单增李斯特菌1/2a血清型菌株生物膜形成能力及相关基因差异研究

发布时间：2021-02-13 01:14

　　目的检测5株1/2a血清型单增李斯特菌生物膜形成能力并分析其单增李斯特菌生物膜形成相关基因的携带情况,为进一步探究单增李斯特菌生物膜形成影响因素及致病机制提供线索。方法依据96孔微孔板结晶紫染色方法对5株单增李斯特菌进行了生物膜形成能力检测,并用扫描电镜观察生物膜形成情况。使用聚合酶链反应（PCR）技术对5株菌进行了生物膜形成相关的12对基因（sigB,prfA,yneA,hpt,relA,flaA,recA,agrA,luxS,degU,motB,bapL）全长的扩增及测序分析,通过与GeneBank中已公布的单增标准菌株EGD-e序列比对确定基因变异情况。结果 5株1/2a血清型单增李斯特菌形成生物膜的能力有所不同,结晶紫染色观察结果与扫描电镜观察结果较为一致。11种生物膜相关基因在5株单增李斯特菌中的检测结果全阳性,测序结果发现部分基因出现突变位点（多为同义突变,部分为非同义突变）。bapL基因在生物膜形成能力较低两株菌中为阳性,而在生物膜形成能力较高的两株菌中为阴性。结论不同的1/2a血清型单增李斯特菌间生物膜形成能力有所差异,5株1/2a血清型单增李斯特菌bapL基因携带与其... 

【文章来源】：中国人兽共患病学报. 2013,29(04)北大核心

【文章页数】：7 页

【部分图文】：

图１结晶紫染色法测定５株１／２ａ型单增李斯特菌生物膜形成量

检测结果为阳性，而生物膜形成能力较高菌株ＬＭ０８０、ＬＭ１５１的ｂａｐＬ基因检测为阴性。２．１．３４株１／２ａ血清型国内菌株的１１对基因序列比对分析对国内４株单增李斯特菌的１１种生物膜相关基因进行测序分析，并与ＧｅｎＢａｎｋ中公布的单增李斯特菌参考菌株ＥＧＤ－ｅ的相关基因序列进行比对，发现在许多基因的多个位点出现了突变，其中大部分均为同义突变，所编码的氨基酸序列未发生变化；同时在多株菌基因中也出现一些非同义突变的位点变化，结果见表３。图２ｂａｐＬ基因４对引物在５株菌中的ＰＣＲ扩增结果Ｆｉｇ．２ＰＣＲｐｒｏｄｕｃｔｓｏｆ４ｐａｉｒｓｏｆｓｐｅｃｉｆｉｃｐｒｉｍｅｒｓｏｆｂａｐＬｇｅｎｅＲｅｓｕｌｔｓｏｆＰＣＲｐｒｏｄｕｃｔｓａｍｐｌｉｆｉｅｄｂｙ４ｐａｉｒｓｏｆｓｐｅ－ｃｉｆｉｃｐｒｉｍｅｒｓｏｆｂａｐＬｇｅｎｅｏｆ５ｓｅｒｏｔｙｐｅ１／２ａｓｔｒａｉｎｓｗｅｒｅｓｈｏｗｎａｂｏｖｅ；１－５ｒｅｐｒｅｓｅｎｔｔｈｅｓｔｒａｉｎＬＭ１３６，ＬＭ１４１，ＥＧＤ－ｅ，ＬＭ８０，ａｎｄＬＭ１５１；ＴｈｅｌｅｎｇｔｈｓｏｆｆｏｕｒｔａｒｇｅｔｆｒａｇｍｅｎｔｓｗｅｒｅｂａｐＬ１（４０３ｂｐ），ｂａ－ｐＬ２（４８８ｂｐ），ｂａｐＬ３（７９１ｂｐ），ｂａｐＬ４（６３３ｂｐ）．２．３生物膜培养样品ＳＥＭ观察结果利用扫描电镜在１００００倍和１５０００倍视野条件下观察５株菌４０ｈ生物膜形成情况，生物膜形成能力高低与结晶紫染色结果一致，如图３所示。３讨论目前对单增李斯特菌生物膜形成的分子


本文编号：3031735