海分枝杆菌分泌蛋白的筛选及其对巨噬细胞功能的影响
发布时间：2021-02-09 10:20
结核分枝杆菌能够逃避宿主细胞的免疫防御并在宿主细胞内长期潜伏,是结核病难以被检测和治疗的根本原因。结核分枝杆菌的分泌蛋白是其与宿主细胞相互作用的重要媒介,在结核分枝杆菌的感染、复制、存活、潜伏等方面发挥着重要的作用。为了阐明结核分枝杆菌的致病机制及免疫逃逸机制,本文通过筛选模式生物海分枝杆菌的分泌蛋白,研究其分泌蛋白影响巨噬细胞免疫应答的功能作用,主要结果如下:（1）通过蛋白质组学测定海分枝杆菌上清滤液蛋白,得到356个响应双氧水胁迫的蛋白,821个响应缺铁胁迫的蛋白,其中201个蛋白同时响应双氧水胁迫和缺铁胁迫;（2）分析蛋白质组学测定结果,鉴定到204个蛋白为分泌相关的蛋白,其中PE/PPE家族蛋白和膜蛋白/跨膜蛋白占据了大部分的比例,约60%;（3）通过鉴定10个表达差异较大的分泌蛋白的功能,发现MMAR0071既能够刺激巨噬细胞TNF-α的转录,同时也能够抑制IL-1β的转录,其作为转录因子可能参与了细胞炎症反应信号通路的调控;MMAR1515（广谱应激蛋白）和MMAR2272（复苏促进因子）具有较高的细胞毒性;...
【文章来源】：华中农业大学湖北省 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：74 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
细菌分泌蛋白的分类Fig.1.3Theclassificationofbacterialsecretoryproteins
（包括 SecA1 和 SecA2）和 Tat 分泌系统是细菌中普遍存在的，而先发现于分枝杆菌属的一类特殊的蛋白质转运系统，又叫 VII 型2015）。分枝杆菌基因组上的 VII 型分泌系统有 5 个，并高度同源，分5。ESX-1 是最早发现的 VII 型分泌系统，也是目前验证底物最多的分泌系统的组分通常包括 ESAT-6/CFP-10 抗原复合物、FtsK/SpoRv3870 和 Rv3871）、MycP1 蛋白酶以及膜整合蛋白（Rv3877）等白 Rv3877 拥有 10-11 个跨膜结构域，被认为是内膜的易位通道蛋蛋白如何在外膜进行运输，至今仍是未知（Abdallah et al 2008）。X-1 分泌系统目前已知的工作模式，ESAT-6/CFP-10 抗原复合物首Rv3871）上，水解 ATP 产生跨膜运输的能量，然后被易位通道蛋白（。
图 1.5 吞噬体成熟的过程（Poirier andAv-Gay 2015）Fig. 1.5 The process of phagosome maturation (Poirier and Av-Gay 2015)（2）细胞骨架重建。细胞骨架作为贯穿整个细胞的细胞器，参与了真核细胞中重要的生命活动，不仅能够维持细胞形态，还控制着胞内小泡和其它细胞器的和定位，细胞骨架处于不断合成和解聚的动态平衡状态（Porter 1984，Fischer andler 2015）。细菌分泌蛋白能够和细胞骨架相关蛋白相互作用，从而调控细胞骨架建过程。例如，沙门氏菌 SifA 蛋白能够结合宿主 SKIP 蛋白，从而抑制驱动蛋Kinesin）招募到吞噬体膜的表面，也就抑制了吞噬体的转运和移动，从而有利门氏菌在巨噬细胞内存活（Boucrot et al 2005）。（3）裂解吞噬体膜。例如，志贺氏菌 IpaB 蛋白能够在吞噬体膜上造成孔洞，C 蛋白能够破坏磷脂双分子层的完整性，两者都会导致吞噬体膜的裂解，从而将释放到胞质中，有利于细菌的扩散（Blocker et al 1999）。
【参考文献】：
期刊论文
[1]结核分枝杆菌毒力相关因子的研究进展[J]. 王双双,曾范利,李东,宗颖,时坤,李健明,赵丹,杜锐. 中国兽医科学. 2018(06)
[2]新型抗结核药及其候选药物的研究进展[J]. 许红霞,杨少辉,邢健昆. 中国药房. 2015(04)
[3]分枝杆菌枝菌酸合成及其调控[J]. 罗红丽,庞蕾,谢建平. 微生物学报. 2012(02)
[4]海分枝杆菌mas基因的功能研究[J]. 朱江化,于佳,高谦. 微生物与感染. 2007(03)
[5]抗结核药物的作用机制及结核分枝杆菌的耐药机理(英文)[J]. 张颖,徐顺清,李传友. 中国抗生素杂志. 2004(12)
博士论文
[1]结核分枝杆菌新型疫苗的构建及免疫学评价[D]. 寇一鸣.吉林大学 2018
[2]脑微血管内皮细胞抗结核分枝杆菌感染的分子机制及结核分枝杆菌跨越血脑屏障体外模型的初步研究[D]. 陈西.华中农业大学 2015
[3]结核分枝杆菌分泌性效应分子的鉴定、功能与信号传递研究[D]. 李武.西南大学 2015
[4]海分枝杆菌细胞壁毒力成分分离鉴定及功能研究[D]. 董丹丹.复旦大学 2011
[5]海分枝杆菌致病基因的分离鉴定及功能研究[D]. 于佳.复旦大学 2010
本文编号：3025486
【文章来源】：华中农业大学湖北省 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：74 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
细菌分泌蛋白的分类Fig.1.3Theclassificationofbacterialsecretoryproteins
（包括 SecA1 和 SecA2）和 Tat 分泌系统是细菌中普遍存在的，而先发现于分枝杆菌属的一类特殊的蛋白质转运系统，又叫 VII 型2015）。分枝杆菌基因组上的 VII 型分泌系统有 5 个，并高度同源，分5。ESX-1 是最早发现的 VII 型分泌系统，也是目前验证底物最多的分泌系统的组分通常包括 ESAT-6/CFP-10 抗原复合物、FtsK/SpoRv3870 和 Rv3871）、MycP1 蛋白酶以及膜整合蛋白（Rv3877）等白 Rv3877 拥有 10-11 个跨膜结构域，被认为是内膜的易位通道蛋蛋白如何在外膜进行运输，至今仍是未知（Abdallah et al 2008）。X-1 分泌系统目前已知的工作模式，ESAT-6/CFP-10 抗原复合物首Rv3871）上，水解 ATP 产生跨膜运输的能量，然后被易位通道蛋白（。
图 1.5 吞噬体成熟的过程（Poirier andAv-Gay 2015）Fig. 1.5 The process of phagosome maturation (Poirier and Av-Gay 2015)（2）细胞骨架重建。细胞骨架作为贯穿整个细胞的细胞器，参与了真核细胞中重要的生命活动，不仅能够维持细胞形态，还控制着胞内小泡和其它细胞器的和定位，细胞骨架处于不断合成和解聚的动态平衡状态（Porter 1984，Fischer andler 2015）。细菌分泌蛋白能够和细胞骨架相关蛋白相互作用，从而调控细胞骨架建过程。例如，沙门氏菌 SifA 蛋白能够结合宿主 SKIP 蛋白，从而抑制驱动蛋Kinesin）招募到吞噬体膜的表面，也就抑制了吞噬体的转运和移动，从而有利门氏菌在巨噬细胞内存活（Boucrot et al 2005）。（3）裂解吞噬体膜。例如，志贺氏菌 IpaB 蛋白能够在吞噬体膜上造成孔洞，C 蛋白能够破坏磷脂双分子层的完整性，两者都会导致吞噬体膜的裂解，从而将释放到胞质中，有利于细菌的扩散（Blocker et al 1999）。
【参考文献】：
期刊论文
[1]结核分枝杆菌毒力相关因子的研究进展[J]. 王双双,曾范利,李东,宗颖,时坤,李健明,赵丹,杜锐. 中国兽医科学. 2018(06)
[2]新型抗结核药及其候选药物的研究进展[J]. 许红霞,杨少辉,邢健昆. 中国药房. 2015(04)
[3]分枝杆菌枝菌酸合成及其调控[J]. 罗红丽,庞蕾,谢建平. 微生物学报. 2012(02)
[4]海分枝杆菌mas基因的功能研究[J]. 朱江化,于佳,高谦. 微生物与感染. 2007(03)
[5]抗结核药物的作用机制及结核分枝杆菌的耐药机理(英文)[J]. 张颖,徐顺清,李传友. 中国抗生素杂志. 2004(12)
博士论文
[1]结核分枝杆菌新型疫苗的构建及免疫学评价[D]. 寇一鸣.吉林大学 2018
[2]脑微血管内皮细胞抗结核分枝杆菌感染的分子机制及结核分枝杆菌跨越血脑屏障体外模型的初步研究[D]. 陈西.华中农业大学 2015
[3]结核分枝杆菌分泌性效应分子的鉴定、功能与信号传递研究[D]. 李武.西南大学 2015
[4]海分枝杆菌细胞壁毒力成分分离鉴定及功能研究[D]. 董丹丹.复旦大学 2011
[5]海分枝杆菌致病基因的分离鉴定及功能研究[D]. 于佳.复旦大学 2010
本文编号：3025486
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