PBX1通过ERK促进人皮肤黑色素（干）细胞增殖及其机制初探

发布时间：2021-03-11 14:03

　　研究背景:黑色素细胞来源于神经嵴。随着胚胎的发育,神经嵴细胞及其产物通过背外侧、腹外侧途径形成成黑素细胞,向毛囊、表皮、眼葡萄膜、软脑膜和内耳迁移,使毛发和皮肤着色并且参与听力和视力的调节。当黑色素细胞系发育障碍时,会引起听力、视力的丧失,皮肤色素沉着障碍性疾病以及黑色素瘤。环境污染、内在毒素均能影响黑色素细胞的发育。上述疾病的研究及毒理学评价工作的开展均可以黑色素细胞和黑色素干细胞作为种子来源,但其体外传代能力有限,易于分化,满足不了细胞生物学研究的需求。PBX1是细胞转录因子,可维持干细胞的自我更新及干性,且具有促进细胞增殖作用。研究目的:研究过表达PBX1对人皮肤黑色素（干）细胞的增殖作用,探讨过表达PBX1促进人皮肤黑色素（干）细胞增殖的相关机制。研究方法:1.人皮肤黑色素（干）细胞的分离、培养与鉴定取行包皮环切术的成年人、青少年包皮组织,分别把组织剪切成1 mm×1 cm大小,浸泡于DispaseⅡ溶液中,4℃冰箱过夜,分离真、表皮组织。次日,用含EDTA的0.25%胰酶消化表皮组织,获取细胞,离心后用选择培养基培养细胞,RT-PCR、免疫荧光、Western Blot方法检... 

【文章来源】：吉林大学吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：77 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

黑色素细胞来源模式图

用镊子将真皮、表皮剥离。由图 3.1 可见：表皮部分颜色比较黑，如图 3A；真皮部分呈现肉色，如图 3.1-B。用 0.25 %（含 EDTA）胰酶对表皮组织行消化处理，分离获取的细胞置于 21cm2培养皿中培养，即原代细胞，3 周可见细胞呈两极或多极形状以及鹅卵石状排列，如图 3.1-C。细胞传代，在选培养基 MK 筛选下鹅卵石状排列的细胞基本消失，如 3.1-D。A.组织(表皮部分) B.组织（真皮部分)

第 3 章 实验结果3.2 RT-PCR 检测分离培养的人皮肤黑色素细胞相关基因通过文献查找人源 TYR 、TYRP1、TYRP2、C-KIT、MITF、PAX3、GAPDH基因特异性扩增引物。在 NCBI 引物库中上查找 SOX10 基因扩增引物。提取细胞总 RNA，逆转录为 cDNA，利用 PCR 技术扩增出基因序列，将扩增产物通过琼脂糖凝胶电泳分离，如图 3.2。

【参考文献】：
期刊论文
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本文编号：3076583