体外嗜碱性粒细胞激活试验法的建立

发布时间：2021-02-26 05:25

　　目的建立基于流式细胞仪检测的体外嗜碱性粒细胞激活试验（human basophil activation test,h-BAT）方法,并探索该方法用于Ⅰ型变态反应检查的可行性。方法利用人源白血病嗜碱性粒细胞KU812在Ⅰ型变态反应过程中经阳性剂激活后,细胞特异性表面抗原CD63和CD203表达特异性增强的原理建立体外Ⅰ型变态反应模型,并同步用人组胺酶联免疫法进行验证。结果确定以终浓度为2μg·mL^-1的N-甲酰甲硫氨酰-亮氨酰-苯丙氨酸为阳性剂,孵育2 h作为流式方法检测嗜碱性粒细胞激活的阳性成立条件,细胞相对组胺释放百分比增高结果进一步确认了阳性成立条件。结论 h-BAT法有测试简便、评价客观等优点,是一种较好的过敏反应细胞模型,可以用于现有豚鼠试验的替代。 

【文章来源】：中国现代应用药学. 2020,37(08)北大核心

【文章页数】：4 页

【文章目录】：
1 仪器和材料
    1.1 仪器
    1.2 细胞株
    1.3 实验试剂
2 方法
    2.1 体外模型的建立
    2.2 组胺相对释放量测定
    2.3 数据分析
3 结果
    3.1 通过组胺释放量选择阳性剂
    3.2 确定细胞模型的特异表面标志物
    3.3 确定KU812细胞模型fMLP阳性剂的孵育时间和孵育浓度
    3.4 嗜碱性粒细胞激活试验流程
4 讨论



本文编号：3052118