小鼠肺组织内造血干细胞分离、纯化与诱导
发布时间：2021-03-05 13:56
目的:本研究旨在通过密度梯度离心法、流式细胞术和体外细胞培养的方法,探索小鼠肺组织内造血干细胞（hematopoietic sterm cell,HSC）分离、纯化与诱导分化为树突状细胞（dendriric cell,DC）的方法,为肺组织内造血干细胞进一步研究奠定基础并且为树突状细胞的诱导分化提供一种新的实验路径。方法:1、将24只C57健康雄性小鼠随机分为6组,每组4只,肺组织来源的细胞为实验组,同时采集外周血,其来源的细胞为对照组。肺组织经I型胶原酶和I型DNA酶消化制成单细胞悬液。实验组和对照组分别经淋巴细胞分离液,分离纯化为肺单个核细胞。2、瑞氏吉姆萨染色后倒置相差显微镜观察实验组和对照组单个核细胞的形态。3、流式细胞仪鉴定、分选Lin-Sca-1+c-Kit+细胞（LSK）及造血干细胞。4、向所获得的HSC加入SCF和IL-3促进细胞增殖并计数,停用SCF和IL-3后,加入粒GM-CSF和IL-4诱导分化为DC,加入脂多糖（lipopolysaccharide,LPS）促细胞成熟。5、倒置显微镜观察细胞生长情...
【文章来源】：山西医科大学山西省
【文章页数】：47 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
实验组单个核细胞，10×100
对照组单个核细胞，10×100
山西医科大学硕士学位论文2.2 肺组织内造血干细胞的鉴定、纯化1 ml 小鼠外周血共收集单个核细胞 40115.40±1448.40 个、经抗体标记后,造血干细胞群(Lin–Sca-1+c-Kit+)的比例为 0±0(图 2A 、B、C),小鼠外周血内分离出造血干细胞；4 只小鼠肺组织共收集肺单个核细胞 35018.80±4533.71，经抗体标记后,造血干细胞(Lin–Sca-1+c-Kit+)的总量 2441.40±265.94 个，纯度约 6.79%(图 2D、E、F)。
【参考文献】：
期刊论文
[1]肺组织修复中肺内外干细胞的作用、功能及问题[J]. 陈艳,刘弦. 中国组织工程研究. 2018(33)
[2]小鼠骨髓造血干细胞的分离纯化及电镜观察[J]. 张小翠,谷浩,赵犇鹏,符蓉,于卓. 中国细胞生物学学报. 2018(04)
[3]小鼠造血干细胞表型及其分离纯化的研究进展[J]. 田晨,张翼鷟. 中国实验血液学杂志. 2012(01)
[4]小鼠肺间质树突状细胞的分离、纯化与鉴定[J]. 王宏伟,陆江阳,田光,刘茜,赵敏,杨毅,康佳蕊. 中国免疫学杂志. 2011(09)
[5]干细胞抗原-1（Sca-1）在干/祖细胞自我更新和分化中的作用研究[J]. 刘达,陈平. 医学信息(中旬刊). 2011(09)
硕士论文
[1]小鼠骨髓来源调节性树突状细胞的体外培养和鉴定[D]. 祁雪萍.山西医科大学 2012
本文编号：3065316
【文章来源】：山西医科大学山西省
【文章页数】：47 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
实验组单个核细胞，10×100
对照组单个核细胞，10×100
山西医科大学硕士学位论文2.2 肺组织内造血干细胞的鉴定、纯化1 ml 小鼠外周血共收集单个核细胞 40115.40±1448.40 个、经抗体标记后,造血干细胞群(Lin–Sca-1+c-Kit+)的比例为 0±0(图 2A 、B、C),小鼠外周血内分离出造血干细胞；4 只小鼠肺组织共收集肺单个核细胞 35018.80±4533.71，经抗体标记后,造血干细胞(Lin–Sca-1+c-Kit+)的总量 2441.40±265.94 个，纯度约 6.79%(图 2D、E、F)。
【参考文献】：
期刊论文
[1]肺组织修复中肺内外干细胞的作用、功能及问题[J]. 陈艳,刘弦. 中国组织工程研究. 2018(33)
[2]小鼠骨髓造血干细胞的分离纯化及电镜观察[J]. 张小翠,谷浩,赵犇鹏,符蓉,于卓. 中国细胞生物学学报. 2018(04)
[3]小鼠造血干细胞表型及其分离纯化的研究进展[J]. 田晨,张翼鷟. 中国实验血液学杂志. 2012(01)
[4]小鼠肺间质树突状细胞的分离、纯化与鉴定[J]. 王宏伟,陆江阳,田光,刘茜,赵敏,杨毅,康佳蕊. 中国免疫学杂志. 2011(09)
[5]干细胞抗原-1（Sca-1）在干/祖细胞自我更新和分化中的作用研究[J]. 刘达,陈平. 医学信息(中旬刊). 2011(09)
硕士论文
[1]小鼠骨髓来源调节性树突状细胞的体外培养和鉴定[D]. 祁雪萍.山西医科大学 2012
本文编号：3065316
本文链接：https://www.wllwen.com/yixuelunwen/jichuyixue/3065316.html
