miR-22在压应力下软骨终板细胞中的表达及其对靶基因MMP-1的调控作用

发布时间：2021-03-03 14:17

　　目的应用miRNA芯片技术筛选压应力下人软骨终板细胞中差异表达的miRNAs,研究与压应力相关的miR-22并进行生物信息学分析,探讨其对靶基因MMP-1的调控。方法将6个月意外流产胎儿软骨终板进行软骨终板细胞的分离、培养。将第2代软骨细胞按实验要求种板培养并随机分为加压组与对照组。加压组施加周期性压力（5 MPa,6 h×5 d）,使用TRIzol法提取各组RNA,miRNA芯片检测miRNA表达情况,然后用Realtime PCR（RT-PCR）对差异表达miR-22进行验证。通过靶基因预测软件预测MMP-1与miR-22基因的关系,miR-22 mimics脂质体转染Hela细胞后通过RT-PCR进一步验证。结果芯片扫描结果显示加压组miR-22下调明显。RT-PCR检测显示压应力下人软骨终板细胞miR-22表达显著降低。miR-22 mimics转染目标细胞48 h后,miR-22的表达显著增高,同时MMP-1基因表达显著降低。结论压应力下miR-22异常表达,miR-22可靶向负调控与软骨终板细胞退变相关的MMP-1基因。 

【文章来源】：生物骨科材料与临床研究. 2020,17(03)

【文章页数】：5 页

【部分图文】：

芯片聚类分析显示miR-22表达显著降低

TargetScan预测miR-22与MMP-1 3"UTR结合位点

RT-PCR检测压应力下人软骨终板细胞miR-22表达显著降低（*表示<0.05)

【参考文献】：
期刊论文
[1]压应力对人软骨终板细胞MMP-1、3、13和TIMP-1表达的影响研究[J]. 丁亮,唐果,薛锋,肖海军,何志敏,沈玉春.  生物骨科材料与临床研究. 2018(01)



本文编号：3061412