M2巨噬细胞的前期诱导和microRNA作为布病诊断标记的可行性研究
发布时间：2021-01-28 17:16
目的探讨以体外模型诱导M2型巨噬细胞的可行性方案。方法不同浓度的分化剂PMA体外诱导人单核细胞株THP-1获取巨噬细胞（THP-1-Mφ）,通过吞菌实验（在计数的基础上染色后用卡介苗侵染细胞）观察THP-1-Mφ的活性。分别用细胞增殖示踪荧光探针（CFDA SE）染液标记THP-1-Mφ为绿色,Hoechst 33342染液标记卡介苗（BCG）为蓝色,在活细胞工作站下观察巨噬细胞的吞噬活性。由于PMA的浓度以及诱导结束后用含10%血清RPMI 1640孵育细胞使得细胞恢复到对后续炎性刺激最佳状态的时间是决定能否在INF-γ、IL-4细胞因子作用下成功诱导出活化巨噬细胞M1/M2的关键要素,故比较了诱导结束后同一孵育时间不同诱导浓度对THP-1-Mφ细胞贴壁率的影响,同时用流式细胞术检测细胞表面标志分子（巨噬细胞测CD11b和CD14,M1型巨噬细胞测CD16和CD86,M2型巨噬细胞测CD206和CD163）摸索分化剂PMA影响后续巨噬细胞极化的最佳诱导浓度和诱导结束后细胞的孵育时间。结果（1）THP-1细胞在不同诱导剂的刺激作用下可分化为不同形态贴壁生长的细胞。（2）两染色液标记结果...
【文章来源】：内蒙古医科大学内蒙古自治区
【文章页数】：63 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
THP-1在诱导剂作用下分化为不同的细胞（×20）
10-610-510-410-310-210-1100101102The Diuted Concentration图 2-1 BCG 在不同稀释浓度下的菌落计数Fig. 2-1 BCG colony count of different concentrations（2）BCG 和 THP-1-Mφ 染色相差显微镜下可见红色箭头所指的是 THP-1-Mφ 细胞，贴壁生长，呈类圆形，而绿色箭头所指的 BCG 活菌为短小杆菌，略弯曲（图 2-2A）。荧光显微镜下蓝色荧光是由 Hoechst 33342 标记的 BCG，绿色荧光是由 CFDA SE 标记的THP-1-Mφ 细胞，橙色箭头所指的是 THP-1-Mφ 细胞吞噬 BCG 后，在细胞质可见蓝色荧光（图 2-2B）。A B
m工R一122和皿R146a单独或组合AUC值
【参考文献】：
期刊论文
[1]佛波酯联合脂多糖诱导THP-1炎症细胞模型的优化及评价[J]. 邹明月,席磊,饶菁菁,景一娴,廖飞,杨晓兰. 细胞与分子免疫学杂志. 2017(11)
[2]固有免疫功能相关的microRNAs在布鲁氏菌病患者中的表达情况[J]. 郑源强,于玖轩,韩新荣,石艳春. 中国免疫学杂志. 2016(09)
本文编号：3005369
【文章来源】：内蒙古医科大学内蒙古自治区
【文章页数】：63 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
THP-1在诱导剂作用下分化为不同的细胞（×20）
10-610-510-410-310-210-1100101102The Diuted Concentration图 2-1 BCG 在不同稀释浓度下的菌落计数Fig. 2-1 BCG colony count of different concentrations（2）BCG 和 THP-1-Mφ 染色相差显微镜下可见红色箭头所指的是 THP-1-Mφ 细胞，贴壁生长，呈类圆形，而绿色箭头所指的 BCG 活菌为短小杆菌，略弯曲（图 2-2A）。荧光显微镜下蓝色荧光是由 Hoechst 33342 标记的 BCG，绿色荧光是由 CFDA SE 标记的THP-1-Mφ 细胞，橙色箭头所指的是 THP-1-Mφ 细胞吞噬 BCG 后，在细胞质可见蓝色荧光（图 2-2B）。A B
m工R一122和皿R146a单独或组合AUC值
【参考文献】：
期刊论文
[1]佛波酯联合脂多糖诱导THP-1炎症细胞模型的优化及评价[J]. 邹明月,席磊,饶菁菁,景一娴,廖飞,杨晓兰. 细胞与分子免疫学杂志. 2017(11)
[2]固有免疫功能相关的microRNAs在布鲁氏菌病患者中的表达情况[J]. 郑源强,于玖轩,韩新荣,石艳春. 中国免疫学杂志. 2016(09)
本文编号：3005369
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