实验材料15-16
• 2.1.1 实验试剂15-16
• 2.1.2 小鼠16
• 2.1.3 si RNA序列16
• 2.2 实验方法16-28
• 2.2.1 Western blot16-18
• 2.2.2 免疫荧光18-19
• 2.2.3 Multiplex immunoassay19-21
• 2.2.4 RNA抽提21-22
• 2.2.5 质粒和si RNA的转染22-23
• 2.2.6 细胞培液上清沉淀23
• 2.2.7 RT-QPCR23-24
• 2.2.8 Lentivirus感染24
• 2.2.9 In vivo实验24
• 2.2.10 细胞因子分析24
• 2.2.11 分离和培养小鼠骨髓来源巨噬细胞(BMDMs)24-26
• 2.2.12 炎症小体活性分析26
• 2.2.13 线粒体ROS水平测量26
• 2.2.14 透射电子显微镜26
• 2.2.15 稳定细胞系的建立26-27
• 2.2.16 荧光显微镜27-28
• 3、实验结果28-40
• 3.1 Jnk2参与压力诱导的线粒体自噬作用的调节28-30
• 3.2 Jnk2蛋白维持自噬转换蛋白p62的稳态表达水平30-32
• 3.3 稳态水平下Jnk2蛋白抑制了过量的细胞自噬活性32-34
• 3.4 Jnk2抑制炎症小体的活性34-38
• 3.5 Jnk2蛋白不影响红细胞的成熟38-40
• 4、讨论40-43
• 5、结论43-44
• 参考文献44-49
• 攻读学位期间的研究成果49-50
• 致谢50-51

【共引文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 胡坚;杨闰平;汶春苗;李恒进;赵华;;NLRP3炎症小体在咪喹莫特诱导小鼠银屑病样模型中的表达及芥菜籽对其的影响[J];南方医科大学学报;2013年09期

2 王潇娣;朱玲;蔡雨函;黄仆;徐志文;;猪NF-κB p65/p50亚基的原核表达及其对猪繁殖与呼吸综合征病毒增殖的影响[J];病毒学报;2013年06期

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4 张媛媛;侯卫平;曹雪娇;袁发焕;;NALP3/ASC/caspase-1在局灶节段性肾小球硬化肾组织中的表达变化[J];重庆医学;2014年03期

5 赵U

本文编号：299670