自噬在溶血磷脂酰胆碱诱导小鼠睾丸间质TM3细胞凋亡中的作用
发布时间：2021-03-18 13:42
目的:溶血磷脂酰胆碱（lysophosphatidylcholine,LPC）是磷脂酶A2水解磷脂酰胆碱后产生的,是一种可在病理状态下产生的具有生物活性的脂质。LPC可破坏细胞膜的完整性,并可诱导细胞凋亡。然而,LPC是否可诱导小鼠睾丸间质细胞凋亡,国内外未见相关报道。本课题主要通过体外细胞实验探讨LPC对小鼠睾丸间质细胞凋亡的影响,同时观察自噬在LPC诱导小鼠睾丸间质细胞凋亡中的作用。方法:用MTT法检测LPC对小鼠睾丸间质TM3细胞活性的影响;用氧化应激检测试剂盒检测LPC对小鼠睾丸间质TM3细胞氧化应激的影响;分别用Western blot和Annexin V-FITC/PI双染色法检测LPC对小鼠睾丸间质TM3细胞凋亡的影响;用Western blot检测LPC对小鼠睾丸间质TM3细胞自噬的影响。结果:用不同浓度的LPC（0,2.5,5,10,20,40,80,160μM）处理小鼠睾丸间质TM3细胞48 h,MTT结果显示,2.5,5和10μM浓度的LPC可显著抑制TM3细胞活性,而20,40,80,160μM浓度的LPC抑制TM3细胞活性则更显著（P&l...
【文章来源】：南昌大学江西省 211工程院校
【文章页数】：46 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
LPC对小鼠睾丸间质TM3细胞活性的影响
第 3 章 结果的 TM3 细胞接种至 10 cm 细胞培养皿中，在培养 24 h 使细胞处于对数生长期后，分别用 0, 2.5, 5, 10 μM 浓度的 LPC 作用细胞 48 h ，然后用细胞刮收集细胞并制成蛋白样品，用 Western blot 检测小鼠睾丸间质 TM3 细胞内凋亡相关蛋白 Bax、Caspase-3、Caspase-8 和 Bcl-2 的表达。结果显示，LPC 处理组中的 Bax、cleavedCaspase-3 和 cleaved Caspase-8 蛋白表达显著增加，Bcl-2 蛋白含量则显著下降；以上结果表明，LPC 可诱导小鼠睾丸间质 TM3 细胞凋亡。（图 2）
图 3. LPC 对小鼠睾丸间质 TM3 细胞凋亡的影响. Effect of LPC on apoptosis of mouse Leydig TM3 cells. TM3 cells w), 2.5 (b), 5 (c), 10 (d) μM LPC for 48 h; then the annexin V-FITC（+）/P（I+）+）/PI（-） cells were counted by flow cytometry.PC 诱导小鼠睾丸间质 TM3 细胞产生氧化应激了明确 LPC 是否可使小鼠睾丸间质 TM3 细胞产生氧化应激，同浓度的 LPC（0, 2.5, 5, 10 μM）处理 TM3 细胞 48 h 后，收集激试剂盒检测细胞内谷胱甘肽（GSH）和丙二醛（MDA）的含 GSH-PX 和 SOD 的活性。与对照组相比，LPC 呈浓度依赖式地 含量，并增加 MDA 含量；LPC 还呈浓度依赖式地降低细胞内 活性（图 4）。以上结果表明，LPC 可诱导小鼠睾丸间质细胞产
【参考文献】：
期刊论文
[1]雷帕霉素转换在肝移植术后肾功能不全患者中的应用[J]. 余思,何晓顺,马毅,胡安斌,巫林伟,朱晓峰. 南方医科大学学报. 2009(11)
[2]小鼠脑组织中溶血卵磷脂和卵磷脂含量的简便分析方法[J]. 侯威远,龙鼎新,李琴,李薇,伍一军. 中国比较医学杂志. 2008(04)
[3]胰性脑病临床治疗的探讨[J]. 钱祝银,苗毅,刘训良,杜竞辉. 中国现代普通外科进展. 2001(02)
本文编号：3088421
【文章来源】：南昌大学江西省 211工程院校
【文章页数】：46 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
LPC对小鼠睾丸间质TM3细胞活性的影响
第 3 章 结果的 TM3 细胞接种至 10 cm 细胞培养皿中，在培养 24 h 使细胞处于对数生长期后，分别用 0, 2.5, 5, 10 μM 浓度的 LPC 作用细胞 48 h ，然后用细胞刮收集细胞并制成蛋白样品，用 Western blot 检测小鼠睾丸间质 TM3 细胞内凋亡相关蛋白 Bax、Caspase-3、Caspase-8 和 Bcl-2 的表达。结果显示，LPC 处理组中的 Bax、cleavedCaspase-3 和 cleaved Caspase-8 蛋白表达显著增加，Bcl-2 蛋白含量则显著下降；以上结果表明，LPC 可诱导小鼠睾丸间质 TM3 细胞凋亡。（图 2）
图 3. LPC 对小鼠睾丸间质 TM3 细胞凋亡的影响. Effect of LPC on apoptosis of mouse Leydig TM3 cells. TM3 cells w), 2.5 (b), 5 (c), 10 (d) μM LPC for 48 h; then the annexin V-FITC（+）/P（I+）+）/PI（-） cells were counted by flow cytometry.PC 诱导小鼠睾丸间质 TM3 细胞产生氧化应激了明确 LPC 是否可使小鼠睾丸间质 TM3 细胞产生氧化应激，同浓度的 LPC（0, 2.5, 5, 10 μM）处理 TM3 细胞 48 h 后，收集激试剂盒检测细胞内谷胱甘肽（GSH）和丙二醛（MDA）的含 GSH-PX 和 SOD 的活性。与对照组相比，LPC 呈浓度依赖式地 含量，并增加 MDA 含量；LPC 还呈浓度依赖式地降低细胞内 活性（图 4）。以上结果表明，LPC 可诱导小鼠睾丸间质细胞产
【参考文献】：
期刊论文
[1]雷帕霉素转换在肝移植术后肾功能不全患者中的应用[J]. 余思,何晓顺,马毅,胡安斌,巫林伟,朱晓峰. 南方医科大学学报. 2009(11)
[2]小鼠脑组织中溶血卵磷脂和卵磷脂含量的简便分析方法[J]. 侯威远,龙鼎新,李琴,李薇,伍一军. 中国比较医学杂志. 2008(04)
[3]胰性脑病临床治疗的探讨[J]. 钱祝银,苗毅,刘训良,杜竞辉. 中国现代普通外科进展. 2001(02)
本文编号：3088421
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