应用弹性蛋白酶诱导构建新型慢性阻塞性肺疾病合并骨质疏松症的动物模型
发布时间：2021-02-10 14:14
目的 :建立并评价弹性蛋白酶诱导小鼠慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease,COPD合并骨质疏松症模型。方法:24只健康雌性8周龄C57BL/6小鼠（重约18 g）随机分为3组,对照组予以气管内滴注生理盐水,实验1组和实验2组气管内滴注弹性蛋白酶,对照组和实验1组继续饲养8周后处死,实验2组继续饲养12周后处死。HE染色评估对照组和实验组小鼠肺组织与胫骨组织病理学改变。ELISA检测支气管肺泡灌洗液与血清相关炎症因子含量。Micro-CT检测小鼠股骨骨量相关参数。实时荧光定量PCR实验检测破骨与成骨相关基因表达情况。结果:肺组织病理显示实验组肺泡结构紊乱,肺泡壁变薄或断裂,肺泡腔扩大。肺泡灌洗液炎症因子IL-6与TNF-α较对照组明显升高（P<0.001）,血清炎症因子IL-1β与TNF-α较对照组明显上升（P<0.001）。实验组BV/TV（骨体积分数）、Tb.Th（平均骨小梁厚度）与Tb.N（平均骨小梁数）较对照组均明显降低（P<0.05）,实验组Tb.Sp（平均骨小梁分离度）和BS/BV（骨表面积分数）较对照...
【文章来源】：中国骨伤. 2020,33(04)
【文章页数】：7 页
【部分图文】：
小鼠COPD诱发的骨质疏松症模型评价2a,2b,2c．气管内滴注生理盐水后饲养8 周（2a．对照组）与滴注0.1 U弹性蛋白酶后分别饲养8 周（2b．实验1 组）和12周（2c．实验2组），3组胫骨组织HE染色（×100)2d,2e,2f.3组小鼠股骨远端三维CT重建（2d．对照组；2e．实验1 组；2f．实验2组）
为了进一步了解弹性蛋白酶诱发的小鼠COPD对骨代谢的影响，使用实时荧光定量PCR技术分析破骨相关基因与成骨相关基因mRNA的表达情况。实验1组与实验2组小鼠胫骨组织破骨相关基因NFATc1、c-Fos、CTSK与TRAP mRNA表达水平较对照组明显升高，差异有统计学意义（P<0.01）（表4）。胫骨组织CTSK免疫组织化学结果显示实验1组与实验2组CTSK表达水平较对照组明显升高（P<0.05）（图3，表4）。与之对应，检测发现实验1组与实验2组小鼠胫骨组织成骨相关基因COL1α、Runx2、ALP与OCN mRNA表达水平较对照组明显降低，差异有统计学意义（P<0.05）（表5）。实验组破骨与成骨相关基因表达水平均呈时间依赖。以上结果在一定程度上表明，弹性蛋白酶诱发的小鼠COPD既促进骨吸收又抑制骨形成。3 讨论
小鼠胫骨近端组织病理学结果显示实验1组与实验2组较对照组骨量明显降低（图2a,2b,2c）。随后对3组小鼠股骨行三维CT重建并对相关参数进行分析。Micro-CT图像显示实验组较对照组小鼠股骨骨量显著降低，表现为骨小梁变细、数量较少、间隙增宽（图2d,2e,2f）。实验1组与实验2组BV/TV（骨体积分数）、Tb.Th（平均骨小梁厚度）与Tb.N（平均骨小梁数）较对照组均明显降低，差异有统计学意义（P<0.05），实验2组测量值低于实验1组（表3）。此外，实验1组与实验2组Tb.Sp（平均骨小梁分离度）和BS/BV（骨表面积分数）较对照组明显增加，差异有统计学意义（P<0.01），且实验2组测量值高于实验1组（表3）。以上结果表明，小鼠COPD诱发骨质疏松症的发生发展，并随时间延长，严重程度增加。图2 小鼠COPD诱发的骨质疏松症模型评价2a,2b,2c．气管内滴注生理盐水后饲养8 周（2a．对照组）与滴注0.1 U弹性蛋白酶后分别饲养8 周（2b．实验1 组）和12周（2c．实验2组），3组胫骨组织HE染色（×100)2d,2e,2f.3组小鼠股骨远端三维CT重建（2d．对照组；2e．实验1 组；2f．实验2组）
【参考文献】：
期刊论文
[1]骨质疏松性椎体压缩性骨折椎体后凸成形术后隐性失血及其影响因素分析[J]. 管军辉,郑文标,黄皆和,王勇,杨晟,肖柏松,阮建伟. 中国骨伤. 2019(05)
[2]巨噬细胞极化在脊髓损伤中的作用机制[J]. 徐保平,姚敏,王晓涛,杨龙,田子睿,潘艳芳,崔学军. 中国骨伤. 2018(01)
[3]磨损微粒诱导细胞凋亡与无菌性松动的研究进展[J]. 刘国印,赵建宁,王瑞. 中国骨伤. 2013(09)
本文编号：3027492
【文章来源】：中国骨伤. 2020,33(04)
【文章页数】：7 页
【部分图文】：
小鼠COPD诱发的骨质疏松症模型评价2a,2b,2c．气管内滴注生理盐水后饲养8 周（2a．对照组）与滴注0.1 U弹性蛋白酶后分别饲养8 周（2b．实验1 组）和12周（2c．实验2组），3组胫骨组织HE染色（×100)2d,2e,2f.3组小鼠股骨远端三维CT重建（2d．对照组；2e．实验1 组；2f．实验2组）
为了进一步了解弹性蛋白酶诱发的小鼠COPD对骨代谢的影响，使用实时荧光定量PCR技术分析破骨相关基因与成骨相关基因mRNA的表达情况。实验1组与实验2组小鼠胫骨组织破骨相关基因NFATc1、c-Fos、CTSK与TRAP mRNA表达水平较对照组明显升高，差异有统计学意义（P<0.01）（表4）。胫骨组织CTSK免疫组织化学结果显示实验1组与实验2组CTSK表达水平较对照组明显升高（P<0.05）（图3，表4）。与之对应，检测发现实验1组与实验2组小鼠胫骨组织成骨相关基因COL1α、Runx2、ALP与OCN mRNA表达水平较对照组明显降低，差异有统计学意义（P<0.05）（表5）。实验组破骨与成骨相关基因表达水平均呈时间依赖。以上结果在一定程度上表明，弹性蛋白酶诱发的小鼠COPD既促进骨吸收又抑制骨形成。3 讨论
小鼠胫骨近端组织病理学结果显示实验1组与实验2组较对照组骨量明显降低（图2a,2b,2c）。随后对3组小鼠股骨行三维CT重建并对相关参数进行分析。Micro-CT图像显示实验组较对照组小鼠股骨骨量显著降低，表现为骨小梁变细、数量较少、间隙增宽（图2d,2e,2f）。实验1组与实验2组BV/TV（骨体积分数）、Tb.Th（平均骨小梁厚度）与Tb.N（平均骨小梁数）较对照组均明显降低，差异有统计学意义（P<0.05），实验2组测量值低于实验1组（表3）。此外，实验1组与实验2组Tb.Sp（平均骨小梁分离度）和BS/BV（骨表面积分数）较对照组明显增加，差异有统计学意义（P<0.01），且实验2组测量值高于实验1组（表3）。以上结果表明，小鼠COPD诱发骨质疏松症的发生发展，并随时间延长，严重程度增加。图2 小鼠COPD诱发的骨质疏松症模型评价2a,2b,2c．气管内滴注生理盐水后饲养8 周（2a．对照组）与滴注0.1 U弹性蛋白酶后分别饲养8 周（2b．实验1 组）和12周（2c．实验2组），3组胫骨组织HE染色（×100)2d,2e,2f.3组小鼠股骨远端三维CT重建（2d．对照组；2e．实验1 组；2f．实验2组）
【参考文献】：
期刊论文
[1]骨质疏松性椎体压缩性骨折椎体后凸成形术后隐性失血及其影响因素分析[J]. 管军辉,郑文标,黄皆和,王勇,杨晟,肖柏松,阮建伟. 中国骨伤. 2019(05)
[2]巨噬细胞极化在脊髓损伤中的作用机制[J]. 徐保平,姚敏,王晓涛,杨龙,田子睿,潘艳芳,崔学军. 中国骨伤. 2018(01)
[3]磨损微粒诱导细胞凋亡与无菌性松动的研究进展[J]. 刘国印,赵建宁,王瑞. 中国骨伤. 2013(09)
本文编号：3027492
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